检测甜菜食糖菌落总数的胶膜法与平皿倾注法应用对比试验

本文对测定甜菜食糖菌落总数的胶膜法和平皿倾注法进行了对比、检验结果表明：胶膜法菌落计数结果低于平皿倾注法，但二者计数误差在同一数量级上；样品合格率经统计学处理，无显著差异。胶膜法操作简便，成本低廉，适合基层实验室使用。

午时茶颗粒微生物限度检查方法的验证

按照《中华人民共和国药典》(2020年版四部)要求,采用平皿倾注法(1∶10,1∶20,1∶50,1∶100)和常规培养基体积直接接种法对午时茶颗粒进行微生物计数方法和控制菌检查方法适用性试验,通过计算3批次的试验菌回收比值筛选需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数方法.当采用平皿倾注法(1∶10)时,各试验菌回收比值均在0.5~2.0范围内.控制菌阳性对照组生长良好,经革兰氏染色显微镜检查和生化鉴定试验,符合试验菌形态学和生化特性.研究建立的方法准确可行,重现性好,可用于午时茶颗粒的微生物限度检查.

速康宁滴眼液和速康宁滴鼻液的生物检查方法适用性研究

目的建立速康宁滴眼液和速康宁滴鼻液的生物检查方法,并评估检查方法的适用性。方法参照《中华人民共和国药典》,采用薄膜过滤法对速康宁滴眼液进行无菌检查,采用倾注平皿法和薄膜过滤法对速康宁滴鼻液进行微生物限度检查,采用直接接种法和薄膜过滤法对速康宁滴鼻液进行控制菌检查,并对上述方法进行适用性试验。结果以0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为300 mL)进行薄膜过滤法检测,可以对速康宁滴眼液中的大肠埃希菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉菌进行无菌检查;分别以0.9%无菌氯化钠溶液及含0.1%(体积比)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为500 mL)进行薄膜过滤法检测,可对速康宁滴眼液中的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌进行无菌检查。以含0.1%(体积比)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为500 mL)进行薄膜过滤法检测,可以对速康宁滴鼻液中的需氧菌(铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)进行微生物限度检查及控制菌检查,采用倾注平皿法可以对速康宁滴鼻液中的霉菌和酵母菌(白色念珠菌和黑曲霉菌)进行微生物限度检查。结论速康宁滴眼液的无菌检查、速康宁滴鼻液的需氧菌微生物限度检查及控制菌检查均可采用薄膜过滤法,速康宁滴鼻液的霉菌及酵母菌微生物限度检查可采用倾注平皿法。上述检查方法实用简便、准确可靠且重现性好。

葛根汤颗粒微生物限度检查方法的适用性试验研究

建立葛根汤颗粒的微生物限度检查方法。按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则,采用平皿倾注法(1∶10)和增加稀释液体积法对药典规定的5种试验菌株进行微生物计数方法回收试验,计算回收比值。采用常规培养基体积和增加培养基体积对控制菌检查中的大肠埃希菌检查进行方法适用性试验,通过增菌、选择和分离培养等试验,考察方法适用性。结果显示,采用平皿倾注法(1∶10)时,霉菌和酵母菌总数计数中白色念珠菌和黑曲霉回收比值均在0.5~2.0范围内;需氧菌总数计数中铜绿假单孢菌和枯草芽孢杆菌回收比值小于0.5。采用平皿倾注法(1∶50)时,需氧菌总数计数5种规定试验菌株的回收比值均在0.5~2.0范围内;采用常规培养基体积直接接种法检查大肠埃希菌,阳性对照组检出试验菌,阴性对照组和供试品组均未检出试验菌。可采用平皿倾注法(1∶50)计数葛根汤颗粒需氧菌总数,可采用平皿倾注法(1∶10)计数霉菌和酵母菌总数,可采用常规培养基体积检查大肠埃希菌。本研究建立的葛根汤颗粒微生物限度检查方法有效可行。

环境采样标本倾注平皿和平板划线两种方法接种结果对比分析

目的探讨倾注平皿法和平板划线法接种效果的灵敏性和检出细菌的阳性率。方法将2010年12月-2011年3月环境采样标本219份和透析用水样本84份,分别采用1ml倾注平皿法和100μl平板划线法接种,培养48h后判读结果,比较细菌生长标本数和阳性率。结果消毒液、物体表面、手和透析用水标本采用倾注平皿法和平板划线法培养出的阳性率分别为0、0、17.19%、1.72%、25%和0、1.33%、15.63%、5.17%、35.71%,经t检验,仅透析用水采用两种方法接种的细菌生长数差异有统计学意义(P<0.05),但其阳性率差异无统计学意义;其他标本采用两种方法接种培养的结果阳性率及细菌生长计数差异均无统计学意义。结论实际工作中平板划线法简单、易行,可操作性强,可代替倾注平皿法。

