15例疑似假肥大性肌营养不良患儿遗传学分析

目的分析进行性假肥大性肌营养不良(DMD)患儿的临床特点和基因变异情况,为临床诊断、治疗和遗传咨询提供参考。方法对2019年7月—2021年7月河南科技大学第一附属医院15例疑似假肥大性肌营养不良患儿的临床特征进行回顾性分析,并采用多重连接探针扩增技术(MLPA)和全外显子组测序(WES)分析患儿的基因变异特点。对变异位点进行生物信息学分析。结果15例患儿中,有14例存在DMD基因变异,其中12例为外显子区域大片段缺失,2例为点突变[c.2168+1G>T和c.9917_9923del(p.Thr3306Serfs*22)]。检测到的DMD基因大片段缺失共涉及11个不同的区域,其中8个可引起抗肌萎缩蛋白可读框移码,2个可引起阅读框内整码缺失,1个缺失变异覆盖整个DMD基因。14例DMD基因变异患儿均有酶学异常增高、肌源性损伤等特征,被确诊为DMD。1例未检测到DMD基因变异的患儿存在LAMA2基因复合杂合变异[c.819+1G>A和c.1884G>A(p.Glu628Glu)],被诊断为肢带型肌营养不良(LGMD)。结论临床需注意DMD、贝克肌营养不良(BMD)和LGMD的鉴别诊断,对合并肌酸激酶(CK)等酶学改变和肌源性损伤的进行性肌营养不良患儿,建议优先考虑采用MLPA检测DMD基因外显子拷贝数;对于MLPA检测结果阴性的患儿,采用高通量测序进一步分析其遗传学病因。

糖皮质激素在进行性假肥大性肌营养不良中应用循证指南计划书

为了提高我国医师在治疗儿童进行性假肥大性肌营养不良中糖皮质激素使用的认识及规范化水平,国家区域医疗中心(西南)四川大学华西第二医院和四川省儿童医院发起并制订《糖皮质激素在进行性假肥大性肌营养不良中应用循证指南》。指南制订工作组将根据循证指南的制订原则和步骤开展指南制订工作,组建包括神经肌肉疾病、循证等领域的多学科专家团队。该计划书主要阐明了指南制订的目的、意义以及指南制订的完整流程。

多重连接探针扩增方法在假肥大性肌营养不良产前基因诊断中的应用

假肥大性肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种由于DMD基因突变导致的X连锁隐性致死性遗传病。目前没有有效的治疗方法。为建立一种既可以对携带者进行检测又可以进行产前基因诊断的方法,文章联合应用多重连接探针扩增技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)和短串联重复序列(Short tandem repeats,STR)为遗传标记连锁分析的方法对26例有高风险再生育患儿的假肥大性肌营养不良家系的孕妇通过羊水穿刺进行产前基因诊断。26例进行产前基因诊断的羊水标本中有7例诊断为男性患儿,4例诊断为女性携带者。MLPA可以作为筛查DMD基因缺失和重复突变的首选方法。联合应用MLPA和STR连锁分析,可以提高假肥大性肌营养不良的产前基因诊断率。

MLPA和多重PCR法检测假肥大性肌营养不良患者DMD基因突变

目的应用多重连接依赖式探针扩增(MLPA)法和多重PCR法对临床诊断为假肥大性肌营养不良患者进行基因诊断,并比较两种方法检测DMD基因缺失和重复改变的效果。方法选择2005年至2007年在中国医科大学盛京医院儿科就诊的51例DMD患者和8例BMD患者。采用MLPA法对经多重PCR法检测过的患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对先证者的母亲进行基因的缺失/重复突变检测。结果用多重PCR方法在59例假肥大性肌营养不良症患者中检测到31例患者有外显子缺失。MLPA检测出33例外显子缺失,6例外显子重复和1例点突变,同时检测出26例患儿的母亲为携带者。MLPA比多重PCR多检测出10例DMD基因突变,两种方法共同检测出的30例突变中MLPA检测出16例基因突变范围比多重PCR大。结论与多重PCR法相比,MLPA更加简便、快捷、可靠,同时可以对携带者进行诊断,是一种高效的遗传病基因诊断手段。

