假性蛋白激酶3及微小RNA-1827在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨假性蛋白激酶3(Trib3)、微小RNA-1827(miR-1827)在结直肠息肉和结直肠癌中的表达及意义。方法选取97例结直肠癌患者癌组织作为结直肠癌组,选取同期86例结直肠息肉患者息肉组织作为息肉组,选取同期行结直肠镜检查的92例健康体检者正常结直肠黏膜组织作为对照组。采用免疫组织化学法检测不同组织中Trib3表达水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测不同组织中miR-1827表达水平;分析Trib3、miR-1827表达水平与结直肠息肉和结直肠癌临床病理特征的关系;分析结直肠息肉组织及结直肠癌组织中Trib3与miR-1827的相关性;采用多因素COX回归分析探讨影响结直肠息肉和结直肠癌患者预后的因素。结果结直肠癌组Trib3高表达比率高于息肉组和对照组,miR-1827水平低于息肉组和对照组;息肉组Trib3高表达比率高于对照组,miR-1827水平低于对照组;上述组间差异均有统计学意义(P<0.01)。Trib3、miR-1827表达水平与结直肠息肉患者息肉直径、组织病理学分型、息肉数目有相关性(P<0.01)。Trib3、miR-1827表达水平与结直肠癌患者肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移、分化程度有相关性(P<0.05)。Trib3、miR-1827在结直肠息肉组织及结直肠癌组织中均呈负相关(r=-0.349、-0.397,P<0.05)。Trib3是结直肠息肉患者治疗无效的独立危险因素(P<0.05),miR-1827是结直肠息肉患者治疗无效的保护因素(P<0.05)。Trib3、临床分期是结直肠癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05),miR-1827是结直肠癌患者死亡的保护因素(P<0.05)。结论Trib3、miR-1827表达水平在结直肠黏膜组织癌变进程中分别上调和下调,检测二者表达变化可监测结直肠息肉恶变过程,进而早期预防结直肠癌病变。

TRIB3基因和TLR4蛋白在糖尿病血管病变中的表达及桃仁干预作用

目的:观察糖尿病大血管纤维化大鼠模型中假性蛋白激酶3(TRIB3)及Toll样受体4(TLR4)的表达情况。方法:雄性SD大鼠200只,随机选30只为对照组;余170只予高脂高糖饲料喂养,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)、高脂高糖饲料持续喂养,进行糖尿病血管纤维化造模,造模成功后选取30只为模型组,30只为桃仁干预组。前者予生理盐水10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,后者予桃仁颗粒剂水溶液10 mL·kg^(-1)·d^(-1)灌胃连续7周。7周后三组分别取材,保存标本。免疫组化法检测TLR4沉积部位,Western blotting检测TLR4表达情况,实时荧光定量PCR技术检测TRIB3基因的表达情况。结果:免疫组化检测分析,对照组及桃仁干预组大鼠血管内皮细胞及中膜平滑肌细胞中有散在黄色物质,呈弱阳性改变;模型组可见大量棕黄色物质表达呈强阳性改变。TLR4的Western blotting检测,桃仁干预组表达(0.5513±0.0432)较对照组(0.4021±0.0449)高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组(1.8342±0.0342)比较,表达明显减低,差异具有统计学意义(P<0.01);模型组与对照组比较,TLR4表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR技术检测TRIB3基因在桃仁干预组(1.3638±0.0948)较模型组(2.3241±0.0654)表达低,差异具有统计学意义(P<0.01);桃仁干预组较对照组(1.0000±0.0000)表达高,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组较对照组表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:糖尿病大血管纤维化大鼠股动脉中TRIB3基因和TLR4蛋白出现高表达,中药桃仁可以降低其表达。

假性蛋白激酶3在结肠息肉癌变过程中的表达意义

目的研究假性蛋白激酶3(TRIB3)在结肠息肉癌变过程中的表达情况及其临床意义。方法选取海南省人民医院2017年1月至2019年1月经手术切除的85例结肠息肉标本(息肉组)、87例结肠癌组织标本(结肠癌组),以同期102份正常结肠组织作为对照(正常组),采用免疫组织化学法测定三组中TRIB3的表达水平,分析TRIB3在结肠息肉癌变过程中表达水平及其与临床病理参数的关系。结果TRIB3在正常组、息肉组、结肠癌组表达阳性率依次升高,分别为15.69%(16/102)、60.00%(51/85)、95.74%(90/94),三组间比较差异有统计学意义(χ~2=128.010,P<0.001)。TRIB3在结肠息肉组织中的表达水平与病理分型有关(χ~2=12.650,P=0.013),在结肠癌组织中的表达水平与临床分期、淋巴转移、远处转移、分化程度有关(均P<0.05)。结论TRIB3在结肠息肉癌变进程中表达逐渐上调,其与结肠癌的临床分期、转移情况、分化程度有关,有望成为监测结肠息肉癌变的临床指标。

TRIB3与AKT在大鼠睾丸细胞中的相互关联

目的研究假性激酶蛋白3(Tribbles homology protein3,TRIB3)与蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)在大鼠睾丸细胞中是否存在相互作用关系。方法普通PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定。利用大鼠睾丸组织培养细胞通过RT-qPCR对Trib3的表达进行检测验证,对照组为野生型大鼠睾丸细胞,实验组为Trib3基因敲除大鼠睾丸细胞,运用Western blot和RT-qPCR检测两组共培养细胞中AKT蛋白和Akt mRNA的表达。利用两步酶消法消化野生型大鼠睾丸细胞,提取总蛋白,运用免疫共沉淀来验证TRIB3与AKT的蛋白互作关系。结果实验所用大鼠为Trib3基因敲除鼠,Trib3 mRNA在实验组无表达(P<0.05),实验组较对照组AKT蛋白(P<0.05)和Akt mRNA表达升高(P<0.01)。TRIB3抗体免疫沉淀的蛋白复合物中检测到AKT,同时AKT抗体免疫沉淀的蛋白复合物中也检测到TRIB3。结论TRIB3和AKT在大鼠睾丸细胞中存在相互作用。