尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类成分的分离与鉴定

目的对尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类化学成分进行分离与鉴定,为开发利用该植物资源提供理论依据。方法应用大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20、ODS等柱色谱及制备型高效液相色谱法对尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类成分进行分离,并通过理化性质与核磁共振波谱数据对分离出的化合物进行结构鉴定。结果从尖叶假龙胆体积分数70%乙醇溶液提取物中分离并鉴定了6个单体成分,分别为马钱子酸(loganic acid,1)、7-ketologanin(2)、裂环马钱素(secologanin,3)、獐牙菜苷(sweroside,4)、2'-间羟基苯甲酰獐牙菜苷(deacetylcentapicrin,5)和decentapicrin A(6)。结论在对尖叶假龙胆化学成分进行研究的过程中,分离鉴定了6个环烯醚萜苷类化合物。其中,化合物2、3、5为首次从假龙胆属中分离得到,化合物1、4、6为首次从尖叶假龙胆植物中分离得到。

尖叶假龙胆化学成分的研究

目的研究尖叶假龙胆Gentianella acuta(Michx.)Hulten的化学成分。方法尖叶假龙胆70%乙醇提取物的30%、90%乙醇部位采用硅胶、ODS、HPLC制备柱进行分离纯化,根据波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为小蜡苷Ⅰ(1)、(+)-落叶松脂醇-4-4'-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、(+)-8-羟基-落叶松脂醇-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、(+)-落叶松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、(7S,8R)-赤式-7,9,9'-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、(7S,8R)-赤式-4,9,9'-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(7S,8R)-赤式-4,7,9-三羟基-3,3'-二甲氧基-8-O-4'-新木脂素-9'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、蛇菰宁(8)、urolignoside(9)。结论化合物2~9为首次从假龙胆属植物中分离得到。

尖叶假龙胆中木脂素类成分的分离与鉴定

目的：研究尖叶假龙胆的木脂素类成分。方法：利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱等色谱技术对尖叶假龙胆乙醇提取物进行分离纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定。结果：共分离鉴定了9个木脂素类化合物,分别为：脱氢二松柏醇-4,9＇-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（1）、alaschanisoside A（2）、橙皮素A（3）、橄榄树脂素-4＇-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（4）、leptolepisol D（5）、无梗五加苷D（6）、（＋）松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（7）、（＋）8-羟基-松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（8）、（＋）松脂素-8-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（9）。结论：化合物1~9均为首次从该植物中分离得到,化合物1、9为首次从假龙胆属中分离得到,化合物2、3、5~8为首次从龙胆科植物中分离得到。

维吾尔药新疆假龙胆对大鼠关节炎的作用机制研究

目的考察新疆假龙胆抗类风湿性关节炎(RA)的药理作用及作用机制。方法建立佐剂性关节炎(AA)动物模型,观察新疆假龙胆对AA大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化及血清中促炎细胞因子TNF-α水平的影响。结果新疆假龙胆能有效抑制关节肿胀及减轻炎症的发展,降低AA大鼠血清中促炎细胞因子TNF-α的水平。结论新疆假龙胆具有良好的抗RA作用,其作用机制与抑制促炎细胞因子TNF-α的水平有关。

龙胆与假龙胆的鉴别

龙胆与假龙胆的鉴别刘宝玲张南平王利生肖新月（中国药品生物制品检定所北京１０００５０）龙胆是常用中药，有清热燥湿，泻肝胆火之功效，《中国药典》１９９５年版一部规定为龙胆科植物条叶龙胆ＧｅｎｔｉａｎａｍａｎｓｈｕｒｉｃａＫｉｔａｇ．、龙胆Ｇ．ｓｃａｂｒａ...

