储脂细胞与肝纤维化

储脂细胞(Fat-storing cells,FSC)又称Ito氏细胞、脂质细胞,是在肝脏内发现的三种窦周细胞之一,其胞浆内有富含维生素A和甘油三酯的脂质小泡,它不仅具有储存、代谢维生素A的作用,而且能产生肝脏细胞外基质。在肝纤维化的发生、发展过程中起着重要作用。一、储脂细胞的作用(一)

肝细胞、胰岛细胞与储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响

目的:探讨肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响. 方法:采用改良胶原酶消化法分离获得大鼠肝细胞和储脂细胞,同时利用梯度离心分离胰岛细胞.分两组实验,肝细胞培养组(对照组),肝细胞用RPMI1640、胰岛素10-7mol/L、100 mL/L FBS及地塞米松10-8mol/L配成细胞悬液,2 mL 放入9 cm2培养瓶中连续培养15d(37℃50mL /L CO2).肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养组(实验组):将1×10-7/L 的储脂细胞2 mL先加入培养瓶中,培养条件及培养液同肝细胞培养组,培养48 h后弃上清后将肝细胞2×108/L2 mL 和胰岛细胞(100个)分别加入并观察肝细胞存活情况;全自动生化分析仪测定培养上清液中总蛋白及尿素氮的含量;两组细胞均在培养10 d行细胞组织学及组织化学检测,包括肝细胞HE染色、肝细胞内糖原PAS染色及葡萄糖-6-磷酸酶染色检测. 结果:培养第7 d对照组部分肝细胞脱落,核固缩,胞质破碎分解.而实验组肝细胞粘壁生长好,肝细胞、储脂细胞和胰岛细胞相间形成团状和索形.培养10 d对照组肝细胞核完全固缩,胞质破碎分解,糖原、葡萄糖-6-磷酸酶的表达消失;实验组肝细胞呈片状,胞质饱满,糖原、葡萄糖-6磷酸酶的表达良好.培养5 d后实验组白蛋白及尿素氮的合成明显高于对照组(P<0.05). 结论:肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养明显延长肝细胞存活期.

硒对大鼠肝细胞和储脂细胞过氧化脂质及细胞外基质的影响

目的 观察微量元素硒 (Se)对大鼠肝细胞、储脂 (Ito)细胞过氧化脂质和细胞外基质 (ECM)产生的影响。方法 采用原位灌注方法分离大鼠肝细胞和 Ito细胞。结果 培养肝细胞、Ito细胞有一定水平的基础丙二醛(MDA)产生和 ECM分泌。Se可提高肝细胞、Ito细胞谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性 ,抑制基础 MDA产生 ,减少 3H-脯氨酸 (3H- Pro)掺入、 型前胶原 (PC )分泌及 Ito细胞透明质酸 (HA)分泌。结论 Se可抑制肝细胞和 Ito细胞过氧化脂质产生和

转化生长因子-β_1对培养肝储脂细胞结缔组织生长因子、基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1对培养肝储脂细胞结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2表达的影响,分析肝储脂细胞参与肝纤维化的机制及信号途径。方法购买人肝储脂细胞体外培养,用TGF-β1进行干扰,观察细胞生长特征,并用免疫组织化学、免疫荧光技术检测CTGF、MMP-2的表达。结果①免疫组织化学染色结果、激光共聚焦显微镜荧光强度定量分析显示,实验组CTGF表达明显增高,与对照组差异显著(P<0.05);②实验组MMP-2表达明显降低,与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论 TGF-β1对体外培养肝储脂细胞CTGF、MMP-2的表达有明显调节作用。TGF-β1通过促进CTGF、抑制MMP-2表达,调节储脂细胞增殖及抑制细胞外基质降解,参与肝纤维化、肝硬化进程。

