健肝宁的提取工艺研究

目的:研究健肝宁的的最优醇提取工艺。方法:采用正交设计法,以丹参酮ⅡA的含量为指标,正交优选健肝宁醇提取部分的最优工艺。结果:以80%乙醇,加五倍量,回流提取3次,每次2h为最优醇提取工艺。结论:该工艺操作简便,结果准确、可靠,能有效提取健肝宁中的成分,并且能最大限度减少乙醇的用量。

健肝宁片中主要药味的薄层色谱鉴别

目的建立健肝宁片的质量控制方法。方法采用薄层色谱(TLC)法对处方中丹参、山药、黄芪、茯苓进行定性鉴别。结果色谱斑点显色清晰,阴性对照无干扰。结论建立的薄层色谱鉴别方法可用于健肝宁片的质量控制。

健肝宁胶囊治疗慢性乙型肝炎60例临床观察

目的:观察健肝宁胶囊对慢性乙型肝炎病毒的干预作用。方法:采用随机对照方法,将60例病人分为治疗组与对照组,观察2组治疗前后各项相关指标的变化及临床疗效。结果:临床总体疗效、临床症状、谷丙转氨酶、乙肝病毒血清标志物等方面治疗组明显优于对照组。结论:健肝宁胶囊是治疗该病的有效方剂之一。

HPLC法测定健肝宁片中丹参酮ⅡA的含量

目的:建立健肝宁片中丹参酮ⅡA的含量测定方法。方法:采用HPLC法,以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱,流动相为甲醇∶水(75∶25),流速为1.0 mL/min;检测波长为270 nm;柱温为25℃。结果:该方法线性关系良好,线性范围:0.1702-1.702μg,平均加样回收率为98.57%,RSD%为1.25%(n=6)。结论:所建立的方法简便易行、准确可靠,可用于健肝宁片的质量控制。

健肝宁治疗慢性丙型肝炎23例疗效观察

健肝宁治疗慢性丙型肝炎２３例。对消除体征的有效率、ＡＬＴ复常率、抗－ＨＣＶ转阴率分别为７３．９１％、７３．９１％、２１．７４％。对肝痛腹胀等症状的消失和改善、恢复肝功能有效，对抗－ＨＣＶ转阴有一定的作用。

基于网络药理学和分子对接方法探讨健脾利湿养肝方治疗慢加急性肝衰竭的作用机制

目的运用网络药理学和分子对接探究养肝方治疗慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)的作用机制。方法依托TCMSP及GeneCards等多种数据库,获得健脾利湿养肝方治疗ACLF疾病的相关靶点。应用String及Cytoscape构建作用靶点的PPI网络,筛选出核心作用靶点并采用DAVID进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。对健脾利湿养肝方重复出现的活性成分以生物利用度OB值≥30%,类药性DL≥0.18为筛选条件,分选出中药复方健脾利湿养肝方的主要活性成分,并对该主要活性成分与核心作用靶点亲和力进行分子对接及动物体内实验验证。结果共获得健脾利湿养肝方治疗ACLF的活性成分536个,交集靶点基因244个,并筛选出核心靶点基因7个。分子对接显示核心靶基因AKT1、SRC、VEGFA、STAT3、EGFR、MAPK3、HRAS与健脾利湿养肝方中的主要活性成分槲皮素亲和力较好,具有很强的结合活性。另外,体内实验验证健脾利湿养肝方能够降低HRAS、EGFR、STAT3、SRC、VEGFA的表达,以延缓ACLF疾病进展。结论健脾利湿养肝方可能作用于HRAS、EGFR、STAT3、SRC、VEGFA等核心靶点,以达到治疗ACLF的作用。

健肝乐颗粒质量评价

目的 评价健肝乐颗粒质量。方法 分析采用Welchrom C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.3%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长230 nm,建立HPLC指纹图谱。采用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析考察质量一致性。HPLC法测定没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、芹糖甘草苷、甘草苷、异甘草苷、甘草酸铵7种指标成分的含量。结果 16批样品指纹图谱中有21个共有峰,相似度均不低于0.97,指认出7种成分。各批样品聚为2类,VIP大于1的成分有11种。芍药苷含量最高,异甘草苷含量最低。结论 该方法稳定可靠,不同批次健肝乐颗粒质量一致。