尖叶假龙胆对酒精性肝损伤模型大鼠脂代谢及氧化-抗氧化系统的影响

目的:研究尖叶假龙胆在各剂量下对酒精性肝损伤(ALD)模型大鼠的保护作用机制。方法:60只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组,通过梯度酒精灌胃法制造大鼠ALD模型,给予对应组动物阳性对照溶液或不同剂量尖叶假龙胆提取液灌胃,8周后测定ALD模型大鼠血清中的血清脂联素(ADPN)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、游离脂肪酸(NEFA)的含量以及肝组织中乙醛脱氢酶(ALDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、丙二醛(MDA)的浓度水平,比较各组之间的成分的差异,并通过HE染色切片观察肝组织病理变化。结果:与空白组相比,尖叶假龙胆给药后,ALD模型大鼠病理反应明显减轻,血清中ADPN浓度升高、TNF-α、NEFA的浓度降低,肝组织中ALDH、ADH浓度升高、MDA水平降低。结论:尖叶假龙胆对ALD具有保护作用,其机制可能与增加脂质代谢,加快肝脏分解代谢酒精,减少酒精对肝脏造成的氧化损伤有关。

新疆假龙胆不同部位中3种环烯醚萜类成分的含量比较研究

目的比较新疆假龙胆不同极性部位及不同部位中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。方法新疆假龙胆全草乙醇提取物,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到不同极性部位。采用HPLC法,以甲醇-4mL·L-1磷酸水溶液(19∶81)为流动相(流速1.0mL·min-1)同时测定新疆假龙胆不同极性部位及不同部位中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量。结果獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷质量浓度分别在4.04~129.54(r=0.999 4),3.96~126.73(r=0.999 3)和0.93~29.70mg·L-1(r=0.999 5)的范围内线性关系良好。3种化合物含量在正丁醇部位中最高,在乙酸乙酯和水部位中较少,在石油醚部位基本检测不到;3种化学成分含量在不同部位中存在明显差异,含量顺序为花>叶>根>茎。结论花、叶和根具有较高的药用价值,醇提物经萃取后,环烯醚萜类成分得到有效的富集;该方法专属性强、准确度高、重复性好,可用于比较新疆假龙胆药材不同极性部位及其不同部位活性成分的分布情况,为后续合理开发利用新疆假龙胆提供依据。

基于ITS2序列鉴定6种假龙胆属及3种近缘属植物

目的：基于ITS2序列建立6种假龙胆属植物的分子鉴定方法.方法：采集6种假龙胆属植物和喉毛花属、花锚属、龙胆属的植物各1种,所有样品进行总DNA提取,PCR扩增,并对扩增产物进行测序,用MEGA 4计算其种间遗传距离,最后利用ITS2序列构建其系统发育树.结果：序列长度为319 ～334 bp,GC含量为58.9％ ～ 66.2％.种与种之间的遗传距离范围为0.051～0.464,通过系统进化树进行的聚类分析可以将6种假龙胆属植物有效地区分开.结论：ITS2可以成功鉴别出6种假龙胆属植物,可以作为假龙胆属植物的分子鉴定方法,具有重要的应用价值.

尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮的分离、表征及抗菌活性研究(英文)

本文对尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮进行提取分离,采用红外光谱、紫外可见光谱和单晶X射线衍射分析技术对该化合物结构进行了表征;然后,采用密度泛函理论(DFT),在B3LYP/6-31G基组水平上,对化合物结构进行了量子化学计算,结果表明其理论表征数据与实验表征数据吻合良好。另外,研究了雏菊叶龙胆酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的初步抗菌活性。

新疆假龙胆的化学成分研究与含量测定

目的:对新疆假龙胆全草进行化学成分初步研究,并对分离得到酮类化类物进行定量分析。方法:采用75%乙醇回流法对新疆假龙胆全草进行提取,粗提物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次梯度萃取制备不同极性部分,将石油醚部分和乙酸乙酯部分浸膏分别用硅胶柱层析和葡聚糖凝胶LH-20柱层析分离纯化,所得单体化合物经EI-MS、~1H-NMR、^(13)C-NMR等光谱法进行结构鉴定;建立高效液相测定方法测定新疆假龙胆中3个酮类化合物的含量。结果:从新疆假龙胆中分离得到6个化合物,分别为1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮(1)、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮(2)、1-羟基-3,5-二甲氧基酮(3)、木犀草素(4)、胡萝卜素(5)和β-谷甾醇(6);含量测定方法学结果表明1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮、1-羟基-3,5,8-三甲氧基酮和1-羟基-3,5-二甲氧基酮3个酮化合物分离度较好,分别在35.7~713.4、32~1280、34.3~686 ng时与峰面积呈良好的线性关系,精密度试验RSD分别为0.31%、0.27%、0.25%,稳定性实验的RSD分别为1.05%、1.33%、1.58%,重复性实验的RSD分别为2.48%、0.82%、2.63%,加样回收率分别为103.1%(RSD=1.25%)、100.02%(RSD=0.93%),95.10%(RSD=2.62%);1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量范围分别为0.21%~0.28%、0.65%~0.77%、0.19%~0.15%。结论:新疆假龙胆含有黄酮类、酮类和甾醇类化合物;经方法学考察,本研究建立的高效液相测定方法适合新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的测定;新疆假龙胆中1,8-二羟基-3,5-二甲氧基酮等3个化合物的含量较高。

