假鼻疽伯克霍尔德菌感染1例

类鼻疽病是一种人畜共患传染病,由假鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)感染引起,一般多见于热带和亚热带地区,在我国以海南省和广东省较为多见[1-2],其他地区偶见散发病例。类鼻疽可引起软组织感染、肝肺脓肿、脓毒血症、败血症等,也可见肌肉组织与骨骼感染并发症等[3];该病发病率低,但病死率高达30%[4]。由于其临床表现不典型,容易漏诊和误诊,我院收治1例由BP引起的手坏死性筋膜炎,明确病原学诊断后,对其不典型性表现报告如下。

糖尿病足合并类鼻疽伯克霍尔德菌感染64例临床特征、药敏特点和治疗分析

目的 总结糖尿病足(DF)合并类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)感染的临床特征、药敏特点和治疗方法。方法 回顾分析2012年1月至2022年3月海南医学院第二附属医院收治的64例DF合并BP感染病人的临床表现、微生物抗菌药物敏感性及治疗手段。结果 64例DF合并BP感染病人中,60例有发热症状、34例有白细胞升高、均有C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)升高、14例合并肝或脾脓肿、30例出现肝功能不全、20例出现肾功能不全、18例合并感染性休克。64株BP对大多数常见的抗生素敏感性较差,但均对亚胺培南、美罗培南和复方磺胺甲唑敏感。所有病人均使用胰岛素积极控制血糖,大多数静脉应用碳青霉素烯类抗菌素约6周,出院后继续使用复方磺胺甲唑治疗。最终22例治愈,30例好转,8例未愈,4例死亡。死亡病例均合并多器官功能障碍。结论 DF合并BP主要表现为发热、CRP和PCT明显升高、合并肝或脾脓肿和肝肾功能不全,易出现感染性休克。对高度怀疑BP感染病人应多次进行培养,并及早静脉应用碳青霉素烯类抗菌素可能有助于改善预后。

类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统的Hcp1蛋白转位介导多核巨细胞形成

目的探讨类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulatory protein 1,Hcp1)在感染宿主细胞引起多核巨细胞(multinucleated giant cells,MNGC)形成的作用及机制。方法分别采用同源重组和质粒回补技术构建类鼻疽菌hcp1基因缺失株(BPC006Δhcp1)和缺失回补株(BPC006Δhcp1::hcp1);分别用类鼻疽菌BPC006野生株、BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1感染RAW264.7细胞,通过激光共聚焦分析Hcp1蛋白的定位情况;在293T细胞中转染Hcp1真核表达载体后进行细胞质膜分离进一步验证定位情况;在细胞感染模型上,通过吉姆萨染色检测抗Hcp1多克隆抗体封闭对MNGC形成的影响,探究Hcp1在类鼻疽菌感染导致的MNGC形成中的作用和生物学意义。结果Western blot检测结果显示BPC006Δhcp1不表达Hcp1蛋白,而BPC006Δhcp1::hcp1能恢复Hcp1蛋白的表达,成功构建类鼻疽菌BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1。细胞免疫荧光共定位实验和质膜分离实验都表明Hcp1可以定位在宿主细胞膜上,且相较于对照组抗Hcp1多克隆抗体能抑制类鼻疽菌感染所诱导的MNGC形成(P<0.01)。结论类鼻疽菌感染RAW264.7细胞时Hcp1可转位至细胞膜,并在MNGC形成中发挥重要作用。

海南省类鼻疽伯克霍尔德菌临床分离株的基因岛特征和毒力因子分析

目的分析类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)临床分离株的基因岛(genomic island,GI)特征和毒力因子差异,为类鼻疽病的诊疗研究提供依据。方法收集B.pseudomallei临床分离株,PCR检测和测序分析毒力相关GI,在Islandviewr 4平台上提交全基因组序列注释格式文件,整合SIGI-HMM与IslandPath-DIMOB两种算法预测GI,通过序列比对分析GI独特性和毒力因子差异。结果共收集到52株B.pseudomallei临床分离株,结果显示,52个基因组按进化距离分为3个分枝,其中82.69%(43/52)菌株集中在分枝1。52个B.pseudomallei基因组共识别出828个GI,按序列相似性聚类为157个GI cluster。GI在基因组中占比达2.05%~6.38%。GI cluster1和2存在全部菌株中,但84个(53.50%)GI cluster只聚类到单个基因组。10个GI cluster很可能是特有的,其中5个来源同属细菌,2个来源其他属,3个来源不确定。25个GI cluster与毒力相关,B.pseudomallei BP76和BP169含有其中8个,是所有菌株中毒力相关GI最多的。52株B.pseudomallei的毒力基因除了fhaB1、fhaB2、BPSL1661、cheY1、wzM、tssH-5/clpV、tssA-5、boaA和boaB存在差异,其余都表现一致。与泰国和澳大利亚B.pseudomallei临床菌株比较,boaA、boaB、cheY1和chbp在两个国家的菌株中都表现出差异,同时fhaB1、fhaB3和bimA在澳大利亚菌株中表现出差异。结论海南地区B.pseudomallei GI具有保守性和独特性,通过特有GI和毒力因子研究,可以发现菌株水平基因转移(Horizontal gene transfer,HGT)的来源和分子水平的毒力差异。

