基于骨骼肌线粒体动力学探讨健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素敏感性的影响

目的:观察健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖模型小鼠(DIO)胰岛素敏感性的影响,并基于骨骼肌线粒体动力学讨论其作用机制。方法:将30只小鼠随机分为正常组(NOR组,n=6)和模型对照组(n=24),NOR组小鼠予正常饲料喂养。MOD组小鼠利用高脂饲料诱导建立C57BL/6J肥胖模型。将18只造模成功小鼠随机分为模型组(MOD组)、健脾清化方组(JPQH组)、二甲双胍组(MET组),每组6只,分别予生理盐水、健脾清化方(1.3g/mL)、二甲双胍(30 mg/mL)进行干预。干预6周后,称量小鼠体质量,检测空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性、葡萄糖耐量,反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测小鼠骨骼肌有丝分裂融合蛋白1(Mfn1)mRNA、有丝分裂融合蛋白2(Mfn2)mRNA、视神经萎缩蛋白1(Opa1)mRNA、动力相关蛋白1(Drp1)mRNA、线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Mfn1、Mfn2、Opa1、Fis1、Drp1、肌球蛋白重链(MYH)蛋白表达水平。结果:干预1周后,JPQH组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预2、3、4、5、6周后,JPQH组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预2、3、4、5、6周后,MET组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预1周后,MET组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠FINS水平低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IPITT试验中,JPQH组小鼠各时间点血糖水平均低于MOD组(P<0.05);JPQH组小鼠0 min血糖水平高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下面积AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。OGTT试验中,JPQH组小鼠0 min血糖水平与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05),JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平均低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Mfn2 mRNA相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Fis1 mRNA相对表达量高于MOD组(P<0.05),低于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1 mRNA相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1、Mfn2蛋白相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1、Fis1蛋白相对表达量低于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1蛋白相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组小鼠MYH蛋白相对表达量低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方可以降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠体质量,改善小鼠的胰岛素敏感性,降低胰岛素抵抗;健脾清化方可能通过影响骨骼肌线粒体动力学进而改善骨骼肌胰岛素抵抗,以稳定血糖。

健脾清化方联合四联疗法治疗幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证的临床观察

目的探讨用自拟健脾清化方联合四联疗法治疗幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证的临床疗效。方法研究对象为安徽中医药大学第一附属医院老年脾胃科收治的脾虚湿热型幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎患者62例,随机分为对照组和观察组,每组31例。对照组采用西药四联疗法治疗,观察组除西药外,加用自拟健脾清化方加减治疗。对比对照组和观察组的总有效率、中医证候积分、Hp转阴率及不良反应。结果观察组总有效率和Hp清除率均高于对照组,中医证候评分低于对照组(P<0.05);2组不良反应率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论自拟健脾清化方联合四联疗法在治疗幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证,能够提高临床疗效、改善临床症状,有效杀灭幽门螺杆菌,且具有较高的安全性,值得临床应用推广。

健脾清化方对肥胖小鼠血管内皮的保护作用研究

目的探讨健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胸主动脉内皮的保护作用及可能机制。方法采用高脂饲料喂养C57BL/6小鼠12周诱导肥胖小鼠模型,将小鼠分为模型组、健脾清化方组和盐酸二甲双胍组,以正常喂养小鼠作为正常组,每组6只。给药6周后,HE染色观察小鼠胸主动脉内皮结构变化,Masson染色观察胸主动脉纤维化改变,透射电镜观察胸主动脉内皮细胞超微结构,免疫组化检测胸主动脉血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1/CD31)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达。结果与正常组比较,模型组小鼠胸主动脉局部内皮细胞脱落,内膜层增厚,有泡沫样细胞聚集,局部管壁平滑肌和弹力纤维萎缩,平滑肌细胞排列紊乱,胶原纤维增加,CD31表达降低,NLRP3表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,健脾清化方组小鼠胸主动脉内皮结构基本完整,内皮细胞脱落减少,内膜及中膜胶原纤维减少,CD31表达有升高趋势,NLRP3表达显著降低(P<0.01)。结论健脾清化方可能通过下调NLRP3表达改善肥胖小鼠受损的血管内皮形态和超微结构,改善炎症状态,CD31可能是健脾清化方保护血管内皮结构和通透性的重要靶点。

