石油污染对僧帽牡蛎(Ostrea cucullata)抗氧化酶的影响

在厦门岛及附近海域的轮渡码头、杏林湾、同安湾、黄厝 4个地点现场采集牡蛎样品 ,研究牡蛎全组织石油烃含量与其消化腺、鳃超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)活性之间的关系 ,并探讨了将僧帽牡蛎抗氧化酶作为监测海洋石油污染的生物标志物 (biomarker)的可能性 .结果表明 :(1)采自轮渡码头、杏林湾、同安湾、黄厝的牡蛎全组织石油烃含量分别为380 6 8、112 34、2 7 31、2 0 37μg g ;(2 )牡蛎消化腺SOD、CAT活性均高于鳃 ;(3)牡蛎消化腺和鳃CAT、SOD活性均随石油烃含量的增加而增强 ,由相关系数来判断两者相关性显著 。

僧帽牡蛎三倍体的研究

报道了用细胞松驰素B、高温休克和低温休克方法诱导憎帽牡蛎三倍体的实验结果.在25.0～26.0℃条件下,进行不同浓度梯度的细胞松驰素B(0.1、0.5、1.0和1.5mg/L)和不同的处理时间的诱导实验.结果表明,在受精后18min用1.5mg/L细胞松驰素B处理受精卵15min,三倍体诱导率最高,达87.5%.用高温休克方法,在受精后18min分别于32.0、35.0、37.0和39.0℃处理受精卵10min,三倍体诱导率分别为4.1%、37.0%、55.2%和42.5%.低温休克方法,在受精后22min于0～1.0℃的2.0℃分别处理受精卵10min,三倍体诱导率分别为36.7%和23.5%.实验性育苗结果显示实验组的幼虫和稚贝的生长速度明显比对照组快.还就细胞松驰素B和温度休克诱导三倍体的机制及对僧帽牡蛎胚胎及早期幼虫发育的影响进行了讨论.

僧帽牡蛎幼体附着和变态的诱导

采用外加人工化学物质检验对僧帽牡蛎眼点幼体的附着和变态诱导活性 ,结果表明 :去甲肾上腺素、肾上腺素和L 多巴可有效诱导幼体不固着变态。在药物持续作用下 ,肾上腺素的最佳诱导浓度为 1 0 -5mol·L-1(变态率 6 7.4% ) ,去甲肾上腺素的最佳诱导浓度为 5× 1 0 -5mol·L-1(变态率 5 2 .2 % ) ,L -多巴的最佳诱导浓度为 1 0 -5mol·L-1(变态率 43.0 % ) ,而对照组变态率为 0。幼体大多在药物作用 1 2～ 2 4h之间完成变态。三种药物诱导的变态个体中有 85 %以上是不固着变态。比较多种附着基和EPI的变态诱导活性 ,显示同种贝壳的活性较肾上腺素还高。去甲肾上腺素诱导幼体变态效应对低盐海水有较强耐受能力 。

三倍体僧帽牡蛎生殖腺发育观察

在僧帽牡蛎繁殖盛期，详细观察了二倍体、三倍体僧帽牡蛎生殖腺外部形态特征，比较了成熟卵母细胞卵径和核径。结果表明，外观上三倍体生殖腺发育较二倍体差，三倍体成熟卵母细胞卵径和核径分别比二倍体大１９．６％和１７．６％，体积分别比二倍体增加７０．３％和６４．２％。组织切片检查结果：二倍体生殖腺发育正常。三倍体生殖腺发育受阻，大都在增殖期和休止期，一部分个体可发育至生长期和成熟期，并能产生成熟的卵子和精子。在三倍体中还观察到３个雌雄同体个体。三倍体雌雄性比为７∶１。此外，本文还就三倍体生殖腺发育受阻和雌雄同体现象进行了讨论。