1株类鼻疽伯克霍尔德菌噬菌体的生物学特性和杀菌能力评估

为探究类鼻疽伯克霍尔德菌噬菌体的生物学特性,本试验采用双层平板法分离筛选类鼻疽伯克霍尔德菌噬菌体;采用形态学、一步生长曲线、宿主范围测定分析该噬菌体的生物学特性;通过小鼠体内杀菌试验和体外消毒能力检测评估该噬菌体的疗效。结果显示,成功分离出1株类鼻疽伯克霍尔德菌噬菌体,命名为HNS1。形态学观察显示,噬菌体头部为正二十面体,直径为(62.8±3.0)nm,尾部长为(54.9±5.0)nm,根据命名法则该噬菌体属于肌尾噬菌体。一步生长曲线测定结果显示,该噬菌体的潜伏期约为32 min,释放量约为8.04 PFU/infection center。宿主范围测定结果显示,该噬菌体的裂解率达到73.3%(11/15)。小鼠体内杀菌试验和体外消毒能力检测结果显示,该噬菌体能够有效在小鼠体内和环境中裂解类鼻疽伯克霍尔德菌。结果表明,筛选得到的噬菌体具有较广的裂解谱,可能成为治疗类鼻疽伯克霍尔德菌感染的潜在抗菌剂。

类鼻疽伯克霍尔德菌致病及耐药机制

类鼻疽伯克霍尔德菌是导致类鼻疽的病原菌。类鼻疽慢性感染时间长,急性起病时临床表现不典型、易发生危及生命的并发症、预后不佳。研究病原菌类鼻疽伯克霍尔德菌的致病及耐药机制将有效帮助疾病的诊疗,改善预后。本文从类鼻疽伯克霍尔德菌在宿主细胞外运动的形式、感染宿主细胞的方式、毒力因子、耐药机制(外排泵、靶位点改变等)等方面阐述。为该菌所致类鼻疽的早期诊治及控制提供可能的方向。

类鼻疽伯克霍尔德菌肺炎伴脓毒症、坏死性淋巴结炎1例并文献复习

类鼻疽病是一种需氧型革兰氏阴性杆菌类鼻疽伯克霍尔德菌引起的疾病,具有多种临床表现,其中以类鼻疽伯克霍尔德菌性脓毒症最为严重。本文介绍了广东医科大学附属东莞第一医院1例以反复发热、咳嗽、咳痰为主要临床表现的患者,该患者上述症状反复,常规抗生素治疗无效,通过超声引导下肺门淋巴结穿刺术等检查考虑类鼻疽伯克霍尔德菌肺炎伴脓毒症、坏死性淋巴结炎,予维护器官功能、亚胺培南等抗感染为主要治疗手段。患者无主诉不适出院,后期随访无再次发热等症状。结合治疗中的问题,本文回顾复习相关文献,对假鼻疽伯克霍尔德菌肺炎伴脓毒症、坏死性淋巴结炎患者诊治经验进行报道。类鼻疽病临床诊断非常具有挑战性,容易误诊或漏诊。临床上碰到诊断不明确的相关感染性疾病,要及时考虑到类鼻疽伯克霍尔德菌感染可能,明确临床工作者对类鼻疽病早期诊断和治疗的重要性,避免误诊、漏诊。

假鼻疽伯克霍尔德菌脓毒症死亡病例1例

类鼻疽病（melioidosis）是由假鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia psudomallei）所致的热带和亚热带地区的一种人兽共患病。因假鼻疽伯克霍尔德菌的高致病性、强抵抗力、易传播、易培养等特性，美国疾病预防控制中心将其列为B类生物恐怖剂；临床上有急性败血症型、亚急性、慢性及亚临床4种表型。急性患者可有高热、衰竭等全身症状；病菌进入血流，可形成菌血症及内脏脓肿，最后常因脓毒症死亡。慢性患者全身症状不定，可有皮肤及皮下溃疡，常类似空洞肺结核表现，其潜伏期可达数年。最近，我们从1例糖尿病肺部感染、腋窝软组织感染患者血液、骨髓等标本中分离出假鼻疽伯克霍尔德菌，现报告如下。