健肝消脂方调控PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬治疗非酒精性脂肪肝

[目的]探究健肝消脂方(Jian’gan Xiaozhi Decoction,JGXZ)对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型小鼠的药效作用,并从人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)/E3泛素-蛋白连接酶(Parkin)信号通路介导的线粒体自噬角度探究其作用机制。[方法]60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,随机分为6组,包括正常组(Control),模型组(NAFLD),多烯磷脂酰胆碱胶囊组(polyene phosphatidyl choline,PPC)和JGXZ低、中、高剂量组。除正常组外,另外5组均给予高脂饮食。治疗过程持续8周,每周统计小鼠体质量,8周后采集小鼠血液,分离血清,测定丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;小鼠肝脏称重后固定,取同一部位进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与油红O染色,观察肝组织病理学变化;采用试剂盒检测肝组织中的甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,以及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,以评估JGXZ对NAFLD小鼠炎症反应及氧化应激的影响;免疫印迹法检测电压依赖性阴离子通道蛋白1(voltage dependent anion channel 1,VDAC1)、线粒体外膜转位酶20(translocase of outer mitochondrial membrane 20,TOM20)、细胞色素C氧化酶Ⅳ亚型(cytochrome c oxidase subunitⅣ,COXⅣ)、PINK1、Parkin、苄氯素1(Beclin1)、微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)以及选择性自噬接头蛋白P62(prostacyclin 62,P62)蛋白表达,以评估JGXZ对NAFLD模型小鼠线粒体自噬的影响。[结果]与模型组比较,JGXZ干预明显提升NAFLD模型小鼠体质量,降低肝指数,缓解NAFLD模型小鼠肝组织病变,降低TC、TG、ALT、AST水平,降低IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA的水平,提高了GSH-Px、SOD活性,下调VDAC1、TOM20、COXⅣ以及P62蛋白表达,上调PINK1、Parkin、Beclin1、LC3蛋白表达。[结论]JGXZ可以通过促进PINK1/Parkin信号通路,介导线粒体自噬激活,缓解NAFLD小鼠肝损伤。

健肝乐颗粒联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝纤维化患者50例观察

慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球性的公共卫生问题,据世界卫生组织报道,全球约有2.95亿HBV感染者[1],中国是乙型病毒性肝炎(CHB)的高发区,HBV感染者约7000万,表面抗原阳性率为5%~6%[2]。HBV是小的嗜肝DNA病毒,复制非常活跃,主要通过血液传播、母婴垂直传播,多表现为慢性感染状态,病程迁延,可进展为肝纤维化、肝硬化及肝癌。恩替卡韦为目前CHB抗病毒治疗的一线核苷酸类似物,具有抑制病毒能力强、耐药屏障高、服用方便等优点,临床广泛使用。在中国,据统计服用核苷类似物治疗的CHB患者中,约51.2%的患者使用了恩替卡韦[3]。健肝乐颗粒是一种护肝中成药[4],主要成分为白芍、甘草,养血护肝、解毒止痛,具有降低转氨酶、消褪黄疸、改善肝炎症状的作用[5,6]。目前尚无健肝乐颗粒对慢性乙型肝炎患者无创肝纤维化指标改善情况的相关研究报道,本研究旨在观察健肝乐联合恩替卡韦分散片对慢性活动性CHB患者肝纤维化的改善情况。

健肝散对合并肝功能损伤的腹腔镜胆囊切除术患者术后肝功能恢复的影响

目的 探讨健肝散对合并肝功能损伤的腹腔镜胆囊切除术(LC)患者术后肝功能恢复的影响。方法 选取2022年1月~2023年8月在海安市中医院接受LC手术且术前肝功能异常的82例患者,随机数表法分成对照组与观察组,各41例,两组均接受LC手术治疗,对照组围术期予以常规对症治疗,观察组在其基础上予以健肝散治疗。观察两组术前、术后第1、3和5天肝功能变化状况,以及术前、术后第5天炎症因子变化及治疗期间不良反应发生率。结果 术后,两组患者血清血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(GGT)含量均呈下降趋势,且两组间组间、时间及交互差异比较均有统计学意义(P<0.05)。相较于术前,两组术后第5天血清hs-CRP、IL-6及PCT含量均下降,差异有统计学意义(t_(对照组)=10.897、5.333、5.643,t_(观察组)=15.875、9.496、8.934,P<0.001),且观察组低于对照组,差异有统计学意义(t=0.494、1.315、1.412,P<0.05)。治疗期间,两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P=0.675,P> 0.05)。结论 对合并肝功能损伤的LC患者予以健肝散治疗可有效促进肝功能恢复,减轻炎症反应,值得在临床推广应用。