储脂细胞与肝脏循环

储脂细胞为位于肝窦周围的肝脏非实质细胞之一,其主要生理功能为储存维生素A,在肝纤维化形成过程中,为产生细胞外基质的主要细胞群,近年来研究发现,该细胞具有收缩性,能调节肝窦血流。体外培养及体内研究发现,储脂细胞的收缩性受内皮素及一氧化氮等多种血管活性物质的调节。激活的储脂细胞与血管活性物质的相互作用可能是肝硬变时产生门静脉高压的重要病理机制之一。对储脂细胞的收缩性进行调节有可能成为降低门静脉高压的新途径。

肝脏储脂细胞和肝窦内皮下胞外基质代谢

肝脏储脂细胞和肝窦内皮下胞外基质代谢上海中医药大学附属岳阳医院金树根综述上海中医药大学附属曙光医院王灵台审阅早在１８７６年ｖｏｎＫｕｐｆｆｅｒ在文献中首次描述肝内有星形细胞存在，将肝内储脂细胞（ＦＳＣ）与枯否氏细胞（ＫＣ）归作为同一细胞群体，至本世纪...

人参皂苷Rd干预体外培养肝储脂细胞胶原的表达

背景:肝储脂细胞产生胶原是导致肝硬化的直接原因,调控肝储脂细胞产生胶原的能力即可以防治肝硬化。目的:观察人参皂苷Rd对体外培养肝储脂细胞Ⅰ,Ⅲ型胶原表达的影响。方法:体外培养肝储脂细胞,随机分为对照组和实验组,实验组用100mg/L人参皂苷Rd进行培养干扰,用免疫组织化学、免疫荧光技术检测Ⅰ,Ⅲ型胶原基因的表达。结果与结论:实验组比对照组,Ⅰ,Ⅲ型胶原阳性产物吸光度和面积比值明显降低(P<0.05),说明人参皂苷Rd对体外培养肝储脂细胞Ⅰ,Ⅲ型胶原的表达有明显调节作用,影响肝储脂细胞产生胶原纤维。

人肝组织中肥大细胞与储脂细胞关系探讨

为探讨肥大细胞在慢性肝病中的作用，应用甲苯胺蓝染色和免疫组化染色观察５０例人肝组织中肥大细胞与储脂细胞的密度和分布特征。结果显示慢性肝病组肥大细胞与储脂细胞密度都有增加，各自与正常肝组织相应指标比较差异有显著性（Ｐ＜００５），且二者在数量的增加程度方面呈正相关（γ＝０８２），分布以结缔组织区域多见。

储脂细胞的激活与肝纤维化的发生

储脂细胞的激活与肝纤维化的发生第二军医大学长征医院临床免疫中心谭龙益综述孔宪涛审校肝纤维化是各种慢性肝病后产生的一种共同反应。其主要特征是：细胞外基质异常增生，形成瘢痕。Ⅰ、Ⅲ型胶原［１］、蛋白多糖、纤维结蛋白、透明质酸［２］增多尤为明显，可达正常含...

一种同时分离肝细胞和储脂细胞的简易方法

目的 探讨同时分离肝细胞和储脂细胞的有效方法。方法 采用门静脉胶原酶灌注消化法同时分离大鼠肝细胞和储脂细胞 ,先用 3 0 0r/min(2 0℃ )低速离心 5min ,将细胞悬液分成上清和沉淀两部分并分别放入两个离心管中。A管为沉淀部分 (肝细胞悬液 )经 0 .0 2 %胶原酶孵育液孵育 10min(3 7℃ 5 %CO2 ) ,10 0目网过滤 ,离心后即为肝细胞。B管为上清部分主要是储脂细胞 ,经胶原酶恒温震荡消化 (2 0 0r/min ,3 7℃ ) ,2 0 0目网过滤 ,Nycodenz液进行梯度离心 (3 0 0 0r/min)后即得储脂细胞。结果 肝细胞存活率和细胞产率分别为 (93 .5± 3 .5 ) %和 (2 .4± 0 .2 )×10 8/大鼠 ,储脂细胞分别为 (94.5± 3 .5 ) %和 (2 .3± 0 .4)× 10 7/大鼠。肝细胞组织学及组织化学检测肝细胞形态正常 ,细胞培养功能表达正常。储脂细胞在激发波长为 3 2 8nm的荧光显微镜下发出蓝绿色荧光 ,细胞培养贴壁良好。结论 一步法同时分离肝细胞和储脂细胞是一种简单有效的方法。