RP-HPLC法同时测定新疆假龙胆中5种活性成分含量

目的建立双波长反相高效液相色谱（RP-HPLC）法同时测定不同海拔新疆假龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和齐墩果酸含量的测定方法。方法采用Shimpack VP-ODS C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇（A）-0.02%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0~20 min,25%A→40%A;20~22min,40%A→95%A;22~32 min,95%A;32~34 min,95%→25%A;34~50 min,25%A）,流速为1.0m L·min-1,柱温为25℃,254 nm检测獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷,210 nm波长检测齐墩果酸。结果獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和齐墩果酸进样量分别在0.28~5.5μg（r=0.9994）,0.10~2.0μg（r=0.9998）,0.028~0.55μg（r=0.9997）,0.053~1.0μg（r=0.9999）,0.065~1.3μg（r=0.9993）范围内呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为100.4%、96.2%、95.6%、97.0%、98.2%;RSD分别为1.89%,1.46%,1.91%,1.57%,1.78%。结论该方法专属性强、准确度高、重现性好,适用于新疆假龙胆的质量控制。

尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的影响

目的:研究尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素关键信号IRS-1、Akt的基因、蛋白的影响。方法:以CCK-8法检测HepG2细胞活性;采用人肝癌HepG2细胞,并用高浓度胰岛素(10^(-6)mol·L^(-1))培养HepG2细胞36 h,建立胰岛素抵抗细胞模型。根据CCK-8法结果分为正常组(Control组)、模型组(IR组)、尖叶假龙胆乙酸乙酯部位IR+50μg·mL^(-1)组、IR+500μg·mL^(-1)组及二甲双胍组,以葡萄糖试剂盒检测葡萄糖消耗量。尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt基因表达;尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后,利用Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达。结果:尖叶假龙胆乙酸乙酯部位浓度为500μg·mL^(-1)时,存活率达到95%。浓度高于500μg·mL^(-1)时,存活率下降;与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖的消耗量,但其作用不及盐酸二甲双胍组。给药6 h后与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组的RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的基因表达显著升高,P<0.01。给药6 h后与IR组比较,IR+50μg·mL^(-1)组与IR+500μg·mL^(-1)组的Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达显著升高,P<0.01。结论:尖叶假龙胆乙酸乙酯部位上调HepG2细胞胰岛素信号通路关键靶点IRS-1、Akt基因表达,以及IRS-1、Akt蛋白表达从而可能是其改善胰岛素抵抗作用的机制。

藏药黑边假龙胆的化学研究

龙胆科植物黑边假龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａａｚｕｒｅａ（Ｂｕｎｇｅ）Ｈｏｌｕｂ）是治疗肝胆湿热的１种藏药，从西藏日喀则产的全草中分离得到９个化合物，其中１个Ｃ一甙黄酮，异荭草素（ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）；１个山酮甙，獐牙菜酚甙（ｓｗｅｒｔｉａｎｏｌｉｎ）；１个木质体甙，橄榄脂素４一Ｏ一β－Ｄ－葡萄糖甙（ｏｌｉｖｉｌ４一Ｏ一β一ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ）；３个环烯醚萜甙，龙胆苦甙（ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ），獐牙菜甙（ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ）和马钱子酸（ｌｏｇａｎｉｃａｃｉｄ）；１个三萜，齐敦果酸（ｌｏｅａｎｏｌｉｃａｃｉｄ）１个甾醇，β谷甾醇葡萄糖甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ）以及１个长链脂肪醇，三十烷醇（ｎ一１一ｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｌ）。它们的结构通过光谱和化学的方法得到了鉴定。上述结果，从次生代谢产物的角度为假龙胆属在系统分类上与龙胆属和獐牙菜属有着密切的联系提供了旁证。