僧帽牡蛎三倍体和二倍体的生长比较

１９９３ 年采用高温（３７ ℃） 休克处理受精卵１５ ｍｉｎ ，抑制第一极体排放诱导出僧帽牡蛎三倍体，在早期幼虫阶段，处理组幼虫平均壳长显著较对照组大，经过１ 年的养殖，三倍体壳长、壳高、软体部湿重和干重分别比二倍体增加１３ ．２ ％ 、８ ．９ ％ 、１２４ ．６ ％ 和８７ ．１ ％ 。１９９７ 年采用０ ．５ ｍｇ／Ｌ 细胞松弛素Ｂ 在５０ ％ 受精卵出现第一极体时处理受精卵１５ ｍｉｎ 诱导出僧帽牡蛎三倍体，经过１４ 个月养殖，三倍体壳长、壳高、体重和软体部湿重分别比二倍体增加３９ ．２６ ％ 、１７ ．２５ ％ 、７２ ．５０ ％ 和１１８ ．４２ ％ ，除个别月份外，三倍体和二倍体的生长差异显著（ Ｐ＜ ０ ．０５） ，僧帽牡蛎三倍体较二倍体具有明显的生长优势。

僧帽牡蛎碱性磷酸酶性质的研究

从僧帽牡蛎分离纯化出一种碱性磷酸酶,采用Sephadex G-200凝胶过滤柱层析法测得该酶分子量为1.57×10~5.以对硝基苯磷酸为底物,该酶的最适温度为43℃,最适pH值为10.0.在37℃和pH值为10.0的条件下,酶催化反应的米氏常数(K_m)为9.68×10^(-4)mol/dm^3,活化能(E_a)为45.85kJ/mol,温度系数(Q_(10))为1.80(30～40℃).对该酶的热稳定性研究表明:其在45℃以下较为稳定,50℃以上明显失活,并测定了该酶的热失活速度常数.金属离子对酶活力的效应研究结果表明:Mg^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)、Co^(2+)对酶有激活作用,Ag^+、Hg^(2+)、Zn^(2+)表现为抑制作用,Cd^(2+)几乎没有影响.Mg^(2+)是较有效的激活剂,表现为部分非竞争性效应,激活常数(K_a)为2.48×10^(-4)mol/dm^3,有Mg^(2+)存在时该酶活性中心的转换数量是无Mg^(2+)时的4.0倍.几种效应物对酶的抑制机理研究表明:HPO_4^(2-)、HAsO_4^(2-)、Cys为竞争性,其抑制常数分别为1.61、1.18和0.15mmol/dm^3;L-Phe为反竞争性,抑制常数为3.26mmol/dm^3.

温度、盐度及交互作用对僧帽牡蛎(Saccostrea cucullata)呼吸排泄的影响

采用实验生态学方法研究了温度(13、18、23、28、31、34℃)和盐度(18、23、28、33)对僧帽牡蛎(Saccostrea cueullata)耗氧率和排氨率的影响,并分析了二者交互作用对呼吸排泄的影响。结果表明,不同温度条件下,僧帽牡蛎的耗氧率变化范围为0.43-3.15mg g^(-1)h^(-1),排氨率的变化范围为72.62-1245.77μg g^(-1)h^(-1),方差分析显示,温度和盐度对僧帽牡蛎耗氧率(F=60.440,P<0.01)和排氨率(F=61.083,P<0.01)的影响均极显著;二者的交互作用对僧帽牡蛎耗氧率(F=4.907,P<0.01)和排氨率(F=11.412,P<0.01)影响也极显著,耗氧率(Y)、排氨率(Y)与温度(T)和盐度(S)之间的二元线性回归方程为y=a+bT+cS+dT×S。在一定温度范围内(13-31℃)僧帽牡蛎单位体重耗氧率(Y)与温度(T)呈正相关符合指数方程Y=ae^(bT),其中a的取值范围为0.1378-0.2117,b的取值范围为0.0757-0.0912;单位体重排氨率也与温度呈正相关,符合上述指数方程,其中a的取值范围为20.364-30.634,b的取值范围为0.1004-0.1341。不同温度和盐度条件下,僧帽牡蛎呼吸排泄的氧氮比在2.20-7.78之间,平均值为3.81。