健脾清化方对糖尿病模型大鼠胰岛素敏感性及骨骼肌p38MAPK信号通路的影响

目的:观察健脾清化方对糖尿病模型大鼠胰岛素敏感性的影响,探讨p38丝裂原活化的蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在其中的作用机制。方法:利用高脂高糖饲料协同小剂量链脲佐菌素来诱导建立Wistar大鼠糖尿病模型,按照随机数字表法分为模型组(CON组)、健脾清化方组(JPQ组)、吡格列酮组(PIO组),每组8只,另取同批次8只大鼠为空白对照组(NOR组),以普通饲料喂养。正葡萄糖高胰岛素钳夹实验和腹腔胰岛素耐量试验(Intraperitoneal Insulin Tolerance Test,IPITT)观察健脾清化方对大鼠胰岛素敏感性的影响。反转录聚合酶链式反应法(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,Rt-PCR)观察健脾清化方对大鼠骨骼肌p38MAPK通路的关键信号分子(MKK3、MKK6、p38MAPK)及葡萄糖转运体4(glucose transporter type-4,Glut-4)基因表达水平的影响,蛋白质免疫印迹法(Western blot)观察健脾清化方对大鼠骨骼肌p38MAPK通路的关键信号分子(MKK3、MKK6、p38MAPK、p-p38MAPK)及Glut-4蛋白表达水平的影响。结果:与模型组比较,健脾清化方能提高葡萄糖输注率(P<0.01),降低胰岛素曲线下面积(P<0.01),有效提高模型大鼠胰岛素敏感性。与模型组相比,健脾清化方能抑制MKK3的基因和蛋白表达(P<0.05),降低骨骼肌p38MAPK的基因和蛋白表达(P<0.05)及磷酸化,提高Glut-4基因和蛋白的表达(P<0.05)。结论:健脾清化方可能通过抑制p38MAPK信号通路,促进Glut-4基因和蛋白表达,改善糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗。

健脾清化方联合美沙拉嗪对脾虚湿热型溃疡性结肠炎患者生活质量的影响

目的:探讨健脾清化方联合美沙拉嗪对脾虚湿热型溃疡性结肠炎患者生活质量的影响。方法:选取82例脾虚湿热型溃疡性结肠炎患者为研究对象,按治疗方式不同分为试验组(n=41)和对照组(n=41)。试验组采用美沙拉嗪和健脾清化方联合用药治疗;对照组采用美沙拉嗪进行治疗。治疗3个月后,比较两组之间炎性肠病问卷(IBDQ)评分、SF-36健康调查问卷(SF-36)评分及UC sutherland疾病活动度指数值的差异,以评估患者的生活质量。结果:治疗后,两组UC sutherland疾病活动度指数值均有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。然而,两组在肠道症状、全身症状、身体功能、身体疼痛、活力和心理健康的评分以及SF-36问卷总分差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方联合美沙拉嗪治疗脾虚湿热型溃疡性结肠炎患者,能够缓解轻度至中度患者的临床症状,从而改善其生活质量。

健脾清化方对5/6肾切除大鼠ATⅡ/NADPH氧化应激通路的干预作用

目的:研究中药复方健脾清化方对慢性肾衰竭肾纤维化大鼠ATⅡ/NADPH氧化应激通路的影响,初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:用5/6肾切除(Plat法)建立慢性肾衰竭大鼠模型,分为假手术组、模型组、健脾清化方组和氯沙坦组。治疗60 d后测定血清肌酐、尿素氮水平;测定各组肾组织中SOD和MDA水平;Western印迹检测各组肾组织AT1蛋白表达;RT-PCR检测各组肾组织p47phox mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清肌酐和尿素氮均有明显上升,肾组织匀浆中SOD活性降低,MDA含量升高,肾组织中AT1蛋白表达显著上调,p47phox mRNA表达显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,健脾清化方组和氯沙坦组血清肌酐和尿素氮含量降低,肾组织匀浆中SOD活性上升,MDA含量下降,肾组织中AT1蛋白表达显著下调,p47phox mRNA表达显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与氯沙坦组比较,健脾清化方组肾组织SOD活性明显升高,(P<0.05),肾组织中AT1蛋白及p47phox mRNA表达下降趋势明显,但差异无统计学意义(P>0.05),血清BUN,SCr水平和肾组织中MDA含量两组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方可通过降低ATⅡ及NADPH氧化酶的表达,从而改善慢性肾衰竭大鼠的氧化应激反应,延缓肾纤维化进程。