汉族儿童N-乙酰化代谢表型分布及其与21-三体综合征和假肥大性肌营养不良症相关性研究(英文)

目的 以咖啡因为代谢探针，研究汉族儿童Ｎ－乙酰化代谢表型分布规律及其与２１－三体综合征（ＤＳ）和假肥大性肌营养不良症（ＤＭＤ）相关性。方法 根据参试者尿中咖啡因代谢物５－乙酰氨基－６－甲酰氨基－３－甲基尿嘧啶（ＡＦＭＵ）和甲磺嘌呤（１Ｘ）峰高比的对数值（１ｇＡＦＭＵ／１Ｘ）绘制频率分布直方图，寻找区分快、慢乙酰化代谢表型的截点，确定患儿和健康儿童的Ｎ－乙酰化代谢表型分布。结果 正常儿童乙酰化代谢表型分布直方图呈双态性，截点明显，为 ０．２５（ｌｇＡＦＭＵ／１Ｘ），慢乙酰化代谢表型个体为１６．９％，而 ＤＳ和ＤＭＤ患儿则分别为４１．９％和５０％（ｘ２分别为８．２８７和１１．３８７，Ｐ＜０．０５）。男、女和＞６岁与≤６岁儿童快、慢乙酰化代谢表型分布差异无显著性。结论 汉族儿童乙酰化代谢表型分布呈多态性，与成人相似。年龄和性别对结果无显著影响。

进行性假肥大性肌营养不良患者康复现状调查

目的 调查进行性假肥大性肌营养不良(DMD)患者康复情况与需求。方法 对2018年10月至2022年3月就诊于安徽医科大学武警总医院DMD门诊患者进行基本信息和康复情况问卷调查。结果 共发放问卷963份,回收有效问卷944份(98.0%)。患者均为男性,年龄5~27岁,平均(9.24±0.184)岁;710例可独立行走;140例定期到专业机构进行康复训练,618例规律进行有氧运动,416例规律进行关节拉伸训练,292例规律使用辅助器具。538例对康复效果不满意,658例存在康复知识获取困难。Logistic回归显示,规律进行康复锻炼的患者丧失独立行走能力的风险下降(OR<0.61,P<0.05)。结论 DMD患者有较为广泛的康复需求,但有氧运动锻炼率、关节拉伸训练率和辅助器具使用率较低,可能影响患者运动功能和生活质量。

假肥大性肌营养不良症运动功能评定新进展

假肥大性肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy,DMD）是临床常见的X-连锁隐性遗传病,在活产男婴中发病率约为1/3500,其主要表现为全身骨骼肌进行性对称性无力,近端重于远端,伴小腿腓肠肌假性肥大,步态和姿势异常;典型表现为鸭步和站起时需双手撑膝即Gowers征阳性;随着病情的加重可逐渐累及呼吸肌和心肌,最终导致死亡.目前,DMD尚无法治愈,但有研究证实,康复治疗可预防和减少DMD并发症,并提高患儿的生活质量.

假性肥大性肌营养不良症患儿的肌酶学、肌电图及病理组织学分析

目的探讨假性肥大性肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)患儿的肌酶学、肌电图及病理学特点及其对DMD的诊断价值。方法回顾性分析18例DMD患儿的临床和肌酶学、肌电图及小腿腓肠肌活检HE染色病理组织学资料。结果18例DMD患儿血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)均明显升高,在3-6岁升高明显;肌电图至少4块或4块以上肌呈电静息和(或)时限缩窄明显<20%,波幅低,部分肌可见短棘波多相电位。重收缩多呈病理干扰相,偶见呈干扰相,肌无力明显的呈电静息和混合相。静止自发电位检出率16.4%,符合肌源性损害肌电图改变。感觉、运动神经传导无特异改变;小腿腓肠肌活检见肌纤维萎缩、变性、坏死,被大量脂肪组织填充,符合假肥大性肌营养不良改变。结论DMD诊断应依据临床特点、肌酶学、肌电图及肌肉活检结果综合分析。