健肝散联合抗病毒治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的:研究健肝散联合抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)的临床效果。方法:选取2019年3月~2023年5月期间于我院诊治的CHB患者92例,经随机数字表法分别纳入对照组与观察组,每组46例。对照组患者接受富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗,观察组在对照组基础上使用健肝散治疗。比较两组临床疗效、血清乙肝病毒标志物、肝功能水平、中医症候积分、炎症因子水平以及药物不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率为95.65%,与对照组的82.61%相比较更高(P<0.05);观察组乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)转阴率、乙型肝炎病毒-DNA(HBV-DNA)转阴率及肝功能复常率均高于对照组(P<0.05);两组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)水平均下降,且观察组ALT、AST、GGT水平低于对照组(P<0.05);两组胁肋胀痛、腹胀便溏、食少纳呆、身倦乏力评分均下降,且观察组低于对照组(P<0.05);两组白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)水平均下降,Th1/Th2细胞比值均升高,且观察组IL-6、IFN-γ水平低于对照组,Th1/Th2细胞比值高于对照组(P<0.05);两组D-乳酸、DAO及内毒素水平均下降,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组不良反应总发生率为13.04%,与对照组的8.70%相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健肝散联合抗病毒可增强对CHB患者的治疗效果,加强对患者临床症状、肝功能、炎症状态的改善效果,且不增加药物不良反应发生风险。

熊去氧胆酸胶囊联合健肝乐颗粒治疗肝肾阴虚型自身免疫性肝炎的临床观察

研究熊去氧胆酸胶囊联合健肝乐颗粒治疗肝肾阴虚型Autoimmune Hepatitis的临床治疗效果与联合用药安全性。方法 选取2023年1月至2024年1月第四病区(肝胆及传染病科)收治的Autoimmune Hepatitis患者40例,均通过统一的中医辨证分型为肝肾阴虚型,按照随机法将40例患者分为20例观察组和20例对照组,每组患者均为中医辨证为肝肾阴虚的自身免疫性肝炎患者。对照组单独使用熊去氧胆酸胶囊治疗,观察组则在此基础上联合健肝乐颗粒治疗。结果 加用健肝乐颗粒组治疗后患者总有效率为95%,明显高于仅使用熊去氧胆酸胶南治疗的80%(P<0.05)。加用健肝乐颗粒组治疗后谷丙转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平及胆色素水平均显著低于熊去氧胆酸胶囊单独治疗组(P<0.05)。临床症状改善情况,观察组显著优于对照组(P<0.05)。加用健肝乐颗粒组与单用熊去氧胆酸胶囊组患者均未见严重不良反应发生。结论 熊去氧胆酸胶囊联合健肝乐颗粒治疗肝肾阴虚型自身免疫性肝炎具有显著的临床疗效,可明显改善患者指标及症状表现,并且安全可靠,值得在临床上推广应用。

健脾平肝降压汤联合西药治疗高血压的效果观察

在探究健脾平肝降压汤应用于高血压治疗中的临床效果。方法 在选取我院2021年1月至2023年1月我院收治的70例高血压患者,并分为两组。对照组采用常规西药治疗,观察组则加用健脾平肝降压汤。 结果 观察组患者临床各项指标均显著优于对照组(P<0.05)。结论 在常规西药治疗的基础上加用健脾平肝降压汤的临床疗效显著,具有独特优势,可以帮助患者有效的控制其血压的同时降低各种不良反应的发生情况,是比较可靠的中医治疗方式,可以在临床中开展使用。

