含有鸡体偏嗜性密码子的H5亚型禽流感病毒HA基因的优化构建及其DNA疫苗体外瞬时表达研究

不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒的密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的表达A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]HA蛋白的基因optiHA5,并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA5,将含有GD/1/96(H5N1)野生型HA基因的质粒pCIHA5和pCIoptiHA5分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24～48h293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白;Westemblot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果表明密码子优化的基因optiHA5体外瞬时表达水平显著高于野生型HA基因.这一结果为进一步开展SPF鸡免疫保护效果的比较研究奠定了基础.

偏嗜五味要有度

不少人的饮食口味有所偏嗜,有些人嗜酸成性,有些人素爱甜食,而有些人则无辣不欢。中医理论认为,饮食有五味——酸、苦、甘、辛、咸,五味对应五脏,即酸入肝、苦入心、甘入脾、辛入肺、咸入肾。然而,对其中某一味有偏嗜,可能反映出身体某个脏器出现了健康问题,同样,过食五味也会影响五脏的健康。所以,想要吃出健康,五味偏嗜则要有度。

假眼小绿叶蝉对不同颜色偏嗜性的研究

作者进行了茶树害虫假眼小绿叶蝉对不同颜色偏嗜性的室内和田间试验。结果表明 :假眼小绿叶蝉最偏嗜黄色。室内试验中 ,琥珀黄诱集的虫数最多 ,且与湖水蓝和宝石绿间的虫数差异不显著 ,与翠绿、雪白和橘橙间的虫数差异显著 (p <0 0 5 )。琥珀黄、油菜花黄和麦杆黄三种不同黄色间诱集的虫数无差异 ,它们与翠绿、靛青和海青间的虫数达差异显著性水平 (p <0 0 5 )。茶园试验中 ,琥珀黄诱集的虫数最多 ,与宝石绿间的虫数差异不显著 ,而与湖水蓝间虫数差异达显著水平 (p <0 0 5 )。室内外试验的结果基本一致 ,即假眼小绿叶蝉偏嗜黄绿色。

大肠杆菌改变果蝇产卵偏嗜性

【目的】用大肠杆菌Escherichia coli和黑腹果蝇Drosophila melanogaster分别作为微生物和宿主模型,研究微生物对宿主产卵行为的影响,并探讨大肠杆菌对果蝇存活率的影响。【方法】本研究首先利用野生型果蝇在双选择食物装置分别检测果蝇对大肠杆菌发酵食物的产卵偏嗜性和位置效应;利用大肠杆菌细胞和上清液解析诱导这种行为的原因;利用视觉、味觉和嗅觉突变体果蝇检测作用的感觉系统;通过蛹和成虫存活率检验果蝇对大肠杆菌发酵食物的产卵选择后果。【结果】黑腹果蝇产卵对大肠杆菌发酵的食物具有极显著趋避行为,产卵指数为-0.89。黑腹果蝇产卵对大肠杆菌代谢产物的产卵指数为-0.52,对大肠杆菌菌体的产卵指数为0.02。Orco2突变体果蝇产卵对大肠杆菌发酵的食物趋避行为严重受损,对应的产卵指数为-0.25。大肠杆菌在食物上生长,黑腹果蝇后代的存活率不足5%,而划破食物表面可以显著地降低大肠杆菌引起的黑腹果蝇死亡,将其存活率恢复到正常水平。【结论】大肠杆菌会改变黑腹果蝇产卵行为,使黑腹果蝇避开在其发酵食物上产卵;大肠杆菌代谢产物引起黑腹果蝇产卵的趋避性,果蝇主要通过嗅觉并联合其他感觉系统感知大肠杆菌代谢产物;黑腹果蝇对大肠杆菌产卵趋避行为可提高后代存活率,因为大肠杆菌形成一层菌膜,会引起果蝇缺氧死亡。

不同参数对美洲斑潜蝇寄主选择偏嗜性分析的影响

使用单位面积累积虫道数、单位叶片累积虫道数和为害率三种参数比较分析了美洲斑潜蝇LiriomyzasativaeBlanchard对菜豆、豆角、番茄、茄子、南瓜、白菜以及8个不同品种(系)菜豆的选择差异性。以单位面积累积虫道数为参数,选择性顺序高低依次为菜豆、豆角、番茄、茄子、南瓜、白菜;以单位叶片累积虫道数为参数,选择差异性高低顺序依次为菜豆、番茄、豆角、白菜、茄子、南瓜;以为害率为参数,选择性高低顺序依次为豆角、菜豆、番茄、茄子、白菜、南瓜。前两个参数的分析结果都表明菜豆是最嗜寄主,但根据为害率的分析却表明豆角受害最重,菜豆次之。利用不同选择性参数对8个不同菜豆品种的嗜好性分析中,前两个参数的分析结果相似,但为害率的分析结果与前两个的差异较大。因此,不同参数对分析美洲斑潜蝇的寄主选择偏嗜性有一定的影响。作者认为单位面积累积虫道数比其它两个为好。

