假木豆属种质资源植物学性状遗传多样性分析

假木豆(Dendrolobium triangulare)为多年生灌木,假木豆叶量大、产量高,营养价值高,是优良的高蛋白青饲料。目前仅有山蚂蝗亚族之间的遗传多样性研究,假木豆属的形态学遗传多样性的分析研究比较匮乏,缺少大范围的种质形态学遗传多样性研究。对优质育种资源植物学性状综合评价是育种的前提。为了培育优质豆科牧草品种,满足南方畜牧生产需求,本研究采用随机区组设计,研究材料为76份假木豆属种质资源,对35个植物学性状进行观测,分析假木豆属的遗传多样性特点,为假木豆选育工作提供基础材料。通过形态学观测分析研究其遗传多样性,结果表明:35个植物学性状中叶背面毛况(CV=46.92%),茎的颜色(CV=39.77%)和叶柄毛况(CV=39.52%)变异系数(CV)最大,说明假木豆属遗传多样性较为丰富;多个植物学性状之间存在相关性,叶长与叶宽(r=0.887)之间存在极显著正相关,长宽比在2.0左右,叶形比较接近椭圆形。茎的形状与叶长(r=–0.459)、叶宽(r=–0.491)存在相关性,这表明如果假木豆产量以叶面积为主,应尽量选择圆柱形的茎。中央小叶叶形与荚果长(r=0.360)存在极显著相关,所以选育时选择倒卵圆形的叶,可以提高种子产量。叶背面毛况与叶柄毛况(r=0.462)、荚果毛况(r=0.589)存在极显著相关,说明同一植株毛被状况具有较高的关联性,可进行筛选整株毛被较少的资源。通过聚类分析与系统评价筛选出4份高产优质资源(070314022假木豆、GX121121004假木豆、050218087假木豆、050307492假木豆)。本研究探究了假木豆属种间的植物学性状遗传多样性的特点,可为后续的育种工作提供基础材料。

假木豆脂溶性成分研究

对假木豆(Dendrolobium triangulare(Retz.)Schindl)的化学成分进行研究,从乙醇提取物乙酸乙酯部位分离得到六个化合物,经理化常数和波谱分析,鉴定为正三十三烷醇(1),正二十八烷酸(2),正三十二烷醇(3)正三十四烷酸(4),正三十二烷(5),正二十九烷(6).化合物1-6均是首次从该属植物中分离得到.

假木豆对CCl_(4)致大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨假木豆对CCl4致大鼠肝损伤的保护作用和机制。方法:30只大鼠随机分为模型组、联苯双酯组和假木豆组,每组10只,采用CCl4制备肝损伤大鼠模型,另选取10只大鼠作为空白对照组。空白对照组和模型组大鼠予生理盐水灌胃,10 mL/kg;联苯双酯组大鼠予复方联苯双酯片溶液灌胃,100 mg/kg;假木豆组大鼠予假木豆水提物灌胃,100 mg/kg;1次/周,连续6周。末次给药后禁水12 h、禁食24 h,称量大鼠体质量,经腹主动脉取血分离血清,颈椎脱臼法处死,取肝组织称质量计算肝脏指数,HE染色观察肝组织病理变化,检测血清肝功能指标(TBIL、ALT、AST)变化,ELSIA法检测炎症因子水平(TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10)变化,肝组织匀浆检测氧化损伤指标(MDA、SOD、GSH)变化,RT-PCR检测肝纤维化因子基因(HA mRNA、α-SMA mRNA、TGF-β1 mRNA)水平变化。结果:模型组大鼠肝细胞排列紊乱,可见广泛的肝细胞脂肪变性及水肿、纤维组织增生等,胞质界限模糊,伴有炎症细胞浸润。与空白对照组比较,模型组大鼠血清TBIL、ALT、AST、MDA、IL-1、IL-6、TNF-α水平,肝脏指数均明显升高,血清SOD、GSH、IL-10水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,联苯双酯组和假木豆组大鼠血清TBIL、ALT、AST、MDA、IL-1、IL-6、TNF-α水平,肝脏指数均明显降低,血清SOD、GSH、IL-10水平明显升高(P<0.05);假木豆组大鼠血清TBIL、ALT、AST、MDA、SOD、GSH、IL-1、IL-6、TNF-α、IL-10水平,肝脏指数与联苯双酯组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠HA mRNA、α-SMA mRNA、TGF-β1 mRNA相对表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,联苯双酯组和假木豆组大鼠HA mRNA、α-SMA mRNA、TGF-β1mRNA相对表达量明显降低(P<0.05);假木豆组大鼠HA mRNA、α-SMA mRNA、TGF-β1 mRNA相对表达量与联苯双酯组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:假木豆能够有效改善CCl4致大鼠肝损伤,对肝功能具有良好的保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激、抑制炎症反应、阻断肝纤维化有关。

