疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法对女性尖锐湿疣患者HPV病毒载量及免疫调节的作用

目的观察疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法对女性尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)病毒载量、免疫调节的作用。方法选取2022年3月—2022年10月收治的108例女性尖锐湿疣,随机数字表法分为2组,每组54例。2组均采取常规基础治疗,对照组配合光动力疗法,观察组配合疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法,疗程3个月。观察2组临床疗效、HPV病毒载量、转阴率、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-10、T淋巴细胞亚群、MyD88信号通路蛋白表达[白细胞介素-1受体相关激酶-1(IRAK1)、IRAK4、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)]、女性性功能指数(FSFI)、尖锐湿疣生活质量评定量表(CECA10)评分及随访3个月复发情况。结果观察组总有效率96.30%(52/54)高于对照组81.48%(44/54)(P<0.05)。治疗1、3个月后,观察组HPV病毒载量、血清IL-10水平以及IRAK1、TRAF6、IRAK4表达量低于对照组,转阴率、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、血清IFN-γ和IL-2水平以及FSFI、CECA10评分高于对照组(P<0.05)。观察组复发率9.26%(5/54)低于对照组27.78%(15/54)(P<0.05)。结论疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法对女性尖锐湿疣疗效显著,能降低HPV病毒载量,提高转阴率,抑制炎症反应及MyD88信号通路蛋白表达,调控机体免疫功能,阻断病情进展及复发。

健脾解毒方通过Hippo信号通路抑制大肠癌上皮间质转化的机制研究

目的探讨健脾解毒方对大肠癌转移能力和上皮间质转化(EMT)的影响及可能的作用机制。方法①采用细胞活力检测(CCK-8)法观察不同浓度健脾解毒方对人肠癌细胞生长的抑制作用;分别采用Transwell实验和划痕愈合实验检测健脾解毒方对肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测健脾解毒方对细胞中EMT和Hippo信号通路相关蛋白表达的影响。②采用肠癌肺转移模型体内验证健脾解毒方对肠癌肺转移的影响及对Hippo信号通路的影响,使用苏木精-伊红(HE)染色检测肺转移灶转移情况,采用免疫组织化学法检测肺转移灶中Yes相关蛋白(YAP)的表达。③使用小分子抑制剂(XMU-MP-1)干预Hippo信号通路后,Transwell实验、划痕实验和Western blot法检测健脾解毒方对肠癌细胞侵袭转移和EMT的影响。结果①健脾解毒方以剂量和时间依赖性方式抑制人肠癌细胞的生长。与对照组比较,健脾解毒方能够明显抑制人肠癌细胞的侵袭和迁移能力(P<0.05),同时健脾解毒方能够抑制肠癌细胞EMT进程;进一步研究显示健脾解毒方可以促进Hippo信号通路的激活,减少YAP入核。②体内实验的肺转移灶HE染色结果显示,健脾解毒方可以抑制肠癌肺转移灶的体积,免疫组织化学检测提示健脾解毒方可以减少转移灶中YAP的表达。③使用XMU-MP-1抑制Hippo信号通路能够增加YAP在细胞核内的积累,促进肠癌细胞的侵袭迁移能力及EMT相关蛋白的表达,促进肠癌转移;健脾解毒方可以显著减少小分子抑制剂组肠癌细胞侵袭迁移能力以及EMT的进程。结论健脾解毒方能够抑制人肠癌细胞的转移能力,其作用机制与激活Hippo信号通路有关。

健脾解毒方对结直肠癌术后脾虚证疗效、免疫功能及肠道微生态的影响

目的 研究健脾解毒方对结直肠癌术后脾虚证疗效、免疫功能及肠道微生态的影响。方法 选取2018年10月-2022年10月本院收治的结直肠癌术后脾虚证患者114例,术后均采用改良型FOLFOX6方案化疗,以随机法分为常规组(常规西药治疗)、联合组(常规西药治疗联合健脾解毒方),各57例。检测中医证候积分、临床疗效、肠道微生态、免疫功能、生存质量及不良反应。结果 联合组临床总有效率、卡氏功能状态量表(KPS)评分升高率、疼痛减轻率及体质量增加率高于常规组(P <0.05)。治疗后,2组中医证候积分、肠道大肠杆菌数量、肠球菌数量、血清白介素-10(IL-10)水平降低(P <0.05),乳酸杆菌数量增加(P <0.05),自然杀伤(NK)细胞活性增强(P <0.05),血清干扰素-γ(IFN-γ)水平升高(P <0.05),以联合组更明显(P <0.05)。联合组3~4度白细胞减少、中性粒细胞减少及呕吐发生率低于常规组(P <0.05),但转氨酶升高、乏力、皮肤感染、脱发、出血发生率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 健脾解毒方可改善结直肠癌术后脾虚证患者治疗效果、肠道微生态及生存质量,增强免疫功能,且可减少化疗所致的不良反应。

