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健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧皮质Claudin-5、Occludin、p-BAD、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响
1
作者
陈佳敏
李花
+2 位作者
刘旺华
陈岩岩
陈心豪
《环球中医药》
CAS
2023年第4期653-660,共8页
目的探讨健脾补土方减轻脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的可能作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组10只、手术组70只,手术组经模型制备后评价,剔除不成功的及死亡大鼠,二次分组,分为模型组、依达拉奉组、健脾补土方高、中、低剂量...
目的探讨健脾补土方减轻脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的可能作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组10只、手术组70只,手术组经模型制备后评价,剔除不成功的及死亡大鼠,二次分组,分为模型组、依达拉奉组、健脾补土方高、中、低剂量组,每组各13只。手术组采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),干预7天,取材。取材前每组选取10只,采用国际公认的大鼠脑卒中后神经功能缺损评分法(mNss评分)进行神经功能缺损评分。取材部位为缺血侧脑皮质组织。每组随机选取3只采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察病理形态改变;每组随机选取其中5只采用Western blot法检测紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、闭合蛋白(Occludin)表达量;剩余5只采用免疫组化法检测磷酸化相关死亡启动因子(phospho-Bcl-xL/Bcl-2 asociated death promoter,p-BAD)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达量。结果(1)造模后,与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显上升,经药物干预后,各组神经功能缺损评分均有所下降(P<0.05),其中以依达拉奉组与健脾补土方高剂量组下降最为明显;(2)造模后,模型组大鼠较假手术组病理改变严重,出现组织大片坏死,经药物干预后,各组病理改变均有所改善,依达拉奉组和健脾补土方高剂量组尤为明显;(3)与模型组比较,各药物干预组脑组织缺血皮质区Occludin、Claudin-5蛋白表达均有所上调,差异有统计学意义(P<0.05),其中以依达拉奉组和健脾补土方高剂量组最为显著;(4)与模型组比较,各药物干预组脑缺血皮质组织p-BAD、Bcl-2蛋白表达均明显增加,Caspase-3蛋白表达有所降低(P<0.05),其中依达拉奉组与健脾补土方高剂量组最为显著。结论健脾补土方可能通过上调p-BAD、Bcl-2、Claudin-5、Occludin蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,从而改善脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损症状及脑组织病理改变,进而促进缺血脑组织损伤修复。
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关键词
脑缺血再灌注
健脾补土方
磷酸化相关死亡启动因子
B淋巴细胞瘤-2基因
半胱氨酸蛋白酶-3
紧密连接蛋白-5
闭合蛋白
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职称材料
基于神经细胞外基质探讨健脾补土方抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡机制
被引量:
1
2
作者
刘祎
刘旺华
+1 位作者
李花
彭智远
《中医药信息》
2022年第11期14-20,共7页
目的:探讨健脾补土方通过调控神经细胞外基质抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方低剂量组、健脾补土方中剂量组和健脾补土方高剂量组。采用线栓法制备大鼠右...
目的:探讨健脾补土方通过调控神经细胞外基质抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方低剂量组、健脾补土方中剂量组和健脾补土方高剂量组。采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注7 d。对神经功能缺损进行评分;原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白(FN、LN)的表达;采用蛋白质印迹法检测凋亡因子(Bcl-2、Bax)的表达;实时荧光定量PCR检测Caspase-3 mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组神经功能缺损评分、神经细胞AI、Bax和Caspase-3表达显著增加(P<0.01),LN、FN和Bcl-2表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,健脾补土方各剂量组神经功能缺损评分、神经细胞AI、Bax和Caspase-3表达水平显著降低(P<0.05),LN、FN和Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。结论:健脾补土方能有效改善脑缺血再灌注损伤,其机制可能与调控FN、LN表达,稳定神经细胞ECM,抑制神经细胞失巢凋亡有关。
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关键词
健脾补土方
脑缺血再灌注
神经细胞外基质
失巢凋亡
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职称材料
题名
健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧皮质Claudin-5、Occludin、p-BAD、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响
1
作者
陈佳敏
李花
刘旺华
陈岩岩
陈心豪
机构
湖南中医药大学
湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室
湖南中医药大学数字中医药协同创新中心
出处
《环球中医药》
CAS
2023年第4期653-660,共8页
基金