假鼻疽伯克霍尔德菌致化脓性腮腺炎1例

假鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)导致的类鼻疽病,是热带感染性疾病,病死率高达25.0%~50.0%[1 2]。该菌引起的感染有地域性,主要集中在热带地区,海南地区有流行分布报道[3]。类鼻疽病临床表现多样,可致急性和慢性感染,急性感染主要是败血症,慢性感染以化脓性感染为主,易出现误诊误治[4 5],给医生的诊治带来困难。本文从腮腺炎患者脓液分离出1株假鼻疽伯克霍尔德菌,文献报道少见,现将诊治经验报告如下。1病历资料1.1入院情况患者男性,56岁,农民。因左面部肿痛10 d,肿痛逐渐加重于2017年2月26日收治入院。经口腔额面外科医生会诊后,临床初步诊断为咬肌间隙感染,收入口腔额面外科。自诉时有脓液从左耳流出,张口受限,左侧腮腺咬肌区肿胀,周围皮肤发红,有凹陷性水肿,局部压痛,左侧腮腺有少量脓液流出,精神差。

假鼻疽伯克霍尔德菌败血症合并眶周脓肿1例

假鼻疽伯克霍尔德菌，又称类鼻疽伯克霍尔德菌，是一种非发酵革兰阴性杆菌，具有高致病性、强传染性、易于培养、对多种抗菌药物天然耐药等特点［1］，广泛分布于东南亚和澳大利亚等热带地区，我国主要分布于广东、广西、海南一带，其余地区鲜有报道［23］。主要的临床类型有：急性败血症型、亚急性、慢性和亚临床型4类［4］。急性败血症型，患者多有疫区居住史，好发于免疫力低下者，起病急，进展快，病情重，抗菌药物治疗效果差，病死率高［5］。

假鼻疽伯克霍尔德菌败血症1例

1材料患者,李某,男,46岁,以＂反复畏冷、发热伴双膝酸痛40d,全身皮疹4d＂为主诉于2010-06-17入院。于40d前出现畏冷、寒战、发热,体温最高达39℃,伴有双膝关节酸痛,退热后缓解。无头痛、咽痛、咳嗽、胸痛、腹痛、腹泻、尿频、关节红肿、皮疹等。

1例假鼻疽伯克霍尔德菌败血症合并糖尿病的治疗体会

假鼻疽伯克霍尔德菌败血症合并糖尿病,病情危重复杂,抗菌药物使用要根据药敏结果足量足疗程才能达到效果。

假鼻疽伯克霍尔德菌致深部组织脓肿形成三例

类鼻疽病是由伯克霍尔德菌属(Burkholderia)的假鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)感染引起的人畜共患传染病。其发病率低,约为1.9/10万人,但病死率达30%~35%[1]。该病主要集中在新加坡、马来西亚、泰国、越南和澳大利亚北部等热带地区,我国的海南省也偶有该病的报道[2]。该病主要表现为肺部感染、败血症、局部皮肤和皮下脓肿形成等,而深部器官脓肿形成的病例报道则少见[3]。由于其临床表现不典型,易被漏诊、误诊。本文对解放军总医院海南医院2014—2018年收治的3例BP感染合并深部组织脓肿形成患者的诊治经验报道如下.

1例假鼻疽伯克霍尔德菌致颅骨及脑膜感染患者的临床表现及诊疗经过分析

假鼻疽伯克霍尔德菌是一种革兰阴性需氧菌。由假鼻疽伯克霍尔德菌引起的颅骨及脑膜感染在临床上十分罕见。本文主要是对昆明医科大学第一附属医院收治的1例假鼻疽伯克霍尔德菌致颅骨及脑膜感染患者的临床表现及诊疗经过进行分析。

肺假鼻疽伯克霍尔德菌败血症1例

类鼻疽（melioidosis）足由假鼻疽们克霍尔德菌（Burkholderia pseudomallei）所致的地方性传染病，该病世界范同内主要流行于澳大利亚中部、东南亚等热带、亚热带地区，在美洲、欧洲等地也有病例报道^[1]。在我国，似鼻疽伯克霍尔德菌主要分布在海南、广西、广东和福建等地区^[2]，其他地方罕有报道。本研究对重庆发现的1例似鼻疽伯克霍尔德菌感染病例报告如下。