复黄片微生物限度检查方法适用性探究

目的探究复黄片微生物限度检查方法适用性。方法根据2015年版《中国药典》(四部)通则1105非无菌产品微生物限度检查中的微生物计数法,通则1106非无菌产品微生物限度检查中的控制菌检查法和通则1107非无菌药品微生物限度标准,进行方法适用性试验。结果采用薄膜过滤法测定需氧菌总数(1∶10,1 mL/膜),平皿倾注法测定霉菌和酵母菌总数(1∶10,1 mL/皿),5种试验菌株的回收率比值均在0.5~2之间。控制菌检查法采用培养基稀释法(200 mL TSB),进行大肠埃希氏菌检查。结论该方法稳定可靠,准确度高,可作为复黄片微生物限度的检查方法。

糠酸莫米松鼻喷雾剂的微生物计数方法及抑菌效力研究

目的建立糠酸莫米松鼻喷雾剂微生物计数方法,研究该制剂的抑菌效力。方法按《中国药典》2015年版四部“微生物计数法”及“抑菌效力检查法”,以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和白色念珠菌为试验菌,对糠酸莫米松鼻喷雾剂进行微生物计数回收率实验和抑菌效力检查。结果采用平皿倾注法(稀释液为含0.1%卵磷脂+0.3%吐温-80的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液),5种实验菌的回收率均>70%;细菌组在供试品接种2d后,计数值减少均>2lg;在接种7d后,计数值减少均>3lg,且在28d时均无增加;真菌组在供试品接种14d后,计数值减少均>2lg,且在以后至28d均无增加。结论糠酸莫米松鼻喷雾剂可采用平皿法进行微生物计数,其抑菌剂的抑菌能力可达到《中国药典》2015年版四部“鼻用制剂抑菌效力判断标准A”的要求。

丹珍头痛胶囊微生物限度检查方法研究

目的建立丹珍头痛胶囊的微生物限度检查方法。方法根据2015年版《中国药典(四部)》通则1105非无菌产品微生物限度检查中的微生物计数法,通则1106非无菌产品微生物限度检查中的控制菌检查法和通则1107非无菌药品微生物限度标准进行方法适用性试验。结果采用薄膜过滤法测定需氧菌总数,平皿法-倾注法测定霉菌和酵母菌总数;控制菌检查法采用常规法供试品阳性对照组检查阳性目标菌。结论该方法可作为丹珍头痛胶囊微生物限度的检查方法。

西瓜霜润喉片微生物限度检查方法的建立

目的:建立西瓜霜润喉片的微生物限度检查方法。方法:按照《中国药典》2020年版四部要求,采用平皿倾注法(1∶10,1∶50,1∶100)、中和法进行微生物计数方法适用性试验,通过计算回收比值筛选检查方法。结果:西瓜霜润喉片的需氧菌总数计数采用中和法、霉菌和酵母菌总数计数采用平皿倾注法(1∶10)时,各试验菌回收比值均在0.5~2范围内;控制菌检查中除沙门菌采用培养基稀释法外,其他检查项目均采用常规培养基体积。结论:本研究确定的方法准确可行,重现性好,可用于西瓜霜润喉片的微生物限度检查。

新癀片微生物限度检查方法适用性研究

目的:建立新癀片的微生物限度检查方法。方法:按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则1105、1106、1107对新癀片开展微生物限度检查方法适用性研究。结果:新癀片对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有抑菌活性,采用1∶100供试液时,需氧菌总数计数方法成立;霉菌和酵母菌总数计数可采用平皿倾注法(1∶10);控制菌检查中金黄色葡萄球菌采用培养基稀释法(500 mL),其余采用常规检查法。控制菌检查采用常规检查法时,大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌、沙门菌和铜绿假单胞杆菌阳性对照组生长良好,金黄色葡萄球菌阳性对照组无菌落生长,上述5种控制菌的供试品组和阴性对照组均无菌落生长;采用培养基稀释法(500 mL)时,金黄色葡萄球菌阳性对照组生长良好,供试品组和阴性对照组无菌落生长。结论:本研究建立的方法有效可行,可用于新癀片微生物限度检查。

