期刊文献+
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人修饰型降钙素和鼠酰胺化酶基因在昆虫细胞中的偶联表达 被引量:3
1
作者 杨冠珍 陈珍珍 +2 位作者 崔大敷 李伯良 吴祥甫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期20-24,共5页
人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C 端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmC... 人降钙素 (hCT)是 32氨基酸的多肽激素 ,C 端为α脯氨酰胺结构 ,具有调节体内钙、磷代谢等许多重要生理功能。用重组昆虫杆状病毒表达系统 ,偶联表达合成的人修饰型降钙素 (hmCT)基因与GST融合基因和大鼠酰胺化酶 (PAM)基因 ,再用抗hmCT或抗PAM抗体 ,既检测到由昆虫细胞表达的GSThmCT产物也检测到PAM产物。经GSH 琼脂糖凝胶亲和层析 ,分离纯化GSThmCT融合蛋白。 展开更多
关键词 人修饰型降钙素 鼠酰胺化酶基因 昆虫细胞 偶联表达 杆状病毒
下载PDF
T7 RNA聚合酶表达系统的真核化及其偶联表达系统的建立 被引量:1
2
作者 郑海学 靳野 +5 位作者 尹双辉 郭慧琛 尚佑军 白兴文 刘湘涛 谢庆阁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期947-952,共6页
为了使T7RNA聚合酶(T7RNAP)表达系统真核化,首先,利用两种方法建立能够表达T7RNAP的真核细胞:(1)共转染表达T7RNAP的真核表达重组质粒于靶细胞;(2)利用稳定表达T7RNAP的BHK-21细胞系。然后,将FMDV内部核糖体进入位点(IRES)序列和增强型... 为了使T7RNA聚合酶(T7RNAP)表达系统真核化,首先,利用两种方法建立能够表达T7RNAP的真核细胞:(1)共转染表达T7RNAP的真核表达重组质粒于靶细胞;(2)利用稳定表达T7RNAP的BHK-21细胞系。然后,将FMDV内部核糖体进入位点(IRES)序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因定向克隆进原核载体pET-40a-c(+)的T7启动子下游,得到的重组质粒pIERS-EGFP-E。用该质粒分别转染上述两种细胞,在紫外显微镜下都能够观察到绿色荧光,表明真核化的T7RNAP偶联表达系统建立。并利用流式细胞仪对偶联表达水平进行了分析。这为利用该系统真核高效表达外源蛋白奠定了坚实的基础。用实验证明了FMDV5′端含有IERS具有介导非帽依赖性的翻译的功能,为以IERS为基础的双顺反子表达系统的建立及深入研究IERS与相关蛋白的功能奠定了基础。T7RNAP偶联表达体系是一种良好的外源基因表达体系。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 IERS T7RNA聚合酶表达系统 偶联表达系统
下载PDF
蛋白质N端豆蔻酰化修饰的基因工程表达偶联加工系统
3
作者 段治军 陈长征 +2 位作者 杨新颖 李伯良 王德宝 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期15-21,共7页
对酵母NMT基因在大肠杆菌中表达进行较详细的研究,进而构建了复制子为p15A并含卡那霉素抗性基因的相容性表达质粒pKZMT,将其与表达质粒pCZmCα1共转化进大肠杆菌BL21(DE3)F′,进行双质粒表达偶联加工修... 对酵母NMT基因在大肠杆菌中表达进行较详细的研究,进而构建了复制子为p15A并含卡那霉素抗性基因的相容性表达质粒pKZMT,将其与表达质粒pCZmCα1共转化进大肠杆菌BL21(DE3)F′,进行双质粒表达偶联加工修饰研究,其中pCZmCα1表达底物蛋白小鼠cAMP依赖的蛋白激酶催化亚基α(PKAmCα)。SDSPAGE及Westernblot分析表明,双质粒表达系统中,PKAmCα都得到了稳定的高表达,尤其在23℃低温诱导表达时,表达产物的可溶性部分明显增多;而酵母NMT被控制在有利于活性功能的可溶性低水平表达。[3H]myristicacid标记测定及放射自显影的结果显示,在大肠杆菌中表达的重组PKAmCα被豆蔻酰化修饰。 展开更多
关键词 蛋白质N端豆蔻酰化 PKAmCα 偶联表达 双质粒系统
下载PDF
In vivo gene expression profiling of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana elucidates its infection stratagems in Anopheles mosquito 被引量:5
4
作者 Yiling Lai Huan Chen +3 位作者 Ge Wei Guandong Wang Fang Li Sibao Wang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第8期839-851,共13页
The use of entomopathogenic fungi to control mosquitoes is a promising tool for reducing vector-borne disease transmission. To better understand infection stratagems of insect pathogenic fungi, we analyzed the global ... The use of entomopathogenic fungi to control mosquitoes is a promising tool for reducing vector-borne disease transmission. To better understand infection stratagems of insect pathogenic fungi, we analyzed the global gene expression profiling of Beauveria bassiana at 36, 60, 84 and 108 h after topical infection of Anopheles stephensi adult mosquitoes using RNA sequencing (RNA-Seq). A total of 5,354 differentially expressed genes (DEGs) are identified over the course of fungal infection. When the fungus grows on the mosquito cuticle, up-regulated DEGs include adhesion-related genes involved in cuticle attachment, Pthl l-like GPCRs hypothesized to be involved in host recognition, and extracellular enzymes involved in the degradation and penetration of the mosquito cuticle. Once in the mosquito hemocoel, the fungus evades mosquito immune system probably through up-regulating expression of 13-1,3-glucan degrading enzymes and chitin synthesis enzymes for remodeling of cell walls. Moreover, six previous unknown SSCP (small secreted cysteine-rich proteins) are significantly up-regulated, which may serve as "effectors" to suppress host defense responses. B. bassiana also induces large amounts of antioxidant genes to mitigate host-generated exogenous oxidative stress. At late stage of infection, B. bassiana activates a broad spectrum of genes including nutrient degrading enzymes, some transporters and metabolism pathway components, to exploit mosquito tissues and hemolymph as a nutrient source for hyphal growth. These findings establish an important framework of knowledge for further comprehensive elucidation of fungal pathogenesis and molecular mechanism of Beauveria-mosquito interactions. 展开更多
关键词 insect fungal pathogen fungus-insect interaction fungal pathogenesis RNA-SEQ vector control
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部