共享决策理论干预联合健脾解毒方治疗淋巴细胞白血病及对生活质量的影响

目的分析探讨共享决策理论干预联合健脾解毒方治疗淋巴细胞白血病及对生活质量的影响。方法按照随机对照法选取2020年6月—2022年6月医院收治的84例淋巴细胞白血病分为对照组、观察组,各42例。对照组以健脾解毒方治疗,观察组增加共享决策理论干预。评估对比较患者的决策困境程度、自我效能感、治疗依从性、生活质量评分。结果观察组决策困境量表(DCS)各项评分均低于对照组(P<0.05)。治疗干预后,观察组自我效能感量表(GSES)评分包括症状管理、共性管理和总分均高于对照组(P<0.05)。观察组依从性比例均高于对照组(P<0.05)。干预后,观察组生活质量综合评定问卷(GQOLI-74)评分包括身体功能、心理功能、社会功能、和物质生活状态均高于对照组(P<0.05)。结论共享决策理论干预联合健脾解毒方治疗淋巴细胞白血病效果良好,可减轻患者的决策困境,提高患者自我效能和治疗依从性,改善患者生活质量。

中药健脾解毒方联合化疗对高危弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床疗效

目的探讨中药健脾解毒方联合化疗对高危弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床疗效。方法选取南阳市中医院2020年1月至2022年10月收治的80例高危弥漫大B细胞淋巴瘤患者,根据建档顺序分为对照组和观察组,各40例。对照组患者接受R-CHOP化疗方案治疗,观察组患者在对照组基础上加用健脾解毒方。比较两组患者疗效、中医症状持续时间、免疫功能、炎症反应水平以及不良反应发生率。结果两组患者客观缓解率及疾病控制率相比,观察组患者均较高(P<0.05);治疗后,两组患者各中医症状持续时间相比,观察组均较短(P<0.05);治疗后,两组患者免疫功能均有所提高,且观察组免疫功能较强(P<0.05);治疗后,两组血清白细胞介素-2(IL-2)水平均升高,且观察组较高;两组血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平均降低,且观察组较低(P<0.05);两组总不良反应发生率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药健脾解毒方联合化疗可通过调节高危弥漫大B细胞淋巴瘤患者免疫球蛋白、炎症细胞因子水平,从而提高患者的临床疗效。

健脾解毒方联合FOLFOX4方案治疗晚期结直肠癌临床研究

目的观察健脾解毒方联合FOLFOX4方案治疗晚期结直肠癌的疗效和不良反应。方法将42例患者随机分为2组,研究组21例,采用健脾解毒方联合FOLFOX4方案化疗,对照组21例,单纯FOLFOX4方案化疗。比较两组近期疗效、临床受益反应以及毒副反应。结果近期有效率研究组为47.6%,对照组为35.0%,两组有效率及中位肿瘤进展时间比较无统计学意义(P>0.05);两组中位生存时间及1年生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组临床受益率为85.7%。对照组为55.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。研究组白细胞降低、神经毒性、乏力等毒副反应明显低于对照组(P<0.05)。结论健脾解毒方对晚期结直肠癌FOL-FOX4方案化疗有增加近期疗效、提高生活质量、减少不良反应的作用。