0#柴油水溶性成分对僧帽牡蛎(Ostrea cucullata)谷胱甘肽硫转移酶活性的影响

在实验条件下,将僧帽牡蛎(Ostreacucullata)分别置于含有低(0.5mg/L)、中(2mg/L)和高(5mg/L)3种浓度0#柴油水溶性成分(watersolublefraction,WSF)的海水中,在污染后1,4,7,11,15d采样,15d后转入清洁海水中进行6d的恢复实验,采样.测定消化腺和鳃谷胱甘肽硫转移酶(GST)的活性.结果表明:正常生理条件下鳃GST活性高于消化腺;消化腺和鳃GST活性随污染时间的延长先被诱导后逐渐下降,并存在一定的剂量效应关系,可作为监测海洋石油污染的生物标志物;解除污染后,GST活性恢复到对照组水平.

净化僧帽牡蛎肉低温保鲜效果研究

为了使僧帽牡蛎（Saccostrea cucullata）卫生安全并低温流通,对大肠菌数超标的僧帽牡蛎进行净化。大肠菌群数6 000 MPN/100 g贝肉以下的僧帽牡蛎经24 h的净化,可达到净化海水贝类标准（DB 35/575—2004）的要求（≤300 MPN/100 g贝肉）;同时对净化蛎肉用注净化海水和未注净化海水两种包装,在-4-10℃各温度下进行保鲜试验,保鲜过程中两种包装牡蛎肉的挥发性盐基氮变化无显著差异,净化蛎肉在-4-0℃温度带微冻保鲜效果较好,在5℃以下贮藏比较安全。建议生产上将净化僧帽牡蛎注净化海水包装在0-4℃贮运。

僧帽牡蛎保鲜过程中游离氨基酸、牛磺酸的变化

探讨了僧帽牡蛎在低温贮藏保鲜过程中鲜度指标及游离氨基酸、牛磺酸等的变化。实验表明，在０～２℃及３～５℃的贮藏中挥发性盐基氮呈平缓上升趋势，贮藏１５天分别为１５．２ｍｇ／１００ｇ和２０．６ｍｇ／１００ｇ；而在６～８℃下贮藏，挥发性盐基氮变化相对较快，１５天后高达２６．８ｍｇ／１００ｇ。在萃取液中，牛磺酸的含量最高，其在贮藏中略有下降，但基本上在３５７ｍｇ／１００ｇ～３８７ｍｇ／１００ｇ范围内波动；游离氨基酸的含量较高的为丙氨酸、甘氨酸和谷氨酸等，丝氨酸、精氨酸、赖氨酸次之，其余氨基酸初始含量相对较低，其含量的变化在不同的贮藏温度下快慢不一样，但各自呈现出一定的规律性。