应用荧光原位杂交技术诊断基因缺失型进行性假肥大性肌营养不良携带者

目的 建立应用荧光原位杂交 (fluorescent in situ hybridization,FISH)方法检查进行性假肥大性肌营养不良 (Duchenne/ Becker muscular dystrophy,DMD/ BMD)患者家系中女性亲属是否为携带者的方法。方法 采用多重聚合酶链反应对 19例 DMD/ BMD先证者进行基因诊断 ,从中筛选出两例缺失dystrophin基因外显子 4 6的患者 ,其中 1例有阳性家族史 ,另 1例为散发病例 ,采用双色 FISH对其女性亲属进行携带者的检查。结果 在有阳性家族史的 1例患者的家系中检出 4例携带者 ;在另一散发病例的家系中检出 1例所缺失基因片段的体细胞嵌合体。结论 与多重 PCR相结合 ,应用双色 FISH检出基因缺失型 DMD/ BMD携带者是一个切实可行的诊断方法 ,对于所缺失基因片段的体细胞嵌合体的诊断是FISH方法的一个突出的优点 ,这对 DMD/ BMD家系的遗传咨询以及产前诊断指征的确立具有重要意义。

23例假肥大型肌营养不良家系的女性携带者生育情况的调查与分析

对23个假肥大型肌营养不良患者家系中132女性携带者生育情况进行调查,分析遗传风险度、对疾病的理解、家族史、个人史、受教育水平及对选择性流产的观点等几个因素与生育的关系。

异基因造血干细胞对假肥大性肌营养不良患者DMD基因修复的实验研究

目的假肥大性肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种X-连锁隐性遗传病,是由dystrophin基因突变引起的,目前没有有效的治疗方法,希望异基因造血干细胞移植治疗能够修复dystrophin基因。方法收集9例DMD造血干细胞移植病例,从外周血白细胞中抽提移植前后基因组DNA,应用多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对9例DMD患者进行造血干细胞移植前后DMD基因检测,用短串联重复序列(Short tandem repeats,STR)技术对MLPA检测结果进行验证。结果 MLPA试剂盒P034-A2/P035-A2检测9例患者造血干细胞移植前外周血标本均存在外显子缺失,移植后缺失的外显子修复,其中2例患者造血干细胞移植前肌肉标本均存在外显子缺失,移植后缺失的外显子部分修复。结论 MLPA技术更加简便、快捷、可靠对DMD/BMD患者造血干细胞移植移植前后DMD基因进行分析,为遗传病造血干细胞移植后是否植入提供另一可靠依据,异基因造血干细胞移植能修复DMD缺失的基因。

囊虫性假肥大性肌病11例

囊虫性假肥大性肌病主要见于囊虫病流行区,1926年Priest最早报道本病。据称本病主要见于亚洲。作者经验本病11例,其中8例经肌肉活组织检查证实。现将11例的临床资料和8例肌肉活组织检查资料报道如下。

