健脾理气化湿方对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝细胞损伤、氧化应激和硝化应激的影响

目的观察健脾理气化湿方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝细胞损伤、氧化应激和硝化应激的影响,探讨其治疗NASH的作用机制。方法32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组和中药低、高剂量组,每组8只。对照组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养,连续16周。第13周开始,对照组和模型组予0.4%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,中药低、高剂量组分别予相应剂量药物灌胃。生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,HE染色、油红O染色观察肝脏组织病理变化,试剂盒检测肝组织三酰甘油(TG)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫荧光染色检测肝组织CD11b阳性表达,RT-PCR检测肝组织NADPH氧化酶1(NOX1)、中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)mRNA表达,Western blot检测肝组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、3-硝基酪氨酸(3-NT)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肝细胞弥漫性脂肪变性,肝细胞肿胀、有明显炎性细胞浸润,油红O染色见大量脂滴形成;血清ALT、AST含量显著升高(P<0.05),肝组织TG含量、MPO活性显著升高(P<0.05),CD11b阳性表达升高,肝组织NOX1、NCF1 mRNA表达显著升高(P<0.05),iNOS、3-NT蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药低、高剂量组小鼠肝脏脂肪变性、炎性细胞浸润减轻,脂滴明显减少;血清ALT、AST含量显著降低(P<0.05),肝组织TG含量、MPO活性显著降低(P<0.05),CD11b阳性表达降低,肝组织NOX1、NCF1 mRNA表达显著降低(P<0.05),3-NT蛋白表达显著降低(P<0.05),中药高剂量组小鼠肝组织i NOS蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论健脾理气化湿方可能通过减轻肝脏氧化应激和硝化应激,减轻NASH小鼠肝细胞损伤、脂质沉积和炎症反应,发挥治疗NASH作用。