健脾解毒方对幽门螺杆菌诱发胃癌过程微血管密度及环氧合酶表达的影响

目的探讨健脾解毒方在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌过程中对微血管密度(microvessel density,MVD)和环氧合酶-2(COX-2)的调控作用,为其治疗H.pylori相关性胃病提供实验依据。方法用H.pylori标准株悉尼株(H.pyloriSS1)灌胃的方法建立H.pylori感染C57BL/6小鼠诱发胃癌动物模型,分为对照组、模型组、健脾解毒方低剂量组和健脾解毒方高剂量组,每组40只小鼠。给药72周后处死小鼠,免疫组化法检测各组小鼠胃黏膜MVD的变化;实时荧光定量PCR法和免疫组化法检测各组小鼠胃黏膜COX-2mRNA和蛋白的表达。结果对照组、模型组、健脾解毒方低、高剂量组胃癌的发生率分别为0、22.2%、11.1%和10.0%;胃黏膜MVD分别为(2.50±1.54)、(18.56±2.62)、(14.61±3.60)和(7.39±1.75)个/cm2,模型组MVD较对照组明显增高(P<0.01),健脾解毒方低、高剂量组MVD显著降低(P<0.01)。模型组COX-2mRNA和蛋白表达较对照组均明显增加(P<0.01);健脾解毒方低、高剂量组均可降低其表达,并呈现剂量依赖关系。结论 H.pylori感染可增加C57BL/6小鼠胃黏膜MVD,促进COX-2的表达,可能在H.pylori诱导的胃癌发生中起到促进作用;健脾解毒方可减少小鼠胃黏膜MVD,抑制COX-2的表达,这可能是其防治胃癌的重要机制之一。

健脾解毒方介导p38MAPK/ATF-2信号通路抑制幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞COX-2表达

目的探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染人胃癌MKN45细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达及其p38MAPK信号通路的调控机制。方法采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)和Westernblot检测Hp标准株NCTC11637感染对人胃癌MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达的影响及健脾解毒方药物血清的调控作用;运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察Hp对MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达的影响;观察健脾解毒方对Hp感染激活的p38MAPK信号通路及其下游活化转录调控因子2(activating transcription factor2,ATF-2)表达的影响。结果 Hp感染人胃癌MKN45细胞后,COX-2 mRNA和蛋白表达均明显高于空白对照组(P<0·01)。阻断p38MAPK信号通路后,Hp诱导的MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0·01);健脾解毒方药物血清以剂量依赖的方式下调Hp诱导的MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达,并能够抑制Hp诱导的p38MAPK信号通路的活化,且对p38MAPK下游转录因子ATF-2的活性有明显的抑制作用。结论 Hp感染通过p38MAPK信号通路诱导胃癌细胞COX-2表达。健脾解毒方通过调控p38MAPK/ATF-2信号转导通路,抑制Hp诱导的COX-2表达,可能是其防治Hp诱发胃癌的机制之一。

健脾解毒方逆转大肠癌细胞多药耐药的作用机制

目的探讨中医健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药(MDR)的机制。方法采用细胞生长抑制实验观察长春新碱在健脾解毒方治疗前后对大肠癌耐药细胞株(HCT-8/V)敏感性的改变,实时荧光定量PCR及Western blot方法观察健脾解毒方对大肠癌细胞Akt磷酸化程度及MDR1基因表达的影响。结果健脾解毒方药物血清与大肠癌细胞培养24、48、72 h后,长春新碱对细胞的生长抑制率分别为5.9%、11.0%、15.0%,明显高于空白对照组(P均<0.05),其抑制作用与健脾解毒方的药物血清浓度及作用时间呈正相关。健脾解毒方血清能有效降低HCT-8/V中MDR-1的蛋白及mRNA表达(P<0.05);健脾解毒方逆转MDR-1的表达与其所致的细胞内Akt磷酸化水平下降呈正相关,与长春新碱敏感性提高呈线性负相关。健脾解毒方血清与PI3K抑制剂LY294002联用能协同降低HCT-8/V中MDR-1的表达水平和细胞内Akt磷酸化程度,较单用更能增加长春新碱的敏感性。结论健脾解毒方能有效减低耐药肿瘤细胞内Akt磷酸化,从而降低PI3K/Akt信号通路活性,后者进一步导致MDR1表达下降,从而增加长春新碱对大肠癌细胞的敏感性。

健脾解毒方联合化疗治疗大肠癌术后患者的临床观察

目的观察健脾解毒方联合化疗治疗II-III期大肠癌术后患者的临床疗效及其对免疫功能的影响。方法将40例大肠癌患者按随机数字表法分为治疗组、对照组各20例。两组患者化疗均采用FOLFOX4化疗方案,治疗组加服健脾解毒方汤剂(每日1剂,连服8周),化疗每2周重复1次,1次为1个周期,连用4个周期后观察两组临床疗效及其免疫功能的变化。结果治疗结束后治疗组中医证候改善的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的中医证候总积分均较治疗前有所改善,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗后治疗组在KPS评分疗效及体质量增加方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在免疫学指标CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值改善方面优于对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论健脾解毒方能提高大肠癌化疗患者的临床疗效,改善生活质量,并增强机体免疫力。