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的密码使用偏嗜性与tRNA基因

目的 检索分析铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的遗传密码使用偏嗜性及其tRNA基因的关系。方法 利用生物信息学软件和网上生物信息学工具 ,检索分析PaP3的遗传密码使用偏嗜性 ;并与铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码使用偏嗜性进行对比分析 ;检索PaP3基因组中tRNA基因并分析其与遗传密码使用偏嗜性的关系。结果 遗传密码偏嗜性分析发现噬菌体PaP3和铜绿假单胞菌优势码一致的氨基酸有F uuc ,I auc ,V guc ,A gcc ,Y uac ,H cac ,N aac ,K aag和T acc ;PaP3单独具有偏嗜性密码的氨基酸有A gcu ,G ggu ,T acu和V gua ;铜绿假单胞菌PAO1单独具有偏嗜性密码的氨基酸有L cug ,V gug ,P ccg ,V gcg ,Q cag ,D gac ,E gag ,C ugc ,R cgc ,S agc和G ggc。tRNA基因查询发现了PaP3基因组中存在三段tRNA编码序列 ,分别编码tRNAAsn,tRNAAsp,tRNAPro;它们的反密码子分别为“gtt” ,“gtc”和“tgg” ,分析结果没有表明这三个tRNA基因与优势转运氨基酸有关。结论 铜绿假单胞菌PAO1的遗传密码偏嗜性更为明显 ,而PaP3的遗传密码偏嗜性相对较弱 ,两者在遗传密码偏嗜性方面并未表现出一致性 ;

美洲斑潜蝇对几种花卉的偏嗜性研究

[目的]研究美洲斑潜蝇对几种花卉的偏嗜性。[方法]以单位叶面积累积虫道数为主要指标,单位叶片累积虫道数和植株危害率为参考指标,研究美洲斑潜蝇在不同月份对几种花卉危害的选择性及危害规律。[结果]美洲斑潜蝇主要危害菊科、蓼科、十字花科和唇形科的花卉,美洲斑潜蝇在不同月份对花卉的危害程度并不相同,对一串红、万寿菊、非洲菊的危害高峰期均处于5月,6、7月依次减轻。对二月兰、金盏菊、三裂绣线菊和百日草的危害程度7月低于6月。整体来看,美洲斑潜叶蝇危害6月较重,7月危害面广,8月危害较轻,这可能与2008年7、8月雨水较多有关。[结论]美洲斑潜蝇在不同月份对花卉的危害程度并不相同,总体上,6月的危害较重,7月危害面较宽,雨水多的月份美洲斑潜蝇的危害程度减轻。

IBDV-VP2基因高变区同义密码子在蛋鸡和乌鸡中的偏嗜性

以RT-PCR方法对河南省洛阳地区2000～2002年分别从IBD发病蛋鸡和乌鸡鸡群中分离到的5株和4株IBDV进行了VP2高变区基因的扩增、克隆和测序.核苷酸和氨基酸序列分析发现,9株IBDV中有4处氨基酸发生了变化,即320位的Gln/His,349位的Val/Ile,375位的Pro/Ser和381位的Lys/Arg.这些氨基酸的变化,不符合变异株的特征.核苷酸序列变化主要表现在同义密码子的置换.分别将分离于蛋鸡和乌鸡的各3个毒株交叉感染乌鸡和蛋鸡鸡胚,盲传7代后取尿囊腔绒毛膜分离病毒进行VP2基因的序列分析.结果表明,IBDV VP2基因高变区某些氨基酸同义密码子在蛋鸡和乌鸡细胞中的选择上有偏嗜性.主要表现在第1亲水区220位的Tyr(TAC/TAT);224、360、393位的Gly(GGA/GGG);260及420位的Thr(ACC/ACT,ACA/ACT);271位的Val(CTA/CTC);279位的Asp(GAC/CAT);305位的Ile(ATC/ATA)及328位的Ser(TCA/TCG).病毒在不同品种宿主中对同义密码子使用的偏嗜性,可能是导致蛋鸡和乌鸡时IBDV易感性不同的一个重要原因,也可能是病毒变异及新毒株产生的一条重要途径.