健脾平肝汤结合电针疗法、耳穴贴敷治疗儿童抽动秽语综合征疗效观察

目的:探究健脾平肝汤结合电针疗法、耳穴贴敷治疗儿童抽动秽语综合征疗效。方法:选取2021年1月-2022年12月作为研究时段,该期间60例抽动秽语综合征患儿为研究对象,单双数(1/2)分组JP组、QT组,各30例,JP组-健脾平肝汤治疗,QT组-JP组联合电针疗法联合耳穴贴敷治疗,对比临床效果。结果:治疗有效率QT组96.67%(29/30)高于JP组73.33%(22/30)(P <0.05);QT组精神不振、喉中声响、口出秽语评分低于JP组(P <0.05)。结论:儿童抽动秽语综合征采用健脾平肝汤结合电针疗法、耳穴贴敷治疗效果理想,值得推广。

健肝方联合恩替卡韦治疗乙肝肝硬化的效果

目的分析健肝方联合恩替卡韦治疗乙肝肝硬化的临床效果。方法采取随机数字表法将乙肝肝硬化患者120例分为两组各60例,两组均口服恩替卡韦治疗,观察组在对照组基础上加用健肝方治疗,两组均连续治疗3个月,对比临床疗效、治疗前后中医症状评分、肝功能指标、肝纤维化指标及肝脏硬度值。结果与对照组相比,观察组临床总有效率较高,治疗后观察组胁部刺痛、腹大坚满、腹壁青筋暴露、胁下积块、面色灰暗、胸腹部点赤缕、大便色黑评分均较低,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBiL)较低,白蛋白(ALB)较高,透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)较低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论健肝方联合恩替卡韦治疗乙肝肝硬化可获得更好的临床效果,中医证候积分得到改善,同时该治疗方法可促进改善肝功能指标及肝纤维化指标,预后较为可靠。

运用网络药理学和实验验证探讨补肝健膝方治疗膝骨关节炎的作用机制

目的:运用网络药理学与实验验证方法研究补肝健膝方治疗膝骨关节炎的潜在作用机制。方法:通过多个数据库筛选补肝健膝方的活性化合物及其治疗膝骨关节炎的相关靶点;检索GeneCards数据库、OMIM数据库、TTD数据库、CTD数据库获取膝骨关节炎的靶点;采用交集法进而获得补肝健膝方与膝骨关节炎的相关靶点;利用Cytoscape软件构建活性成分-交集靶点调控网络,并对交集靶点进行网络拓扑分析;利用Metascape数据库对交集靶点进行GO和KEGG富集分析;制备膝骨关节炎新西兰兔模型,观察补肝健膝方干预效果,检测核心靶点在关节液中的表达。结果:补肝健膝方中筛选活性成分靶点593个,膝骨关节炎靶点824个,药物-疾病共同靶点138个,关键靶点涉及TNF-α、IL1B、MMP9、TP53、VEGFA、ALB、AKT1、EGF等。GO功能富集分析GO条目6 076个,主要涉及细胞迁移的正调控、防御反应、对脂多糖的反应、炎症反应、细胞黏附的调节等;KEGG通路富集分析得到251条信号通路,包括AGE-RAGE信号通路、JAK-Stat信号通路、NF-κB信号通路、TGF-β信号通路等。动物实验结果显示,与空白组比较,模型组新西兰兔关节液中TNF-α、IL-1β含量显著升高(P<0.05);与模型组比较,独活寄生汤组和补肝健膝方组TNF-α、IL-1β表达水平均有不同程度下降(P<0.05)。结论:补肝健膝方可能通过多靶点、多通路调节细胞生存周期、抗氧化、抗炎等发挥治疗膝骨关节炎的作用。

健肝散体外对拉米夫定耐药株病毒表达抑制及增敏作用的研究

目的:探讨健肝散(JGP)对HepG2.2.15耐药株对拉米夫定(LMV)耐药的影响。方法:利用药物浓度递增冲击的方法,建立HepG2.2.15/LMV耐药细胞株模型,CCK8法检测耐药株、敏感株IC_(50)值,观察健肝散(JGP)含药血清对耐药株IC_(50)值影响;设置HepG2.2.15耐药株+正常大鼠血清组及HepG2.2.15耐药株+JGP含药血清组,荧光定量PCR检测两组细胞HBV-pgRNA表达水平,提取RNA后ELISA检测两组细胞上清HBsAg和HBeAg的表达水平。结果:①与HepG2.2.15细胞耐药株+正常大鼠血清组相比,HepG2.2.15细胞耐药株+JGP含药血清的IC_(50)值显著降低;②与耐药细胞株+正常血清组相比,健肝散含药血清可抑制HepG2.2.15 LMV耐药细胞株HBV-pgRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.01);③与HepG2.2.15/LMV耐药细胞株添加正常血清组相比,JGP含药血清可抑制HepG2.2.15/LMV耐药细胞株HBsAg和HBeAg的表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:JGP体外可以增加耐药株对LMV敏感性,有效降低耐药株HBV的表达,对LMV耐药具有一定缓解作用。