健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用

目的:观察健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用,并初步探讨其作用机理。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),观察各组抑瘤率、裸鼠体重及生存期;采用MTT法检测治疗后移植瘤肿瘤细胞耐药性的变化。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍。(2)治疗后,健脾解毒方组和联合用药组体重较对照组增加(P<0.05)。(3)健脾解毒方组和联合用药组中位生存期长于对照组和奥沙利铂组(P<0.05)。(4)奥沙利铂组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的耐药指数分别为7.59、4.28、5.78和4.50;联合用药组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的逆转指数分别为6.57、2.61、4.97和3.10。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与健脾解毒方部分逆转移植瘤对奥沙利铂的耐药性有关。

健脾解毒方含药血清通过mTOR信号通路抑制人大肠癌SW48细胞增殖

目的:研究健脾解毒方含药血清对人大肠癌SW48细胞增殖的影响及作用机制。方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方粗提取物的主要活性成分,利用血清药理学方法制备低、中、高浓度健脾解毒方含药血清,MTT法检测人结肠癌SW48细胞增殖活性,运用流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR技术检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)m RNA表达,Western印迹技术检测磷酸化(phospho,P)-m TOR,P-P53和P21的蛋白表达。结果:通过高分辨质谱结合对照品数据相关分析,对健脾解毒方粗提取物中7个主要成分(毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸、芹菜素、白术内酯II)进行了鉴定及分析;健脾解毒方中、高剂量含药血清对SW48细胞有明显抑制增殖作用;健脾解毒方中、高剂量含药血清使SW48细胞周期阻滞在G1期;健脾解毒方含药血清能够下调的m TOR m RNA及P-m TOR蛋白表达,上调P-P53和P21蛋白的表达。结论:健脾解毒方可能通过m TOR-P53-P21途径抑制人结肠癌SW48细胞的增殖,这可能是健脾解毒方治疗结肠癌的作用机制之一。

疏肝健脾解毒方治疗肝郁脾虚型HBeAg阳性慢性HBV携带者168例的临床疗效

目的观察中医治疗肝郁脾虚型HBeAg阳性的慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的临床疗效。方法选择HBeAg和HBV DNA阳性,1年内连续随访3次以上均显示血清ALT和AST在正常范围,伴有不同程度症状的患者。根据中医辨证为肝郁脾虚型者作为治疗对象,以方剂疏肝健脾解毒方为主要治疗药物。治疗后6个月观察临床症状和病毒标志物的变化,并观察停药后3个月以评估疗效的持久性。共入组患者348例,其中161例纳入对照组,187例纳入治疗组。治疗组采用方剂疏肝健脾解毒方中医治疗。结果治疗组完成治疗168例,总有效率80.3%(135/168),HBeAg转阴6例,HBV DNA下降大于或等于2个对数级14例;停药观察3个月157例,总有效率80.9%(127/157),HBeAg转阴4例,HBV DNA下降大于或等于2个对数级11例,疗效高于对照组(P<0.05)。结论中医疏肝健脾解毒方治疗肝郁脾虚型HBeAg阳性慢性HBV携带者疗效确切,症状改善明显。

健脾解毒方联合经皮肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌疗效观察

目的观察健脾解毒方联合经皮肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗原发性肝癌患者的临床疗效。方法将66例患者按平行对照研究方法,分为治疗组34例和对照组32例,两组患者在性别、年龄、病情方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组使用TACE术及对症治疗,治疗组在对照组治疗基础上联合口服中药健脾解毒方,并随症加减。两组均治疗3个月后观察患者临床症状、疗效、KPS积分、肝功能及甲胎蛋白(AFP)指标。结果两组中医症状、肝功能、AFP方面与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗组在中医症状、KPS积分、γ-GT、AFP方面的疗效明显优于对照组(P<0.01),在证候疗效、ALB、AKP方面的改善与对照组比较,亦有统计学差异(P<0.05)。结论健脾解毒方联合TACE术治疗肝癌,在改善症状、提高生活质量以及对肝功能、AFP等指标影响方面有显著优势。