健脾清化方对2型糖尿病(气阴两虚型)血糖波动的作用研究

目的:采用随机、对照方法,通过持续动态血糖监测观察健脾清化方对2型糖尿病患者血糖波动的影响。方法:选择上海中医药大学附属曙光医院内分泌科2013年1月—2014年3月的2型糖尿病住院病例共63例。在维持原有降糖方案基础上,随机分为健脾清化方组和对照组。疗程为3个月。观察健脾清化方对治疗前后血糖波动(MBG、高、低血糖时间、SD、MAGE、MODD)、糖化血红蛋白、C肽分泌(空腹、餐后30 min、餐后2 min C肽、CGI)的影响。结果:健脾清化方组治疗后可以减少低血糖时间,并有效降低患者MAGE和MODD(P<0.05),疗效优于对照组(P<0.05)。健脾清化方组治疗后CGI升高,且疗效优于对照组(P<0.05)。结论:健脾清化方能有效减少日间和日内血糖波动,减少低血糖发生的危险性。并能改善胰岛细胞早相分泌功能。

健脾清化方对糖尿病大鼠血糖波动和胰岛分泌功能的影响

目的观察中药复方健脾清化方干预糖尿病模型大鼠血糖波动及改善胰岛细胞分泌功能的作用。方法小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型。随机分为健脾清化方组(JPQ组)、正常组(NOR组)和模型组(CON组)。分别给予生药含量1.3 g/ml健脾清化方10 ml/kg和等剂量蒸馏水灌胃,干预4周。葡萄糖氧化酶法观察健脾清化方对模型大鼠糖代谢(IPGTT)、血糖波动水平[平均血糖波动幅度(Mean amplitude of glycemic excursions,MAGE)、葡萄糖曲线下面积(Area under curve of glucose,AUCg)]、Elisa法检测胰岛细胞功能[I/G、胰岛素原(Proinsulin,PI)、真胰岛素(True insulin,TI)、PI/TI]的影响,并行HE染色光镜下观察胰岛细胞形态变化。结果健脾清化方组大鼠的腹腔糖耐量血糖水平显著降低(P<0.05),MAGE和AUCg降低(P<0.05),健脾清化方组PI显著下降(P<0.05),TI显著上升(P<0.05),PI/TI显著下降(P<0.05),I/G显著上升(P<0.05)。HE染色光镜下可见健脾清化方组胰岛细胞数量增多,形态改善。结论健脾清化方能有效改善糖尿病模型大鼠的糖代谢和血糖波动,并对糖尿病模型大鼠的胰岛素分泌功能和胰岛细胞形态有一定的改善作用。

健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾衰的临床疗效及细胞分子机制研究

目的观察健脾清化方对脾虚湿热型慢性肾衰患者临床疗效及白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、尿转化生长因子(TGF-β)的影响,探讨“脾虚湿热”对加重慢性肾衰进展的机理。方法将106例脾虚湿热型慢性肾衰患者随机分为治疗组和对照组各53例,对照组针对慢性肾衰加重因素等治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用健脾清化方治疗。疗程60天。结果治疗组能明显改善慢性肾衰患者的临床症状,降低血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和IL-6、尿TGF-β,使IL-2有显著的增加。结论早中期慢性肾衰在常规治疗的基础上加用健脾清化方,能改善患者的肾功能,降低蛋白尿“。湿热”作为加重CRF的影响因素,与高度表达的细胞生长因子和代表炎症的白介素对肾组织的损害有关,而“脾虚”与IL-2下降相关。