尖叶假龙胆化学成分研究

目的:研究尖叶假龙胆(Gentianella acuta)化学成分。方法:利用各种色谱技术对尖叶假龙胆进行分离纯化,所分离得到的化合物根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:尖叶假龙胆化学成分分别为β-谷甾醇(β-Sitosterol),胡萝卜苷(Daucosterol)与8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1,3,5-三羟基(口山)酮(Norswertianolin)。结论:以上3个化合物均为首次从该植物中分离得到。

尖叶假龙胆对脂多糖诱导脓毒症模型大鼠急性肾损伤的保护作用研究

目的观察尖叶假龙胆对脂多糖(LPS)诱导脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用。方法通过单次腹腔注射LPS(7 mg/kg)制备模型,以地塞米松为阳性对照药,通过观察与检测大鼠的一般情况、尿量、血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)及尿中肾组织肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,考察尖叶假龙胆对大鼠急性肾损伤保护作用。结果造模后24 h时,尖叶假龙胆组、地塞米松组血清Scr和BUN、尿液中KIM-1与NGAL含量与模型组差异有统计学意义(P <0.05)。结论尖叶假龙胆对LPS诱导脓毒症模型大鼠急性肾损伤模型有一定的保护作用,其机制可能与抑制KIM-1与NGAL蛋白有关。

黑边假龙胆的胚胎学研究

系统报道黑边假龙胆（Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａａｚｕｒｅａ（Ｂｕｎｇｅ）Ｈｏｌｕｂ）的胚胎发育过程，用以讨论假龙胆属长期存在争议的分类和系统发育问题。黑边假龙胆花药４室；药壁发育属双子叶型；绒毡层单型起源，细胞单核，属腺质绒毡层；花药壁表皮层宿存，药室内壁减缩。小抱子母细胞减数分裂为同时型，四分体的排列为四面体型；成熟花粉３－细胞型。子房为２心应，１室，减编的侧膜胎座，胚珠４列。薄珠心，单珠被，横生胚珠，大抱子母细胞减数分裂形成的４个大抱呈直列式排列，其中合点端的大抱子具功能。胚囊发育为蓼型。珠心冠原存在。极核在受精前融合为次生核，反足细胞宿存、分裂为８～１２个、每个细胞均多核和异常膨大，反足细胞形成的吸器明显。雄蕊先熟。异花传粉，珠孔受精。花粉管进入胚囊时不破坏助细胞，助细胞宿存；一个精核和次生核的融合几乎发生在另一个精核和卵细胞核融合的同时。受精作用属于有丝分裂前配子体融合类型。胚乳为核型，胚乳核分裂同步，每核含２～３个核仁。胚胎发育为茄型酸浆互变型。成熟种子中胚只发育至球形胚阶段。反足细胞在台子分裂之后才开始退化；在胚的发育过程中反足细胞在胚乳层之外形成一层染色深类似＂外胚乳＂的结构。和龙胆属比较，假龙胆?

尖叶假龙胆醇提物含药血清对A549细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:探讨尖叶假龙胆醇提物(EEGA,ethanol extract from Gentianella acuta)含药血清对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和影响细胞周期的作用。方法:采用四甲基偶氮盐(MTT)比色法检测EEGA含药血清对A549细胞作用24 h、48 h、72 h的增殖抑制率,使用流式细胞仪观察EEGA含药血清处理A549细胞48 h后,细胞凋亡率和细胞周期阻滞率变化的检测。结果:MTT显示EEGA低、中、高剂量含药血清都能抑制A549细胞增殖(P<0.05),其抑制率与作用时间相关。低、中、高剂量含药血清处理A549细胞48 h后凋亡率显著高于空白组(P<0.05),同时低、中、高剂量含药血清处理A549细胞48 h后,G0/G1期细胞明显较空白组增加(P<0.01),提示EEGA含药血清可促进细胞凋亡,并且将细胞生长周期阻滞于G0/G1期。结论:尖叶假龙胆对人肺癌A549细胞有抑制作用,机制可能与抑制细胞生长、阻滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。

