候选转移抑制基因通过调控肝细胞生长因子／c—Met信号通路影响膀胱癌BIU87细胞生物学功能的研究

目的观察候选转移抑制基因（MTSS1）通过调控肝细胞生长因子（HGF）／c—Met信号通路对膀胱癌BIU87细胞生物学功能的影响。方法培养膀胱癌BIU87细胞，将传代的细胞分为以下3组：A组：PEFMTSSl和PSV2neo共转染组；B组：阴性对照小干扰RNA（shNC）和PSV2neo共转染组；C组：未转染组，A组为实验组，B、C两组为阳性对照组和阴性对照组。通过Westernblot和实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测MTSS1蛋白和mRNA在3组细胞中的表达水平，并检测3组BIU87细胞中c—Met、E一钙黏蛋白（E-cadherin）和N一钙黏蛋白（N—eadherin）蛋白和mRNA水平表达变化，并通过流式细胞法和划痕实验观察比较转染PEFMTSSl的BIU87细胞的的迁移能力和增殖凋亡情况。结果（1）Westernblot和Real-timePCR检测结果显示：与B、C组比较，PEFMTSS1组MTSS1蛋白及mRNA表达均显著下调（P〈0．01），c—Met蛋白及其mRNA的表达显著下调（P〈0．01）。（2）Westernblot和Real—timePCR检测结果显示：与B、C组比较，A组上皮标志物E—eadherin蛋白和及mRNA表达显著上调（P〈0．01），c-Met蛋白及其mRNA，间质细胞标志物N—cadherin蛋白及mRNA的表达显著下调（P〈0．01），B、C两组间E—eadherin和N—eadherin蛋白及mRNA表达的差异无统计学意义（P〉0．01）。（3）划痕实验检测细胞迁移：结果表明，A组划痕间距较宽，愈合被抑制，BIU87细胞迁移能力低于B、C组细胞（P〈0．01），B、C两组细胞的划痕间距差异无统计学意义（P〉0．叭）。（4）流式细胞仪分析细胞凋亡：A、B和C组细胞的凋亡率分别为（26．73±3．72）％、（4．28-t-O．68）％和（2．73±0．41）％，A组细胞的凋亡率较C组明显增加（P〈0．01），B、C两组细胞凋亡的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTSSl基因转染对体外膀胱癌细胞株BIU87细胞具有促进增殖和抑制凋亡作用，其可能是通过调控HGF／c—Met信号转导通路来发挥作用。

胶质瘤组织中TSSC1的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响

目的研究肿瘤抑制可转移候选基因1(TSSC1)在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤U87细胞生物学行为的影响。方法采用Real time-PCR和Western blot检测80例胶质瘤(Ⅰ期25例,Ⅱ期32例,Ⅲ期15例,Ⅳ期8例)组织和瘤旁组织中TSSC1的表达,采用化学合成的针对TSSC1基因的2个小干扰RNA(siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2)下调该基因的表达,通过MTT和Transwell法分别检测TSSC1对U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果TSSC1在胶质瘤组织中的表达低于相应的瘤旁组织,同时在临床分期Ⅲ期、Ⅳ期中较Ⅰ期表达降低,将siRNA-TSSC1-1和siRNA-TSSC1-2转染入U87细胞后,U87细胞中TSSC1 mRNA和蛋白表达水平都明显降低,细胞增殖能力显著增强,细胞的迁移和侵袭能力显著增强。结论 TSSC1有望成为胶质瘤早期诊断和预测预后的生物分子标志物。