健脾清化方对CKD2～3期患者慢性微炎症状态的随机对照多中心研究

目的:研究健脾清化方对慢性肾脏疾病(CKD)2～3期脾虚湿热患者慢性微炎症状态的作用。方法:3个中心的随机对照临床研究,随机分成中药组和对照组,并设20例健康体检患者为正常组。对照组予西医常规治疗,中药组在对照组基础上加用健脾清化方。共随访8周,观察治疗前后血肌酐(Scr)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)的变化。结果:最终中药组有74例、对照组有73例完成研究。治疗前两组的hs-CRP、IL-17、IFN-γ比正常组显著升高(P<0.05)。8周的治疗后,中药组的Scr有显著下降(P<0.05)。中药组hs-CRP平均下降了26.4%(P<0.05),而对照组有上升的趋势。中药组IL-17平均下降了73.5%(P<0.05),对照组平均下降了25.6%。中药组IFN-γ平均下降了48.3%(P<0.05),而对照组平均下降了23.3%。结论:CKD2～3期的脾虚湿热患者存在慢性微炎症状态,健脾清化方能明显改善微炎症状态。

健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1 mRNA表达的影响

目的观察健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1(trans-forminggrowthfactorβ1,TGFβ1)mRNA表达的影响。方法模型组和健脾清化方治疗组大鼠予以高脂饲料喂养结合5/6肾切除法,建立慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠模型,并分别予以蒸馏水和健脾清化方灌胃干预8周。干预结束后,检测正常对照组、模型组和健脾清化方治疗组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的水平;并检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶的活性及丙二醛和游离脂肪酸的含量。采用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织TGFβ1mRNA的表达水平。结果模型组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白水平均较正常对照组明显升高;肾组织超氧化物歧化酶活性较正常对照组明显下降;肾组织丙二醛、游离脂肪酸含量及TGFβ1mRNA表达水平则较正常组对照组明显升高,差异均有统计学意义。健脾清化方治疗组上述指标则均较模型组有不同程度的改善,差异有统计学意义。结论健脾清化方可减少慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠24h尿蛋白定量,改善其肾功能,其作用机制与改善脂质代谢紊乱、调节氧化-抗氧化系统及降低肾组织TGFβ1的表达相关。

健脾清化方改善代谢综合征患者内皮功能的临床研究

目的评价健脾清化方对代谢综合征患者血管内皮功能的作用及可能途径。方法采用随机双盲平行安慰剂对照的方法,治疗组和对照组各观察28例,通过8周临床治疗,比较治疗前后内皮依赖性血管舒张功能(高分辨血管外彩色多普勒测定肱动脉反应性充血后血管内径的最大变化率)、血管内皮相关因子(NO、ET-1)、胰岛素抵抗(HOMA2-IR)的变化。结果干预后治疗组的肱动脉内径最大变化率高于对照组(P<0.05),治疗组血清NO浓度高于对照组(P<0.05),治疗组血浆ET-1浓度下降(P<0.05),对照组治疗前后无明显变化(P>0.05),治疗组HOMA2-IR下降(P<0.05),对照组治疗前后无明显变化(P>0.05)。结论健脾清化方能改善代谢综合征患者血管内皮功能,其作用途径可能是降低血浆ET-1浓度、升高血清NO浓度和减轻胰岛素抵抗。

健脾清化方在肾小球硬化大鼠中抗肾纤维化的作用及其机制

目的观察健脾清化方对肾切除联合阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化模型大鼠总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨该方抗肾纤维化的机制。方法将56只雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组、健脾清化方组、益气健脾组、清热化湿组和尿毒清组,每组8只。后5组行单侧肾切除合并阿霉素(3 mg/kg)尾静脉注射建立大鼠肾硬化模型,分别给予健脾清化方、健脾清化方拆方(益气健脾方及清热化湿方)、尿毒清颗粒干预8周。测定用药后各组血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平。结果模型组与正常组及假手术组比较,血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平均显著升高(P均<0.01)。与模型组比较,健脾清化方组、清热化湿组、尿毒清组血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平均显著降低(P均<0.01),益气健脾组血清TC、TG、VLDL均显著降低(P均<0.01),但LDL及肾组织TNF-α水平差异无统计学意义(P均>0.05)。结论健脾清化方可改善脂质代谢紊乱,并下调肾组织TNF-α的表达,从而改善肾脏炎症反应,实现抗肾纤维化的作用。方中的清热化湿药物对于降低LDL和肾组织TNF-α水平起着核心作用。