健脾柔肝息风汤联合针刺对抽动障碍模型大鼠纹状体区细胞自噬及凋亡的影响

【目的】探讨健脾柔肝息风汤联合针刺对抽动障碍模型大鼠的治疗作用及其机制。【方法】采用腹腔注射亚氨基二丙腈(IDPN)方法建立抽动障碍大鼠模型。造模成功后第3天将抽动障碍大鼠随机分为模型组、健脾柔肝息风汤组(汤剂组)、针刺组和健脾柔肝息风汤联合针刺组(联合组),另设空白组,每组12只。给予健脾柔肝息风汤灌胃或联合针刺治疗6周后,评价各组大鼠行为学改变,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠纹状体病理学变化,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠纹状体细胞凋亡,透射电镜观察纹状体组织自噬体形态,Western Blot法检测纹状体中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3及自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)和Beclin1的蛋白表达水平。【结果】与空白组比较,模型组大鼠运动及刻板行为评分显著升高,纹状体细胞损伤严重,纹状体细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而自噬水平及LC3和Beclin1蛋白表达水平无显著性差异(P>0.05);与模型组比较,汤剂组、针刺组和联合组大鼠运动及刻板行为评分显著降低,纹状体细胞损伤明显改善,纹状体细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),自噬水平及Bcl-2、LC3和Beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.05);联合组对上述各指标的改善作用优于汤剂组、针刺组(均P<0.05)。【结论】健脾柔肝息风汤联合针刺治疗可改善抽动障碍大鼠抽动行为,其机制与提高纹状体区细胞自噬水平、抑制细胞凋亡有关。

基于宫廷医学“调肝健脾法”治疗心房颤动

心房颤动是一种常见的快速性心律失常,对病人的生活质量和健康造成巨大影响。张京春主任通过分析宫廷医案,发现心悸与肝脾两脏存在相关性,同时在现代医学机制上存在一定联系。宫廷医学治疗心悸使用调肝健脾的治疗原则,从疏肝、养肝、健脾等方面组方用药,可作为现代临床中治疗心房颤动的一种参考。

龙胆健肝胶囊在大鼠体内的药物代谢动力学研究

目的研究龙胆健肝胶囊在大鼠体内的药物代谢动力学。方法采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定大鼠血浆中龙胆健肝胶囊8个成分的含量。色谱条件,色谱柱为Polaris C_(18)-A柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;质谱条件,电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,毛细管电压3000 V,鞘气(GS1)压力35 Arb,辅助气(GS2)压力7 Arb,毛细管温度300℃,挥发气温度300℃。取SD大鼠6只,分别灌胃龙胆健肝胶囊0.80 g/kg,测定血药浓度,并用DAS 2.0软件计算药物代谢动力学参数。结果龙胆苦苷、绿原酸、虎杖苷、金丝桃苷、橙皮苷、大黄酸、大黄素甲醚、川陈皮素质量浓度分别在31.52~2017.03 ng/mL、4.03~257.96 ng/mL、3.29~216.75 ng/mL、18.51~1184.64 ng/mL、9.03~577.92 ng/mL、14.24~911.36 ng/mL、30.24~1935.36 ng/mL、1.31~83.84 ng/mL范围内与各成分同内标峰面积的比值线性关系良好。日间及日内精密度、提取回收率及稳定性均达到测定要求。8种成分的峰浓度(C_(max))分别为(587.38±39.53)ng/mL、(26.57±4.00)ng/mL、(34.83±2.64)ng/mL、(51.29±4.97)ng/mL、(58.96±2.22)ng/mL、(114.26±7.71)ng/mL、(825.19±86.03)ng/mL、(1.83±0.03)ng/mL。结论所建立的UPLC-MS/MS法快速简便、稳定可靠,适用于龙胆健肝胶囊的药物代谢动力学研究。