冬虫夏草对实验性肝纤维化的疗效及其机理研究

以生理盐水作对照，用冬虫夏草治疗四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。实验第４、８、１２、１４周，治疗组肝细胞浊肿变性、炎细胞浸润，纤维增生均轻于对照组，且最终无假小叶形成。治疗１２周后肝组织中结蛋白阳性细胞数明显少于对照组（Ｐ＜Ｏ．０１），肝狄氏间隙Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原沉积均轻于对照组。电镜下发现冬虫复草能抑制肝内储脂细胞的增殖和转化。提示冬虫夏草能有效地防治肝纤维化，其机理可能在于抑制肝内储脂细胞增殖及向成纤维细胞转化，从而减轻狄氏间隙胶原纤维的沉积。

整合素与肝纤维化

整合素为一类位于细胞膜表面的糖蛋白受体家族分子。在正常肝脏的实质及间质细胞中均发现有整合素的表达，在病变肝脏中，整合素的分布出现种类和数量的改变。整合素可参与肝纤维化发生的多个环节：①参与致纤维化介质的释放，影响储脂细胞的激活；②参与细胞外基质成分的吞噬降解；③调节基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制剂的表达，影响细胞外基质的降解；④调节储脂细胞对致纤维化介质的反应性等。对整合素与肝纤维化关系的深入研究，有可能为促进抗肝纤维化的研究带来新希望。

肝纤维化发生机制的研究进展

肝纤维化(liver fibrosis)是临床上常见的病理改变,是各种慢性肝病产生的一种共同反应,可视为肝硬变的早期阶段。其病理改变的特点为:1.细胞外基质(ECM)在肝脏湿重中所占的比例增加,由正常时不到0.6％升高3～6倍;2.ECM各种成分不成比例地升高,如各型胶原中以Ⅰ、Ⅳ及Ⅲ型胶原升高为主,蛋白多糖以硫酸皮肤素(DS)及硫软骨素(CS)升高为主,结构糖蛋白以纤维连接蛋白(FN)及层粘连蛋白(LN)等升高为主;3.一些基质分子的微细结构发生变化,如胶原d链的羟化程度及糖胺聚糖(GAG)的硫酸化程度发生改变等;4.ECM在肝组织中出现局部性再分布,表现为ECM主要沉积于汇管区及窦周间隙(Disse隙),并且出现窦周毛细血管化(capillarization)。目前认为。

维生素E与微量元素锌对急、慢性肝损伤保护作用的研究

本系列研究就维生素 E 和微量元素锌对肝损伤分别从细胞、动物和人体三个水平进行了详尽的研究,主要获得如下结论:1)建立了适合推广的原代肝细胞分离改良法和储脂细胞分离法,并筛选出了原代肝细胞对环境刺激反应的最佳时机,为研究肝脏代谢提供了一个方便的模型。2)系统地阐明了急、慢性肝损伤时机体内氧化与抗氧化系统的改变特点。证明了抗自由基系统的破坏是加重急性肝损伤和肝脏纤维化的重要原因之一。

甲型肝炎患儿血清透明质酸RIA的临床意义初探

血清透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)水平在成人肝病时的变化国内外已有多篇报道,认为血清HA对肝病的发展趋势、预后判断,特别是肝硬化的无创性诊断方面是一个有效指标。为探讨儿童肝病时血清HA的变化及临床意义,我们对25名健康儿童和30例甲肝患儿血清HA水平进行了测定,现报道如下。