健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响

目的观察健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠t-PA、PAI-1、ColⅣ的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组,每组12只。采用线栓法制备MCAO模型,治疗7 d后处死,并在大鼠处死前进行神经功能缺损评分,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及组织型纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的变化,运用免疫组化法测定胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的含量变化。结果与模型组相比,健脾补土小、中、大剂量组神经功能缺损症状评分减少(P<0.05);健脾补土方小、中、大剂量组t-PA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中、大剂量组PAI-1表达明显升高(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中剂量组Col IV表达明显升高(P<0.05)。结论健脾补土法组方能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠神经缺损,可能与其下调t-PA及上调PAI-1的表达,从而减少细胞外基质(ECM)的降解,上调ColⅣ的表达有关。

健脾补土法组方含药血清对体外嗅鞘细胞低氧/复氧损伤模型P65、P50及磷酸化IκBα表达的影响

目的探讨健脾补土法组方含药血清对体外嗅鞘细胞低氧/复氧损伤模型核因子KB(nuclear factor-kappa B,NFKB)的亚单位P65、P50及NF-KB抑制蛋白(P-IκBα)表达的影响。方法将原代培养的嗅鞘细胞分为5组:正常血清对照组、正常血清+低氧组、低氧+依达拉奉含药血清组、低氧+健脾补土法组方含药血清组、正常血清+低氧+NF-KB抑制剂/抗氧化剂(PDTC,50μmol/L)组,采用微需氧袋低氧/复氧的方法诱导嗅鞘细胞形成脑缺血再灌注损伤样模型,用Western blot法检测嗅鞘细胞胞浆P65、P50、P-IκBα和胞核P65、P50的含量。结果与正常血清对照组比较,正常血清+低氧组胞浆和胞核P65、P50,胞浆P-IκBα表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与正常血清+低氧组比较,低氧+依达拉奉组、低氧+健脾补土组、正常血清+低氧+PDTC组、低氧+健脾补土+PDTC组胞浆和胞核P65、P50,胞浆P-IκBα表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健脾补土法组方能通过抑制嗅鞘细胞缺氧/复氧损伤后P65、P50、P-IκBα的过度表达,对NF-κB通路的活化具有抑制作用。

健脾补土法组方对脑缺血/再灌注大鼠脑组织INTβ_3、ILK及FAK mRNA及蛋白表达的影响

目的研究健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠测定整合素β3(INTβ_3)、ILK、FAK mRNA及蛋白的表达影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组6小组,每组6只。采用线栓法制备MCAO模型,7天后处死,应用RT-PCR法测定缺血再灌注后缺血区脑皮质内INTβ_3、ILK、FAK mRNA的表达的含量变化及运用健脾补土法组方对其含量的影响,Western blot法检测其蛋白含量变化。结果模型组与假手术组相比,模型组INTβ_3、ILK、FAK蛋白以及mRNA含量显著减少(P<0.01);与模型组比较,依达拉奉组、健脾补土小剂量、健脾补土中剂量组、健脾补土大剂量组整合素β3、ILK、FAK蛋白以及mRNA含量增加,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论健脾补土法组方脑保护作用可能与促进INTβ_3、ILK、FAK表达有关。

健脾补土法对脑缺血再灌注大鼠脑组织MMP-2的表达及血脑屏障通透性的影响

目的:观察健脾补土法组方对脑缺血再灌注(I/R)大鼠脑组织基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达及血脑屏障通透性的影响。方法:将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、健脾补土小剂量组、健脾补土大剂量组、依达拉奉组,除假手术组外,其余组小鼠均运用大脑中动脉栓塞再通法建立脑I/R模型。在造模前3d用相应药物对各组小鼠进行灌胃或腹腔注射。造模完成后对其进行神经功能评分、检测血脑屏障通透性及脑组织MMP-2的表达。结果:与模型组比较,健脾补土法各组治疗大鼠的神经功能评分均有改善,血脑屏障通透性降低,MMP-2的表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论:健脾补土法保护血脑屏障可能与其抑制MMP-2表达有关。

李云英健脾益气补土法治疗脓耳经验

李云英教授认为脾虚清阳不升,浊阴上干,耳窍失养而功能失司,以致耳部病变为脓耳重要病因病机。李师从健脾益气补土法方面论治脓耳,治疗时注重中医为体,辨证论治,遣方用药,进而有效治疗脓耳及延缓疾病发展。

健脾补土方对脑缺血/再灌注损伤大鼠NF-κB和IκBα蛋白表达水平的影响

目的通过观察健脾补土方对脑缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠脑组织核因子-κB(NF-κB)和NF-κB抑制蛋白α(Iκ-Bα)表达的影响,探讨健脾补土方对脑保护作用的部分机制。方法将120只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉组,健脾补土方小、中、大剂量组,每组20只。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,治疗7 d,治疗前后行神经功能缺损评分,应用HE染色观察大脑皮质区细胞的形态学改变;采用Western blot法检测大脑皮质内NF-κB和IκBα蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分、NF-κB/p65蛋白的表达显著增加(P<0.01);IκBα蛋白的表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,健脾补土方治疗组神经功能缺损评分、NF-κB/p65蛋白的表达均明显减少(P<0.05或P<0.01),IκBα蛋白的表达均明显增加(P<0.05或P<0.01)。结论健脾补土方可能通过抑制脑组织NF-κB的表达,促进IκBα的表达,从而改善I/R损伤大鼠神经功能缺损,对I/R损伤起保护作用。

论神经细胞外基质与中医脾土相关及其对脑缺血保护的启示

缺血性卒中具有发病率高、致残率高、病死率高的“三高”特点,是威胁人类尤其是中老年人健康的常见病、多发病。在联合国世界卫生组织调查的57个国家中死于脑血管病者占11.3%,其中40个国家脑血管病占死因前3位。我国卫生部卫生统计信息中心《2006年中国卫生事业发展情况统计公报》显示，脑血管病的死亡率为105．5／10万，居死亡原因第2位。