国家自然科学基金(81473567)
湖南省中医药科研计划重点项目(2021013,A2023038)
湖南省高校创新平台开放基金(20K097)。
文摘
目的探讨健脾补土方减轻脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的可能作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组10只、手术组70只,手术组经模型制备后评价,剔除不成功的及死亡大鼠,二次分组,分为模型组、依达拉奉组、健脾补土方高、中、低剂量组,每组各13只。手术组采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),干预7天,取材。取材前每组选取10只,采用国际公认的大鼠脑卒中后神经功能缺损评分法(mNss评分)进行神经功能缺损评分。取材部位为缺血侧脑皮质组织。每组随机选取3只采用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察病理形态改变;每组随机选取其中5只采用Western blot法检测紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、闭合蛋白(Occludin)表达量;剩余5只采用免疫组化法检测磷酸化相关死亡启动因子(phospho-Bcl-xL/Bcl-2 asociated death promoter,p-BAD)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达量。结果(1)造模后,与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显上升,经药物干预后,各组神经功能缺损评分均有所下降(P<0.05),其中以依达拉奉组与健脾补土方高剂量组下降最为明显;(2)造模后,模型组大鼠较假手术组病理改变严重,出现组织大片坏死,经药物干预后,各组病理改变均有所改善,依达拉奉组和健脾补土方高剂量组尤为明显;(3)与模型组比较,各药物干预组脑组织缺血皮质区Occludin、Claudin-5蛋白表达均有所上调,差异有统计学意义(P<0.05),其中以依达拉奉组和健脾补土方高剂量组最为显著;(4)与模型组比较,各药物干预组脑缺血皮质组织p-BAD、Bcl-2蛋白表达均明显增加,Caspase-3蛋白表达有所降低(P<0.05),其中依达拉奉组与健脾补土方高剂量组最为显著。结论健脾补土方可能通过上调p-BAD、Bcl-2、Claudin-5、Occludin蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,从而改善脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损症状及脑组织病理改变,进而促进缺血脑组织损伤修复。
关键词
脑缺血再灌注
健脾补土方
磷酸化相关死亡启动因子
B淋巴细胞瘤-2基因
半胱氨酸蛋白酶-3
紧密连接蛋白-5
闭合蛋白
Keywords
Cerebral ischemia reperfusion
Spleen-strengthening decoction
Phosphorylation-related death initiation factor
B cell lymphocyte-2 gene
Cysteine protease-3
Tight junction protein-5
Closed protein
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
基于神经细胞外基质探讨健脾补土方抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡机制
被引量:
1
2
作者
刘祎
刘旺华
李花
彭智远
机构
湖南中医药大学中医学国内一流建设学科
湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室
湖南中医药大学中医心肺病证辨证与药膳食疗重点研究室
出处
《中医药信息》
2022年第11期14-20,共7页
基金
湖南省自然科学基金项目(2019JJ40219)
湖南省教育厅科研重点项目(18A208)
+1 种基金
湖南省中医药科研计划课题项目(202008,2021013)
湖南省高校创新平台开放基金项目(20K097)。
文摘
目的:探讨健脾补土方通过调控神经细胞外基质抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方低剂量组、健脾补土方中剂量组和健脾补土方高剂量组。采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注7 d。对神经功能缺损进行评分;原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白(FN、LN)的表达;采用蛋白质印迹法检测凋亡因子(Bcl-2、Bax)的表达;实时荧光定量PCR检测Caspase-3 mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组神经功能缺损评分、神经细胞AI、Bax和Caspase-3表达显著增加(P<0.01),LN、FN和Bcl-2表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,健脾补土方各剂量组神经功能缺损评分、神经细胞AI、Bax和Caspase-3表达水平显著降低(P<0.05),LN、FN和Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。结论:健脾补土方能有效改善脑缺血再灌注损伤,其机制可能与调控FN、LN表达,稳定神经细胞ECM,抑制神经细胞失巢凋亡有关。
关键词
健脾补土方
脑缺血再灌注
神经细胞外基质
失巢凋亡
Keywords
Jianpi Butu Formula
Cerebral ischemia-reperfusion
Extracellular matrix of neurocytes
Anoikis and apoptosis
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
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健脾补土方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧皮质Claudin-5、Occludin、p-BAD、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响
陈佳敏
李花
刘旺华
陈岩岩
陈心豪
《环球中医药》
CAS
2023
0
下载PDF
职称材料
2
基于神经细胞外基质探讨健脾补土方抗大鼠脑缺血再灌注神经细胞失巢凋亡机制
刘祎
刘旺华
李花
彭智远
《中医药信息》
2022
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