假木豆提取物对四氯化碳致大鼠肝纤维化的保护作用

目的探讨假木豆提取物抗四氯化碳(CCl_(4))所致大鼠肝纤维化的作用机制。方法将60只Sprague Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、水飞蓟素组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组和高剂量假木豆组,每组10只。水飞蓟素组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组、高剂量假木豆组和模型组大鼠通过背部皮下注射CCl_(4)建立肝纤维化模型,空白组大鼠背部皮下注射花生油,每隔2 d注射1次,共8周。从第3周起,水飞蓟素组大鼠每日灌服水飞蓟素胶囊水溶液(50 mg·kg^(-1))1次;假木豆低、中、高剂量组大鼠每日灌服12.5、25.0、50.0 g·L^(-1)的假木豆水提液(20 mL·kg^(-1));空白组和模型组大鼠灌服等体积的蒸馏水;各组大鼠均连续给药6周。观察并记录各组大鼠饮食活动情况、体质量、毛色光亮程度、精神状况等一般情况。末次给药1 h后采集各组大鼠腹主动脉血5 mL,采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平。采血后处死大鼠,取肝脏,观察肝脏大体形态,然后取大鼠肝脏左叶,制备肝组织切片,行苏木精-伊红染色,于光学显微镜下观察大鼠肝脏病理形态学变化。结果空白组大鼠饮食正常,活动频繁,毛色洁白有光泽,精神状况正常。模型组大鼠饮食减少,活动量明显减少,毛色暗淡、不清洁,精神状况萎靡;水飞蓟素组大鼠毛色欠缺光泽但较清洁,其余一般情况同空白组;假木豆各剂量组大鼠一般情况较模型组有改善,而较空白组差。模型组、水飞蓟素组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组、高剂量假木豆组大鼠体质量增长量少于空白组(P<0.05),低剂量假木豆组大鼠体质量增长少于模型组(P<0.05)。模型组、水飞蓟素组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组、高剂量假木豆组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于空白组(P<0.05);水飞蓟素组与空白组大鼠血清中TGF-β_(1)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组、高剂量假木豆组大鼠血清中TGF-β_(1)水平均高于空白组(P<0.05)。水飞蓟素组、低剂量假木豆组、中剂量假木豆组、高剂量假木豆组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β_(1)水平均低于模型组(P<0.05)。低剂量假木豆组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β_(1)水平显著高于水飞蓟素组(P<0.05)。中剂量假木豆组与水飞蓟素组大鼠血清中IL-1β、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05),中剂量假木豆组大鼠血清中TNF-α、TGF-β_(1)水平显著高于水飞蓟素组(P<0.05);高剂量假木豆组与水飞蓟素组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β_(1)水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。低、中、高剂量假木豆组大鼠血清中IL-1β水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。高剂量假木豆组大鼠血清中IL-6、TGF-β_(1)水平显著低于低剂量假木豆组(P<0.05);中剂量假木豆组与低剂量假木豆组、高剂量假木豆组与中剂量假木豆组大鼠血清中IL-6、TGF-β_(1)水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。低、中、高剂量假木豆组大鼠血清中TNF-α水平随剂量的增加逐渐降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。空白组大鼠肝组织结构完整,肝小叶结构正常;模型组大鼠肝组织肝纤维化明显;低剂量假木豆组大鼠肝组织病理学形态较模型组有轻微改善;水飞蓟素组和中、高剂量假木豆组大鼠肝组织病理学形态较模型组有较大的改善,肝纤维形成减轻或消失。结论假木豆提取物对大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能与降低血清中IL-1β、IL-6、TNF-α及TGF-β_(1)水平有关。

壮药假木豆的显微鉴别

目的:对假木豆药材进行显微鉴别。方法:显微鉴别。结果:详细描述了假木豆的显微鉴别特征。结论:所做研究为其质量标准的制定及进一步研究提供参考依据。

假木豆中一新偶氮化合物

为了研究假木豆的化学成分,采用硅胶、大孔树脂柱色谱和重结晶的方法对乙醇提取物进行分离纯化,通过理化性质和波谱技术鉴定化合物结构。分离鉴定了13个化合物,分别是偶氮-2,2′-双[Z-(2,3-二羟基-4-甲基-5-甲氧基)苯基乙烯](1)、β-谷甾醇(2)、N-(2′-羟基-二十四酰基)-2-氨基-1,3,4-三羟基-十八-8E-烯(3)、羽扇豆醇(4)、环桉烯醇(5)、胡萝卜苷(6)、白桦脂酸(7)、白桦脂醇(8)、二十六烷酸甘油酯(9)、26-羟基-二十六烷酸甘油酯(10)、脱镁叶绿素甲酯(11)、金合欢素-7-O-α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-葡萄糖苷(12)和刺槐苷(13),其中化合物1为新化合物。所有化合物均是首次从该属植物中分离得到。经活性筛选研究发现,与维生素E(VE)相比较,在2μg·mL-1浓度下,化合物1具有较好的谷氨酸诱导PC12细胞的损伤保护活性。