假鼻疽伯克霍尔德菌致双髋慢性化脓性关节炎1例并文献回顾

58岁的老年男性患者,因“反复双髋疼痛20 d”入院。于当地医院多次行“双髋切开引流术”后转诊某院,于该院行分泌物、关节液培养结果示假鼻疽伯克霍尔德菌,先后采取抗菌药物治疗、换药、置管冲洗引流术等保守治疗均失败,复查双髋X线片示双髋关节已严重破坏,行双侧髋关节切除旷置与二期全髋关节置换术,同时予以敏感抗菌药物治疗。术后随访2年,关节功能恢复,未见感染复发。因此,在临床慢性化脓性关节炎治疗中,首先需要积极行细菌培养鉴定,选用敏感抗菌药物,其次需要严格把握手术适应证,针对骨与关节感染,应及时彻底清创灌洗引流,关节严重破坏或功能丧失者可行一二期关节置换。

假鼻疽伯克霍尔德菌败血症合并嗜血细胞综合征1例

假鼻疽病是由假鼻疽伯克霍尔德菌引起的地方性传染病,在东南亚和澳洲等热带区域流行。我国疫源地主要分布在海南、广东、广西等南部地区。病情一般较为严重,病死率高达30%-90%[1]。其他地方罕有报道,本研究对南京地区发现的1例假鼻疽伯克霍尔德菌感染病例报告如下。1病例资料患者,男,39岁,长期住新加坡。因＂发热2个月＂入院。

海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌的药物敏感性分析

目的探讨海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)对常用抗生素的敏感性。方法以2008年1月—2013年3月在海南地区患者中分离的101株非重复类鼻疽伯克霍尔德菌作为研究对象,采用E-test法对目前国际上常用于治疗类鼻疽的抗生素进行药物敏感试验分析。结果本实验收集的101株类鼻疽菌中主要是以败血症为主,共有60人(59.4%),其次是肺部感染22人(21.8%),伤口及皮肤软组织感染有17人(16.8%),尿路感染2人(2.0%),受试者总死亡率为17.8%(18/101),其中72.2%(13/18)的死亡患者见于败血症患者。体外药敏试验结果显示,本次分离的所有类鼻疽对美罗培南、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢他啶和阿莫西林/克拉维酸均显示良好的敏感性,敏感率分别为100%、100%、94.4%、92.1%和90.1%。对四环素和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为85.1%和84.2%。结论本研究和其他地区的报道都证实了类鼻疽伯克霍尔德菌对目前国际上常用于治疗该疾病的抗生素呈现良好的敏感性,其中以亚胺培南和美罗培南的敏感性最好,可作为治疗的首选。

湛江地区类鼻疽伯克霍尔德菌特征与流行病学研究

目的研究类鼻疽伯克霍尔德菌与常见其他伯克霍尔德菌间病原学特点及对药物敏感性的差异,为临床诊断、检验和治疗提供参考。方法对类鼻疽伯克霍尔德菌感染病例进行流行病学研究,并将其与常见医院感染皮氏伯克霍尔德菌、洋葱伯克霍尔德菌对常用抗菌药物的药敏结果进行比较分析。结果类鼻疽伯克霍尔德菌具有两端浓染,银白色菌落形态特征。在湛江,此菌感染以遂溪、廉江、吴川为主要疫区,好发于秋季,接触疫水、农民、免疫功能低下、年龄≥50岁为易感因素。其对复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、哌拉西林及其酶抑制复合制剂、头孢他啶、亚胺培南敏感率达100%,对氨基糖苷类、喹诺酮类和非抗假单胞菌属类药敏感性较差或耐药。结论类鼻疽伯克霍尔德菌感染属热带或亚热带地区传染病,水患易导致该菌流行;细菌具有染色、菌落形态特征,对药物的敏感性具有伯克菌属共同特征,易产生耐药,建议联合用药治疗。

特异引物PCR鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌方法的建立和优化

目的以16S rRNA编码序列为靶基因,建立特异引物PCR鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌方法并优化。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌标准菌株K96243的16S rRNA编码序列为靶序列,通过Primer Premier 5软件搜索特异的引物,以该菌为模板,优化特异引物PCR的退火温度、退火时间和反应循环数等条件。得到最优PCR反应条件后,将该方法用于检测临床分离的类鼻疽伯克霍尔德菌菌株和常见细菌感染病原体(大肠杆菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、幽门螺旋杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型链球菌和乙型链球菌),评价该方法的有效性和特异性。结果共设计3对引物,分别扩增16S rRNA编码序列283～672、760～1 061、771～1 193片段,优化后PCR反应条件为:94℃预变性4 min,94℃变性40 s,54.5℃退火20 s,72℃延伸40 s,24个循环,最后延伸1 min;特异性分析发现此方法能将类鼻疽伯克霍尔德菌与其他常见感染病原菌进行有效地鉴别诊断。结论成功建立并优化一种快速鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的方法,通过此方法能有效的从单个菌落中和基因组水平鉴定临床分离的8株类鼻疽伯克霍尔德菌。