儿童肌酸激酶异常升高与疾病相关性分析

临床诊断为肌营养不良和运动障碍患儿的肌酸激酶水平进行统计分析,以加强对儿童肌酸激酶指标异常的认识。方法:患儿经临床医生接诊后初步怀疑为肌源性改变或进行性加重运动障碍的患儿进行肌酸激酶生化指标检测,并连续三次复查后观察其水平是否恢复正常。并对肌酸激酶升高水平与临床表型相关性进行分析。电话随访其最后临床诊断与初诊的相符合度。结果:临床诊断为运动障碍的患儿117例,12例患儿肌酸激酶水平高于1000 IU/L,只有两名女童肌酸激酶水平分别达到了2389 IU/L和3094 IU/L,其余均为男童。临床诊断为肌营养不良症的患儿128例,肌酸激酶升高水平明显高于运动障碍组,97名患儿肌酸激酶水平高于1000 IU/L,含有4名女童,肌酸激酶水平高于10000 IU/L患儿有71名,含有一名女童(肌酸激酶10483 IU/L),该名女童的临床表型符合DMD表型。运动障碍组肌酸激酶水平大部分在正常水平(78.63%)。结论:临床检验中常用的生化指标肌酸激酶在儿童运动障碍和肌肉病变中具有指示意义,可以初步区分两者病因来源,为临床医师在该类疾病的初步分诊中提供了重要的参考依据。

应用多重连接依赖探针扩增技术对假肥大型肌营养不良患者及致病基因携带者进行基因诊断

目的探讨多重连接依赖探针扩增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术对假肥大型肌营养不良(DMD)患者及携带者基因检测的临床应用价值,为进一步创建可靠的DMD产前诊断技术平台奠定基础。方法选择2010年至2011年在解放军四六三医院就诊的45例DMD患者和5例BMD患者,运用MLPA技术对患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对20例有基因缺失先症者的姐妹或母亲进行DMD基因缺失携带者筛查。结果50例患者中30例患者有外显子缺失,3例有外显子重复,其中20例外显子缺失的患者中10例其姐妹或母亲为缺失携带者。结论 MLPA是一种快速、准确、简便检测缺失及重复突变的方法,同时可以对携带者进行诊断,是一种高效的遗传病基因诊断手段。

CD133^＋干细胞移植——肌营养不良治疗的重在突破

进行性假肥大性肌营养不良（DMD）是进行性肌营养不良病的一种最常见类型，主要影响男性X性连锁隐性遗传性肌肉疾病，以缓慢进行性加重的对称性肌无力和肌萎缩为主要特征。大多数病例有明确的家族史。其主要的病理改变是慢性骨骼肌细胞变性、坏死，出现肌细胞萎缩与代偿性增大相嵌分布的典型表现。

DMD/BMD患者的dystrophin基因表达研究

目的探讨杜氏进行性肌营养不良(DMD)/贝氏进行性肌营养不良(BMD)患者的dystrophin基因突变与蛋白质表达之间的关系。方法用多重连接探针扩增(MLPA)法检测14例DMD/BMD患者dystrophin基因突变,肌肉活检观察组织的形态结构特点,免疫组织化学染色检测患者腓肠肌组织中dystrophin蛋白的表达情况。结果 14例DMD/BMD患者中有3例检出dystrophin基因缺失,其余未检出基因突变。肌肉活检结果显示,14例患者均可见肌纤维大小不一,圆形化,肌纤维明显变性、坏死,不同程度再生;部分肌纤维间可见少量炎性细胞浸润,结缔组织增生。免疫组织化学染色显示,3例未表达dystrophin基因突变患者的肌纤维膜dystrophin蛋白不同程度表达减弱,其余11例患者可见肌纤维膜dystrophin蛋白质表达完全缺失。结论 MLPA联合肌肉活检及免疫组化染色可以鉴别诊断DMD/BMD,为患者的诊治和预后提供了依据。

MLPA技术用于产前DMD基因诊断的应用探讨

假肥大性肌营养不良症是一种严重的神经肌肉疾病，分为杜氏肌营养不良症（DMD）和贝氏进行性肌营养不良症（BMD），均是由于DMD基因（Xp21．2）突变所致。由于本病目前无有效的治疗方法，产前诊断成为控制致病基因传递、防止患儿出生及降低发病率的主要措施。本研究对DMD产前诊断家系中具有高患病风险的2个胎儿，提取其羊水基因组DNA，采用多重连接探针扩增技术（MLPA）进行产前基因诊断的探索。