健脾解毒方延长脾虚肝癌大鼠带瘤生存与MHCⅠ/MHCⅡ的关系

目的:探讨健脾解毒方延长脾虚肝癌模型大鼠带瘤生存及与MHCⅠ/MHCⅡ的关系。方法:105只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、肝癌模型组、脾虚模型组、脾虚肝癌模型组、胸腺五肽组及健脾解毒方低、高剂量组,进行造模和干预。实验中记录动物的体质量、生存时间、肝癌大鼠濒死状态时恶液质积分并采集标本。免疫组化与Western blot方法检测大鼠肝组织及肝癌组织MHCⅠ/MHCⅡ分子表达。结果:健脾解毒方高剂量组和胸腺五肽组累积生存率高于其余各组(P<0.05),且其恶液质评分低于其余各组(P<0.05)。各造模组中,MHCⅠ分子在肝组织中的表达水平高于癌组织,肝组织和癌组织中均以健脾解毒方高剂量组表达最强(P<0.01)。MHCⅡ分子在癌组织表达强于肝组织,肝组织中以健脾解毒方高剂量组表达最强(P<0.01),癌组织中以脾虚肝癌组表达最强(P<0.01)。结论:健脾解毒方能对抗移植瘤导致的恶液质的发生和进展,显著延长荷瘤鼠的生存时间,其作用可能与上调MHCⅠ/MHCⅡ有关。

健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药基因的研究

目的从分子生物学的角度探讨健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药基因的作用机制,为中医健脾解毒法治疗大肠癌提供理论依据。方法应用健脾解毒方药对SD大鼠进行灌胃,采集动脉血制备健脾解毒方药物血清,在体外培养人结肠直肠腺癌耐长春新碱细胞HCT-8/V,分别加入培养液配制的5%、10%、15%、20%健脾解毒方药物血清,采用MTT方法检测各组HCT-8/V细胞生长抑制率。结果健脾解毒方药物血清对HCT-8/V细胞有抑制作用,随浓度升高、时间延长,其抑制作用增强,呈剂量和时间效应关系。20%的药物血清和VCR在24、48、72 h对肿瘤细胞的生长抑制率均有统计学差异(P<0.01),随作用时间延长,对肿瘤细胞的杀伤作用明显增强。结论健脾解毒方可逆转大肠癌多药耐药基因,并伴随相关基因的调控。

加味健脾解毒方抗小鼠腹水肝癌恶液质模型的机制研究

目的:探索加味健脾解毒方对腹水型肝癌小鼠恶病质及IL-1a、IL-6、TNF-a和泛素蛋白酶体途径的作用。方法:60只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组,荷瘤模型组,中药低浓度组、中药高浓度组、醋酸甲羟孕酮联合吲哚美辛组5组。H22肝癌细胞株腹腔注射建立小鼠腹水型肝癌恶病质模型,记录小鼠体质量、摄食量、腓肠肌重量等恶液质指标;检测腹水IL-1a、IL-6、TNF-a水平;检测腓肠肌Mu-RF1、Atrogin1蛋白及mRNA表达。结果:与模型组比,高、低浓度加味健脾解毒方明显减缓小鼠体质量及腹水增长(P<0.05),降低小鼠腓肠肌消耗(P<0.01),提高去腹水体质量(P<0.01)和摄食量(P<0.05);降低腹水IL-1a、IL-6、TNF-a水平(P<0.01);降低Mu-RF1、Atrogin1蛋白及mRNA表达(P<0.01)。上述指标高浓度中药优于低浓度中药(P<0.05);高浓度中药与醋酸甲羟孕酮联合吲哚美辛组相当(P>0.05)。腹水量和肝脏指数高浓度中药优于醋酸甲羟孕酮联合吲哚美辛组(P<0.05)。结论:加味健脾解毒方可延缓腹水肝癌小鼠的恶病质进展,可能与其降低IL-1、IL-6、TNF-a水平及抑制泛素蛋白酶体途径过度激活有关。

健脾解毒方对脾虚证荷瘤小鼠肠道菌群的调节作用

目的探讨健脾解毒方对脾虚荷瘤鼠移植瘤的抑制作用、对脾虚小鼠肠道菌群的调节作用及两者之间的相关性。方法 48只小鼠随机取36只,利用番泻叶水煎剂成功制备脾虚模型,剩余12只为N.S.组,再使用CT26细胞构建移植瘤模型。36只脾虚模型小鼠则随机分为脾虚组、健脾解毒方低剂量组、健脾解毒方高剂量组,每组12只。连续灌胃给药4周后脱颈椎处死各组小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率;计算胸腺指数和脾指数;流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+T细胞比例,ELISA法检测血清中IL-17水平;16S rRNA基因测序法检测肠道菌群多样性。结果脾虚组平均瘤重、血清IL-17水平高于N.S.组和健脾解毒方低、高剂量组,同时脾虚组胸腺指数、脾指数、外周血CD4^+T细胞比例、CD4^+/CD8^+比值低于N.S.组和健脾解毒方低、高剂量组,差异均有统计学意义(P<0.01);且脾虚组小鼠肠道菌群中拟杆菌门显著增多、厚壁菌门显著减少,存在明显的菌群失调现象。与N.S.组及健脾解毒方低、高剂量组比较,脾虚组小鼠肠道中双歧杆菌及乳杆菌减少,而肠杆菌及肠球菌增多。结论健脾解毒方具有抑制脾虚荷瘤鼠皮下瘤生长、提高CD4^+/CD8^+比例、减少炎症因子IL-17分泌的作用,这些作用可能与其改善脾虚小鼠的肠道菌群失调相关。