福建闽南沿海养殖僧帽牡蛎中汞和砷的时空分布特征及风险评价

通过2009—2014年对福建闽南沿海的湄洲湾、大港湾、泉州湾、围头湾、厦门湾、佛昙湾、旧镇湾、东山湾、和诏安湾养殖的僧帽牡蛎中总汞和总砷含量的调查监测,对养殖僧帽牡蛎体中总汞和总砷含量的分布和食用风险进行探讨.结果表明,近6年9个湾海区养殖僧帽牡蛎体中总汞平均质量浓度(0.007—0.018 mg·kg^(-1)):湄洲湾>泉州湾>厦门湾>诏安湾>围头湾=旧镇湾=大港湾=东山湾>佛昙湾;总砷平均质量浓度(1.40—2.02 mg·kg^(-1)):泉州湾>厦门湾>大港湾>湄洲湾>诏安湾>东山湾>围头湾>旧镇湾>佛昙湾.湄洲湾、泉州湾、厦门湾大部分海水养殖僧帽牡蛎体中总汞和总砷含量明显高于其他海区养殖僧帽牡蛎.福建闽南沿海养殖僧帽牡蛎体未受到汞的污染,98.1%的样品受砷的污染.根据FAO/WHO/JECFA(联合国粮农组织和世界卫生组织下的食品添加剂联合专家委员会)提出的PTWI(暂定每周耐受摄入量)汞为5μg·kg^(-1)bw、无机砷为15μg·kg^(-1)bw.食用闽南沿海僧帽牡蛎中汞的EWI(每周评估摄入量)值均远小于PTWI,仅占PTWI的1.1%—1.4%;无机砷的EWI值均小于PTMI,占PTWI的7.0%—11.3%,总体处于安全水平.

0号柴油水溶性成分对僧帽牡蛎脂质过氧化的影响

在实验条件下,将僧帽牡蛎分别置于含有0.5、2、5 mg·L-10号柴油水溶性成分的海水中,在污染后1、4、7、11、15 d采样,15 d后转入清洁海水中进行6 d的恢复实验,采样,观察消化腺和鳃脂质过氧化的程度。结果表明:(1)正常生理条件下消化腺和鳃也有一定程度的脂质过氧化,消化腺显著高于鳃;(2)脂质过氧化的程度随污染时间的延长而增加,并存在一定的剂量-效应关系,可作为监测海洋石油污染的生物标志物;(3)解除污染后,脂质过氧化恢复到对照水平。

僧帽牡蛎EGFR基因的克隆及早期发育阶段的表达

僧帽牡蛎(Crassostrea angulata)也称葡萄牙牡蛎,是我国广泛分布的一种传统大宗养殖贝类.本研究利用消减杂交文库结合RACE技术,从僧帽牡蛎中克隆获得了表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的cD-NA全长序列.EGFR基因cDNA序列1 608 bp,编码298个氨基酸,预测存在1个跨膜结构域和5个酪蛋白激酶II磷酸化位点.构建了该基因的UPGMA进化树,比对发现其氨基酸序列与高等动物的差异较大.给出了该基因的标准曲线,利用RT-PCR技术检测了该基因在僧帽牡蛎胚胎发育早期阶段的表达量变化.该基因从僧帽牡蛎发育的卵到D型幼虫期间均有表达.其中早期的卵母细胞和后期的担轮幼虫,D型幼虫阶段表达量较高,表明该基因在牡蛎幼体胚胎发育早期具有阶段性调控的作用.

久效磷对僧帽牡蛎(Ostrea cucullata)染色体毒性效应研究

受试僧帽牡蛎（Ｏｓｔｒｅａｃｕｃｕｌａｔａ）暴露在含有久效磷农药的海水中养育７ｄ，取鳃用空气干燥法制片，观察数千个早中期、中期细胞分裂相末发现微核、染色体结构变异及其它染色体畸变现象。但随久效磷浓度的增加细胞分裂相明显减少。处理过程中投饵和换水的僧帽牡蛎的细胞分裂相明显高于不投饵、不换水；但投饵和换水的僧帽牡蛎随久效磷浓度的增加细胞分裂被抑制的比率又快于不投饵、不换水。经久效磷处理的各组僧帽牡蛎核型与对照组的核型均为２ｎ＝２０，２０ｍ，ＮＦ＝４０。研究结果指出：双壳类的僧帽牡蛎对久效磷农药的毒性不敏感，在所试浓度范围内，并不引起染色体损伤的遗传效应。