烟台地区美洲斑潜蝇寄主植物种类及其偏嗜性

于2003年6月15日至8月30对烟台地区美洲斑潜蝇寄主种类及偏嗜性进行了研究。结果表明:美洲斑潜蝇寄主植物有16科64种,其中以豆科、葫芦科、菊科、茄科等植物种类居多。美洲斑潜蝇对不同寄主植物有明显的偏嗜性,对西葫芦、冬瓜、茄子、豇豆的选择性最强,选择系数分别为3.67、1.57、1.22和1.02;对大葱、芸豆和番茄的选择性次之,选择系数分别为0.97、0.81和0.63;对油菜、辣椒的选择性最差,选择系数分别为0.09、0.24。根据PI值,将美洲斑潜蝇的寄主划分为3类:PI>2为敏感寄主,PI<1为不敏感寄主,2>PI<1为次敏感寄主。美洲斑潜蝇的敏感寄主为冬瓜、豇豆、芸豆、西葫芦、和茄子;次敏感寄主为番茄和大葱;不敏感寄主为油菜、辣椒等。

油菜偏嗜性ChIFN-γ基因合成及原核表达

依据鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的氨基酸序列,采用油菜偏嗜性的密码子,人工合成ChIFN-γ,构建原核表达载体pET32a-ChIFN-γ,并转化到E.coliBL21中。1 mmol.L-1IPTG 37℃诱导表达12h ChIFN-γ表达量达到菌体总蛋白的37%。SDS-PAGE电泳检测表明,ChIFN-γ重组蛋白分子量约为33kDa。研究为下一步制备ChIFN-γ抗体进行真核表达研究奠定了基础。

同义密码子使用偏嗜性的统计分析

本文利用已知序列的四种物种:人、鸭、鸡、猪的A型流感病毒基因序列.利用生物统计的方法:相关分析(Correlation Analysis)和对应分析(Correspondence Analysis)、SAS程序、MATLAB程序以及CodonW软件对四种常见物种基因的主要密码子的12个重要的亚型进行了密码子偏好性的分析,并将分析结果进行偏嗜性比较.结果表明基因表达程度并不会影响密码子使用偏嗜性.

肿瘤转移器官偏嗜性探析

肿瘤转移存在器官偏嗜性,肺、肝、脑,骨、心包、淋巴系统、胸膜腔、腹腔等为常见转移器官。造成器官特异性转移的因素大体有交通便利、向导接应、环境宜居、寻求空间、肿瘤习性等。本文依据中医理论,从经络、脏腑气血阴阳探析偏嗜转移的病因病机,提出虚为本,癌毒为先,痰瘀从之的病机关键,以期为临床防治肿瘤转移提供思路参考。

油松毛虫产卵、取食偏嗜行为及油松针叶内含物测定

[目的]为明确油松毛虫在油松上的产卵和取食部位以及可能机理,为未来害虫发生预测模拟提供基础信息数据。[方法]通过室内模拟试验,统计油松毛虫在盆栽油松幼苗不同部位上的产卵量和取食不同油松针叶的偏嗜情况及死亡率;测定油松针叶内含物含量并与油松毛虫偏嗜行为进行了相关性分析。[结果]在一年生油松针叶上平均产卵块数最多(3.10±0.28),显著高于二年生针叶和三年生针叶;取食一年生油松针叶的油松毛虫数量最多(13.40±0.91)、死亡率最低(13.60%±4.87%),显著优于取食二年生油松针叶和三年生油松针叶的幼虫。油松毛虫幼虫取食选择、成虫产卵选择和幼虫体长与油松针叶内含水量成显著正相关(P<0.01);与寄主总酚含量(P<0.01)和碳氮比(P<0.05)成显著负相关。[结论]油松毛虫对一年生油松针叶具有明显的产卵和取食偏嗜行为。一年生油松针叶内含水量最高、总酚含量最低、有机碳含量最低可能是造成寄主偏嗜行为的原因。

嗜酸热古菌病毒STSV2密码子偏嗜性及其对dUTPase外源表达的影响

病毒和宿主之间的密码子使用频率差异是病毒在宿主中生存的重要调控机制之一。利用生物学软件Editseq和RSCU算法统计病毒STSV2及其宿主Sulfolobussolfataricus P2中的6个不同基因的遗传密码偏嗜性,并对病毒STSV2的dUTPase在大肠杆菌BL21和Rosetta中分别进行外源表达并分析其差异。结果表明,病毒STSV2密码子的偏嗜性总体与其宿主菌P2相似,STSV2基因组的不同蛋白编码基因的密码子偏嗜性有区别,病毒和宿主的相似蛋白编码序列密码子偏嗜性也有差异。分别以BL21(DE3)和Rosetta(DE3)为宿主表达STSV2的dUTPase基因显示,以BL21(DE3)为宿主时表达量大于以Rosetta(DE3)为宿主时目的蛋白表达量,进一步说明了病毒STSV2的密码子的偏嗜性对其蛋白的外源表达影响。