健脾解毒方对大肠癌肿瘤血管形成相关基因表达的影响

目的:探讨健脾解毒方对大肠癌肿瘤血管形成相关基因表达的影响。方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,MTT法检测健脾解毒方粗提取物对大肠癌HT29细胞增殖的影响,Graph Pad Prism 5软件计算IC50(50%inhibitory concentration)值,Affymetrix基因表达谱芯片检测健脾解毒方干预后有显著差异表达的基因并进行路径富集分析,基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路利用IPA(Ingenuity Pathway Analysis)软件对肿瘤血管形成的相关差异表达基因进行生物信息学分析并构建网路关系图,Western印迹法验证肿瘤血管形成相关差异表达的关键基因的蛋白表达水平。结果:健脾解毒方粗提取物能够抑制大肠癌HT29细胞增殖,处理24,48及72 h后的IC50值分别为13.060,9.646及8.448 mg/m L。Affymetrix基因表达谱芯片检测健脾解毒方干预后显著上调的基因218个,显著下调的基因252个,主要为生物合成、新陈代谢、细胞凋亡、抗原提取、血管生成等相关基因,其中肿瘤血管形成相关差异表达基因12个。IPA软件分析结果显示健脾解毒方干预后可使大肠癌中的鞘磷脂磷酸二酯酶3(sphingomyelin phosphodiesterase 3,SMPD3),VEGF,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA),整合数α亚基1(integrin subunit alpha 1,ITGA1),组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB),组织蛋白酶S(cathepsin S,CTSS)等基因下调,GRB2相关结合蛋白2(GRB2 associated binding protein 2,GAB2),PLAUR(plasminogen activator,urokinase receptor)等基因上调。Western印迹检测显示健脾解毒方能明显下调磷酸化mTOR(phospho-mTOR,P-mTOR),信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3),缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和VEGF蛋白表达,明显上调磷酸化P53(phospho-P53,P-P53)蛋白表达。结论:健脾解毒方可能通过影响mTOR-HIF-1α-VEGF信号通路抑制大肠癌肿瘤血管形成,这可能是健脾解毒方治疗大肠癌的作用机制之一。

补肾解毒方与健脾解毒方含药血浆对慢性乙肝病毒感染不同免疫状态患者外周血树突状细胞功能的影响

目的比较补肾解毒方和健脾解毒方对慢性乙肝病毒(HBV)感染不同免疫状态患者外周血树突状细胞(DCs)功能的影响。方法选择36例湖南中医药大学第一附属医院2010年4月—2011年1月门诊慢性HBV感染患者,根据患者免疫状态分为免疫耐受组(18例)、免疫清除组(18例),另选择10名健康人作健康组。分别采集抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),进一步分离提取培养DCs,采用大鼠补肾解毒方和健脾解毒方含药血浆进行干预。对DCs进行形态学鉴定,并检测DCs表型CD1α、CD80、CD86、HLA-DR表达,观察DCs培养上清液干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的水平。结果免疫清除组患者干预前CD80低于健康组(P<0.05);免疫耐受组患者干预前CD80、CD86、HLA-DR均低于健康组;免疫耐受组与免疫清除组干预前IFN-α低于健康组(P<0.05),免疫耐受组患者干预前CD80、HLA-DR、IFN-α低于免疫清除组(P<0.05)。与本组干预前比较,各给药组CD80表达均升高(P<0.05)。免疫耐受组患者干预后CD80、HLA-DR高于免疫清除组同期,补肾解毒方组CD86高于免疫清除组同期,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾解毒方中剂量和健脾解毒方小剂量均能促进慢性HBV感染患者DCs功能的恢复,且补肾解毒方对慢性HBV感染免疫耐受期患者DCs功能的影响更为显著。