益康胶囊微生物限度检查方法适用性研究

目的建立益康胶囊的微生物限度检查方法。方法按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则1105,1106,1107对益康胶囊开展方法适用性研究,首先采用平皿倾注法(1∶10)进行初步试验,通过计算菌株回收比值,对照标准要求筛选对益康胶囊敏感的菌株,然后采用增加稀释液体积的方法去除其抑菌活性。结果当需氧菌总数采用平皿倾注法(1∶20),霉菌和酵母菌总数采用平皿倾注法(1∶10)时,各试验菌株回收比值均在0.5~2范围内;控制菌检查采用常规检查法时,阳性对照组生长良好,阴性对照组无菌落生长,均符合标准要求。结论需氧菌总数采用平皿倾注法(1∶20)、霉菌和酵母菌总数采用平皿倾注法(1∶10)、控制菌检查采用常规检查法时,方法有效可行,重现性好,可为药品生产企业或相关药品检验机构开展益康胶囊的微生物限度检查工作提供参考。

微孔膜渗透法用于饮料细菌总数检验的初步探讨

本文选用微孔膜渗透法与平皿倾注法对饮料5种6批次150件样品进行了细菌总数测定。两种方法检验结果复合率达96％以上,经统计处理t=1.137,t【t0.051.997,故P】0.05,两种方法无显著性差异。细菌总数是一项评价饮料污染程度的重要判断指标,是检验室的一项大量常规工作。既往使用平皿倾注法,操作繁琐,费工费料,牵扯大量人力物力,不利于卫生监督人员及时地进行深入基层的现场卫生监督监测。为在工作中选择一种简单易行、结果可靠的新方法。

奥硝唑胶囊微生物限度检查方法的研究

目的建立奥硝唑胶囊微生物限度检查方法。方法根据《中国药典》2015版四部通则1105非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法、1106非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法和通则1107非无菌药品微生物限度标准进行方法适用性试验。结果采用薄膜过滤法测定需氧菌总数,平皿法-倾注法测定霉菌和酵母菌总数;采用薄膜过滤法测定控制菌(大肠埃希菌)。结论上述方法可作为该产品微生物限度检查方法。

青翘感冒颗粒微生物限度检查方法的建立

目的:建立青翘感冒颗粒微生物限度检查方法。方法:按照《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)2020年版四部通则,分别采用平皿倾注法、稀释法和薄膜过滤法对青翘感冒颗粒进行方法适用性试验。结果:青翘感冒颗粒的需氧菌总数计数采用薄膜过滤法、霉菌和酵母菌总数计数采用平皿倾注法(1:10),各试验菌回收率均在50%~200%的范围内;控制菌检查(大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌和沙门菌)采用常规法,试验菌均能检出,且生长良好,阴性对照组无菌落生长。结论:青翘感冒颗粒的微生物限度检查方法经验证,该方法有效可行。

6组同方同效不同剂型中成药的微生物限度检查方法

目的建立肾衰宁胶囊(颗粒)等6组同方同效不同剂型中成药的微生物限度检查方法。方法对同一(不同)企业生产的6组同方同效不同剂型(胶囊剂、颗粒剂、片剂)中成药,按照《中华人民共和国药典》2020年版四部规定,采用平皿倾注法、增加稀释倍数、稀释联合中和法、稀释联合薄膜过滤法等循序渐进开展微生物限度检查方法适用性试验。结果6组样品中有4个组别的6种样品有抑菌活性,用增加稀释倍数的方法可以去除4种样品的抑菌活性,2种样品需要联合应用2种方法。4组有抑菌活性的样品中,抑菌活性表现为胶囊剂较强的2组,片剂较强的1组,颗粒剂较强的1组。结论有抑菌活性的中成药,不仅与处方组成药味有关,而且与制备工艺密切相关。同一(不同)企业生产的同方同效不同剂型的抑菌活性均可能出现不一致。本研究确定的6组14种同方同效不同剂型中成药微生物限度检查方法简便易行、重现性好,可为药品生产企业和监管机构提供参考。

参松养心胶囊微生物限度检查方法研究

目的 对参松养心胶囊的微生物限度检查进行方法适用性研究。方法 按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则1105、1106和1107,分别采用平皿倾注法、增加稀释倍数及中和法联合使用等方法进行研究,根据回收比值确定样品的检查方法。结果 参松养心胶囊的需氧菌总数计数采用1∶100稀释中和法、霉菌和酵母菌总数计数采用平皿倾注法(1∶10)时,各试验菌回收比值均在0.5~2范围内;控制菌检查大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌采用常规培养基体积,沙门菌采用培养基稀释法。结论 本研究确定的方法准确可行,可有效控制微生物限度,同时为药品检验机构对该品种的监督检验提供参考。