僧帽牡蛎二倍体和三倍体卵母细胞发育的超微结构比较

本文利用电子显微镜技术观察僧帽牡蛎二倍体和三倍体初级卵母细胞发育过程中细胞和细胞器的超微结构变化。结果表明 :二倍体和三倍体卵母细胞发育差异明显。在卵黄形成期 ,二倍体卵母细胞呈椭圆形 ,细胞核呈伪足状突起 ,核仁呈颗粒状聚合体 ,细胞器多发达 ,合成卵黄粒多 ,细胞膜外有微绒毛 ,卵母细胞生物合成旺盛、代谢活动强 ;而三倍体卵母细胞大都呈不规则形状 ,核仁小、致密 ,细胞器少且不发达 ,卵黄粒少 ,细胞膜外无微绒毛 ,卵母细胞生物合成及代谢弱。

厦门海域僧帽牡蛎生化指标与有机污染物的相关性

研究了厦门海域4个地点的僧帽牡蛎(Ostreacucullata)全组织中有机氯农药(HCHs、DDTs)和多氯联苯(PCBs)的总含量及其与消化腺的总SOD、GSH、总抗氧化能力、MDA、EROD和GST活性(含量)之间的关系.结果表明,采自大嶝岛的牡蛎全组织HCHs含量最高;采自集美的牡蛎全组织DDTs和PCBs含量最高.消化腺总SOD活性、总抗氧化能力均随着组织内有机物含量的增加而减少,呈现一定的负相关性.EROD活性与DDTs和PCBs含量呈现很好的相关性,对于指示海洋中有机氯农药和多氯联苯类物质污染程度有着较好的应用前景.

僧帽牡蛎和华贵栉孔扇贝染色体的制作

本实验以僧帽牡蛎和华贵栉孔扇贝的胚胎、担轮幼虫和鳃组织等为材料,经秋水仙素处理,海水蒸馏水低渗,甲醇、冰醋酸固定液固定后得到的细胞悬液,压片或滴片,醋酸洋红或吉姆莎染料染色,最后获得较理想的染色体玻片标本。

三丁基氯化锡对僧帽牡蛎淀粉酶和脂肪酶活性的影响

为研究三丁基氯化锡(TBTCL)对僧帽牡蛎消化酶活性的影响,将僧帽牡蛎分别在TBTCL质量浓度为0、2、5、10、50、100 ng·L-1的共6组实验海水中培养4 d,以酶学分析的方法测定消化腺淀粉酶和脂肪酶活性。结果表明不同质量浓度TBTCL对僧帽牡蛎淀粉酶、脂肪酶活力的影响表现出不同的变化趋势:TBTCL对僧帽牡蛎消化腺淀粉酶活性总体呈显著抑制作用(P<0.05),表现为从强到弱再强的抛物线趋势,在10 ng/L的质量浓度时TBTCL对淀粉酶活力的抑制作用最弱,呈显著的剂量-效应关系;各质量浓度TBTCL对脂肪酶活性具诱导效应,低质量浓度(2 ng·L-1,5 ng·L-1)诱导作用较强,随着质量浓度的升高,诱导作用减弱,呈显著的剂量-效应关系。

三丁基氯化锡对僧帽牡蛎抗氧化酶活性的影响

[目的]探讨三丁基氯化锡（TBTCl）对僧帽牡蛎抗氧化酶系统毒性的影响程度及致毒机制。[方法]在实验室条件下，研究不同浓度（1、2、5、10和100rig／L）的三丁基氯化锡（TBTC1）在不同暴露时间（24、72、96h）对僧帽牡蛎消化腺和鳃的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和硒依赖谷胱甘肽过氧化酶（Se—GPx）活性的影响。J结果]当佃TCl浓度为1和2ng／L时，在整个实验期间TBTCl对消化腺和鳃内SOD和Se—GPx活性无显著影响（P〉0．05），而对消化腺CAT活性有显著诱导作用（P〈0．05）。当TBTcl浓度为5～100ng／L时，SOD、CAT和Se—GPx的活性都呈现不同程度的时间剂量依赖关系。[结论]该研究可为餐桌食品污染的防患、无公害水产品的生产和环境检测提供科学依据。