健脾清化方对不同饮食喂养的CRF大鼠胃动素、胃泌素的影响

目的观察健脾清化方对不同饮食喂养的慢性肾衰竭(CRF)大鼠胃动素、胃泌素的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭的胃肠道症状,降低血肌酐,延缓肾功能衰竭进展的机制。方法将80只SD雄性大鼠随机分为正常组8只,造模组72只,应用Platte法切除大鼠肾组织制作慢性肾功能衰竭动物模型,按不同饮食喂养分为7组,喂养8周后处死并采集标本,测定血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量、胃动素、胃泌素等指标,进行分析。结果各造模组血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白定量均显著高于正常组(P<0.05),其中高脂饲料模型组和持续高脂饲料模型组的胃动素、胃泌素明显高于正常组(P<0.05,P<0.01)。健脾清化方不仅具有显著降低持续高脂饮食饲料模型组的血肌酐、尿素氮及24h尿蛋白定量的作用(P<0.01),同时能明显抑制胃动素、胃泌素的分泌(P<0.05)。结论健脾清化方具有明显抑制胃动素、胃泌素,改善慢性肾功能衰竭的胃肠道症状和延缓肾功能衰竭进展的作用。

健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾衰的临床观察

目的:观察健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者的临床疗效及作用机制。方法:将脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者随机分为两组,对照组与健脾清化方组各53例。对照组予以纠正水、电解质紊乱,现代营养及血管紧张素转换酶或受体抑制剂等治疗;健脾清化方组在对照组治疗的基础上加用健脾清化方治疗。结果:健脾清化方组患者的临床症状有明显改善,血肌酐、尿素氮、甘油三酯和低密度脂蛋白均有下降,而红细胞总花环有显著增加,与对照组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论:早、中期慢性肾功能衰竭患者在常规治疗的基础上加用健脾清化方,能显著降低血脂,提高细胞免疫功能,从而改善肾功能,降低蛋白尿。

健脾清化方对2型糖尿病气阴两虚型患者糖脂代谢指标和体质量的影响

目的探讨健脾清化方对气阴两虚型2型糖尿病患者糖脂代谢指标和体质量的影响。方法采用回顾性临床研究方法,选取68例2型糖尿病气阴两虚型患者,分为常规组和健脾清化方组,随访时间超过3个月,观察两组治疗前后糖脂代谢指标和体质量变化。结果治疗3个月后,健脾清化方组FPG、HbAlc、TG、LDL-C及BMI指数,均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾清化方可降低2型糖尿病气阴两虚患者体质量,改善糖脂代谢指标。

健脾清化方有效单体对活化的肾成纤维细胞株和系膜细胞株增殖的影响

目的:观察健脾清化方有效单体对活化的肾成纤维细胞株和系膜细胞株的影响。方法:采用体外培养肾成纤维细胞株和系膜细胞株的方法,将其分为空白对照组、TGF-β12 ng/mL组、TGF-β1 2 ng/mL+中药10-5 g/mL组和TGF-β12 ng/mL+中药10-6g/mL组。采用MTT法观察24 h中药单体对两种细胞株的作用以及ELISA法对TGF-β的分泌情况。结果:与空白对照组相比,加入TGF-β1刺激因子可以促进两种细胞株的活化(P<0.05),以及TGF-β的分泌(P<0.01),中药单体可以抑制活化的细胞株增殖和TGF-β的分泌(P<0.05或P<0.01)。结论:健脾清化方中药单体可以抑制活化的肾成纤维细胞株和系膜细胞株的增殖,有效防治肾纤维化,其可能的作用机制与其抑制TGF-β的分泌有关。