尖叶假龙胆对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探究尖叶假龙胆对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌组织的保护作用。方法:选取30只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组以及尖叶假龙胆组,langendorff法建立MIRI大鼠模型,应用生化仪测定CK-MB的含量,采取Elisa法检测心肌组织CAT、MDA,IL-1β,TGF-β的含量,在电镜下观察心肌组织的超微结构。结果:尖叶假龙胆组能改善心肌组织病理学形态的心肌超微结构;尖叶假龙胆组可以使冠脉漏出液中的CK-MB含量明显降低;使心肌组织中MDA、IL-1β、TGF-β含量明显降低,CAT活性明显升高(P<0.05)。结论:尖叶假龙胆能够降低心肌酶,减轻心肌缺血再灌注损伤中的炎症反应及氧化反应的损伤程度,改善心肌组织的超微结构,减轻心肌缺血再灌注损伤程度。

尖叶假龙胆对脂多糖诱导小鼠脓毒症性急性肾损伤的保护作用及机制研究

目的利用脂多糖(LPS)建立小鼠脓毒症性急性肾脏损伤(AKI)模型,探讨尖叶假龙胆对脓毒症性AKI的保护作用及其可能机制。方法将40只小鼠随机分为4组,分别为:对照组,模型组(LPS组),尖叶假龙胆组,阳性药组(地塞米松,dexamethasone,DEX组),每组10只。通过腹腔单次注射LPS(10 mg/kg)制备小鼠脓毒症性AKI模型;其中尖叶假龙胆组于造模前7 d,连续灌胃给药,每日1次,剂量为5 g·(kg·d)-1,其余各组给予等体积生理盐水;DEX组于造模前1 h尾静脉注射地塞米松,剂量为1.2 mg·kg-1,其余各组给予等体积生理盐水。造模后观察小鼠的一般情况,造模12 h后处死小鼠,取材,测算各组小鼠的肾脏指数,HE染色观察肾脏病理组织形态学的改变;检测各组小鼠12 h尿蛋白定量,应用酶联免疫法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的表达水平。结果 HE染色结果显示,LPS组肾间质水肿,有大量炎性细胞浸润;与LPS组相比,尖叶假龙胆组和DEX组肾间质水肿和炎性细胞浸润情况均明显改善。与对照组相比,LPS组肾脏指数及12 h尿蛋白定量水平均显著升高(P<0.05),LPS组血清TNF-α、IL-1β及Cys C水平均显著升高(P<0.05);与LPS组相比较,尖叶假龙胆组和DEX组肾脏指数及12 h尿蛋白定量水平均显著下降(P<0.05);尖叶假龙胆组和DEX组血清TNF-α、IL-1β及Cys C水平均显著下降(P<0.05)。结论尖叶假龙胆对LPS诱导的小鼠脓毒症性急性肾损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制肾内促炎性细胞因子的释放相关。

HPLC法同时测定尖叶假龙胆中三种山酮类化合物的含量

目的：利用高效液相色谱法同时测定尖叶假龙胆中当药醇苷、雏菊叶龙胆酮、去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法：取尖叶假龙胆粗粉0.5 g,用甲醇25 m L超声震荡提取30 min,制成供试品溶液。色谱条件：Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相：甲醇-磷酸水（p H2.6）;柱温35℃;流速1 m L/min;进样量：10μL;梯度洗脱45 min。结果：尖叶假龙胆中当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮分别在13.6~122.4μg/m L,10~90μg/m L,10.8~97.2μg/m L的范围内线性关系良好（r值分别为0.997 4,0.996 7,0.998 0）;当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮平均回收率（n=6）分别为99.97%,102.02%,98%。结论：尖叶假龙胆中当药醇苷,去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮的含量分别为23.94 mg/g,4.49 mg/g,7.92 mg/g。