关于饮食的风味偏嗜

饮食的风味偏嗜是个普遍的文化现象。就其本质而言，主要出于人们在饮食过程中感官活动的自然基础，色香味形质五者是这种基础的最好概括，而其中最容易形成风味偏嗜的是嗅觉和味觉效应。因此只有洞悉风味的自然科学基础，才能合理地解释风味的人文特点。

饮食偏嗜致病的初步实验观察

饮食偏嗜致病的初步实验观察何晓晖，朱荣林饮食偏嗜是临床常见的饮食致病因素。我们给小鼠片面地喂养辛温燥热的饲料，引起了阴亏内热病证的发生；给小鼠片面地喂养高粱厚味，导致了食滞不化的病理变化。实验结果客观地显示了饮食偏嗜的致病作用。现将实验结果报告如下。...

基于“证”转归论肿瘤转移器官偏嗜的中医发生学

肿瘤转移器官偏嗜性直接影响肿瘤临床疗效和预后,对转移器官偏嗜性发生机制进行剖析是当前癌症研究的新兴课题。中医认为,肝、肺二脏是消化系统恶性肿瘤转移偏嗜的主要器官,且二脏互为靶器官;脑部气血汇聚,极易成为肿瘤转移的靶器官;肺朝百脉,通过血脉传舍的肿瘤细胞易到达肺脏并在此生长;肝藏血,其内血行缓慢,癌毒稽留,易成瘀血;淋巴系统是胃癌远处转移偏嗜的主要途径。虽然中医对肿瘤转移偏嗜性的认知尚未成体系,但基于六经传变、脏腑生克、卫气营血等中医“证”转归的理论,对探索肿瘤转移器官偏嗜发生机制极具启发性。

梨小食心虫在桃园产卵位置偏嗜性选择

【目的】揭示梨小食心虫Grapholitamolesta(Busck)在桃园中的产卵偏嗜性及主要影响因子。【方法】各世代梨小食心虫产卵盛期系统调查桃树树冠不同部位产卵量,分析产卵空间、方位偏嗜性。【结果】1、空间偏嗜性:梨小食心虫越冬代、第1-4代产卵的空间偏嗜性相似,均显著偏好树冠中上部,产卵量占总产卵量91.36%;显著偏好树冠外围,尤以第4代最明显,其卵量占该代总卵量的97.32%。2、方位偏嗜性:越冬代、第1-4代产卵方位偏嗜性基本相似,第1代与第4代均显著偏嗜树冠东部,其它各代无明显差异。3、精准位置偏嗜性:梨小食心虫92.52%的卵均偏嗜叶片,且均为单粒;不同世代显著偏嗜特定叶龄(叶位),但世代间有差异,越冬代偏嗜展开叶,产卵选择率为93.33%,第1-4代偏嗜第1-15片叶,产卵选择率为80.00%,其中第1-3代在第3-8片叶均高于50.00%;各世代均偏嗜叶片背面,每代产卵量占当代总产卵量的97.37%。【结论】梨小食心虫产卵在桃园中具有显著的特定偏嗜性,其卵90%以上产在树冠中上部和外围叶片背面,且单叶1粒卵。本研究为揭示梨小食心虫产卵偏嗜性及其成因、机理,研发基于卵期的精准、高效、绿色监测和综合防控措施提供了科学依据和启示。

饮食偏嗜的成瘾性及病机规律探析

根据食物成瘾性研究,致瘾性食物环境与情绪压力是饮食偏嗜形成的外在与内在原因,相关神经生物学与心理学机制和可衡量的临床表现亦使之具备了完整的疾病内涵。饮食偏嗜是重要的中医病因概念之一,其病以肝郁为主、累及脾肾;具体病机规律为病生于肝、情志内伤,其伤在脾、热浊痰瘀,日久及肾、耗损元神;中医药干预尤其是传统体育与养生指导方法对调节饮食行为、纠正偏嗜具有显著作用。这一认识为建立我国饮食行为干预临床评价体系奠定了基础,也为中医药系统治疗营养代谢类疾病提供了新的视角。