基于IKKε在代谢中的作用探讨健脾清化方对饮食介导肥胖小鼠体脂影响及其机制

目的探讨健脾清化方对肥胖模型(DIO)小鼠体质量的影响及其机制。方法以高脂饲料喂养C57/BL小鼠构建肥胖模型,造模成功后按体质量随机分为模型组(HFD组)、健脾清化方组(JPQH组),另设立正常饲料喂养的C57/BL小鼠为正常对照组(NOR组)。JPQH组按等效剂量15 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃给药,HFD组和NOR组以等量的0.9%Na Cl溶液灌胃干预6周。通过体质量、体脂、肝脏病理等指标评估各组代谢表型的差异;并采用Western blotting法及RT-PCR法检测脂肪组织内IkB激酶ε(IKKε)、解耦联蛋白1(UCP-1)蛋白及基因的表达。结果与NOR组比较,HFD组小鼠体质量、体内脂肪含量显著增高(P<0.05),而健脾清化方能显著改善高脂喂养引起的体质量、体内脂肪增高(P<0.05)。病理观察发现,健脾清化方能显著改善高脂喂养引起的肝脏脂肪异位沉积。与NOR组比较,HFD组脂肪组织内IKKε的蛋白及基因表达明显上调(P<0.05),UCP-1的蛋白及基因表达明显下调(P<0.05);与HFD组比较,JPQH组脂肪组织内IKKε蛋白及基因表达水平降低(P<0.05),而UCP-1的蛋白及基因表达水平提高(P<0.05)。结论健脾清化方能降低肥胖小鼠体内脂肪含量,从而显著改善高脂饲养引起的小鼠体质量增加及脂肪异位沉积,其机制可能与调节IKKε/UCP-1通路,提高机体能量消耗有关。

健脾清化方调节局灶节段硬化大鼠炎症信号通路的机制

目的从阻断炎症细胞生物功能角度,探讨健脾清化方对局灶节段硬化(FSGS)模型大鼠肾纤维化的影响。方法左侧肾切除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响。结果大鼠肾小管间质IL6表达,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组明显低于模型组(P<0.01)。大鼠肾小管间质MCP-1表达,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组较模型组明显下降(P<0.01);健脾清化方组较尿毒清组下降(P<0.05)。大鼠肾小管间质ICAM-1表达,与模型组相比,健脾清化方组、清化方组、尿毒清组明显下降(P<0.01),健脾方组较模型组下降(P<0.05);健脾清化方组较尿毒清组下降(P<0.05)。大鼠肾小管间质MCP-1、ICAM-1荧光强度,与模型组相比,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组明显减弱(P<0.01),与尿毒清组比较,健脾清化方组、清化方组荧光强度明显减弱(P<0.01)。健脾清化方能显著降低IL6、MCP-1、ICAM-1表达,且对MCP-1、ICAM-1的效果优于尿毒清组。结论健脾清化方对FSGS模型大鼠肾脏的炎症损伤和肾纤维化有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方终止IL-6的信号通路有关。

健脾清化方对肾纤维化大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织Col-IV表达的影响

目的探讨健脾清化方对肾切除联合阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化模型大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织IV型胶原(Col-IV)表达的影响。方法建立单侧肾切除合并阿霉素3mg/kg尾静脉2次注射大鼠肾硬化模型,分别予以健脾清化方、健脾清化方拆方(益气健脾方及清热化湿方)、尿毒清颗粒干预8周。测定用药后各组肾功能及24h尿蛋白定量,实时荧光定量PCR法测定肾组织Col-IV表达水平。结果模型组与空白组及假手术组相比,血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,健脾清化方组血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显下降(P<0.01),清热化湿方组血清肌酐及肾组织Col-IV表达水平明显下降(P<0.01),尿素氮降低(P<0.05),尿毒清组尿素氮及肾组织Col-IV表达水平明显下降(P<0.01),血清肌酐、24h尿蛋白定量降低(P<0.05),益气健脾方组各项指标均无明显下降(P>0.05)。结论健脾清化方能下调肾组织IV型胶原的表达,从而抑制细胞外基质的积聚和肾小球系膜增殖,发挥抗肾纤维化和保护残存肾功能的效用。其拆方清热化湿方在改善肾功能和肾纤维化方面的疗效与健脾清化方接近,提示清热化湿类药物是健脾清化方抗肾纤维化的关键。