吸附树脂法分离儿茶素EGCG和咖啡因的研究

本实验考察了表面性质不同的3种吸附树脂对儿茶素EGCG和咖啡因的吸附性能,结果显示:3种树脂对咖啡因的吸附量随比表面积的增大而增加,树脂表面性质影响较小;但对儿茶素EGCG的吸附树脂表面性质影响较大,非极性吸附树脂X-5的吸附量最小,带有羰基和酰胺基的RB树脂吸附容量和吸附选择性较高,可将儿茶素EGCG和咖啡因层析分离开。

利用大孔树脂吸附法分离儿茶素EGCG和咖啡因

考察了S-8、X-5、XAD-200等树脂对绿茶水提液中儿茶素EGCG和咖啡因的吸附性能,结果显示,具有高比表面积的弱极性吸附树脂XAD-200对EGCG和咖啡因的吸附差异较大,动态吸附过程中发生层析分离,儿茶素EGCG在1.5 BV后即开始泄漏,而咖啡因在6 BV后才开始泄漏.收集1.5～6 BV处的流出液可得w（咖啡因）＜0.30％的儿茶素,EGCG的质量分数由48.65％提高至66.37％.在最佳上样量下,EGCG的收率可达65.21％.

不同水温下儿茶素EGCG在黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)体内代谢动力学和肝消除研究

采用反相高效液相色谱-紫外检测法测定了黄颡鱼血浆、肝脏中儿茶素EGCG含量,并研究了不同水温(10℃和20℃)下EGCG在黄颡鱼体内代谢动力学和肝组织消除特征。结果表明,高温下黄颡鱼腹腔注射EGCG后体内吸收较快,T1/2ka为0.21h,T1/2α为2.07h,T1/2β为22.89h,AUC为5195.41μg·h/ml,Tp为0.95h,Cmax为257.75μg/ml;低温下分别为5.67h、9.53h、207.49h、17283.03μg·h/ml、12.56h和117.16μg/ml。同时在0.5、1、2、4、8、12、24、48、96h各时间点检测了肝脏组织中EGCG浓度,并计算得出高温下EGCG在肝组织中的T1/2β为24.15h,低温下肝组织中T1/2β为64.17h。对不同水温下代谢动力学和肝组织消除规律的研究表明,EGCG在黄颡鱼体内吸收、分布和消除速度与水温关系密切,高温下均较低温下迅速。

儿茶素EGCG对口腔癌细胞体外增殖的抑制作用及相关机制研究

目的:对儿茶素EGCG抑制口腔癌细胞体外增殖的作用及相关机制进行分析探讨。方法:将人CAL-27、SCC-25以及KB细胞株进行体外培养,应用MTT法检测EGCG对细胞增殖的影响,人口腔上皮癌移植瘤模型的建立选取裸鼠以KB细胞接种,将选取的裸鼠随机分两组,即癌移植瘤模型不做任何处理的对照组和癌移植瘤模型作EGCG处理的实验组,两组裸鼠均连续给药4周,测量移植瘤体积及质量,测量EGCG对裸鼠肿瘤抑制率。结果:不同浓度的EGCG对体外培养的人CAL-27、SCC-25以及KB细胞株均有抑制作用,且EGCG浓度越高,对CAL-27、SCC-25以及KB细胞株的抑制作用越强。实验组癌移植瘤体积(1.48±0.32)cm3明显小于对照组癌移植瘤体积(5.76±0.46)cm3,瘤体积抑制率为71.82%;实验组癌移植瘤重(0.76±0.21)g明显小于对照组癌移植瘤重(2.99±0.24)g,质量抑制率为74.58%;对比两组癌移植瘤体积和质量有统计学差异(P<0.05)。结论:儿茶素EGCG可以抑制不同类型口腔癌细胞的增殖,能够提高口腔癌患者的生活质量及生存周期,动物实验也表明EGCG能明显抑制人类口腔上皮癌移植瘤细胞的增长。

儿茶素EGCG联合伐地那非抑制口腔癌细胞体外增殖的研究

目的探讨儿茶素EGCG联合伐地那非抑制口腔癌细胞体外增殖的效果及作用机制。方法体外培养人CAL-27、SCC-25以及KB细胞株,使用不同浓度的EGCG联合伐地那非处理,口腔癌细胞体外作用的抑制检测方法为MTT;用人口腔上皮癌移植瘤模型的建立选取裸鼠以KB细胞接种,测量移植瘤体积及质量。结果 EGCG联合20μmol/L的伐地那非对CAL-27、SCC-25、KB细胞株的抑制率分别为83.27%、86.27%、60.23%,而单纯使用EGCG对3种细胞株的抑制率分别为40.02%、18.86%、11.27%,随着伐地那非浓度的升高,两种药物联合的抑制作用更强,EGCG联合伐地那非比单独使用EGCG对鳞癌细胞株的抑制率更高(P<0.05);单独使用EGCG处理的裸鼠癌移植瘤体积为(1.56±0.36)cm3,瘤重(0.76±0.22)g,为5组裸鼠中癌移植瘤体积最大,瘤重最重,EGCG联合伐地那非处理的裸鼠显著低于其瘤体积和瘤重,差异具有统计学意义(P<0.05);5μmol/L伐地那非联合不同浓度的EGCC抑制口腔癌细胞株具有显著的时间效应和剂量效应。结论儿茶素EGCG联合伐地那非能够抑制不同种类的口腔癌细胞增殖,动物实验证明EGCG联合伐地那非能够降低癌移植瘤模型的体积和质量。

酶法酰化儿茶素EGCG及其产物在大豆油中的抗氧化性

利用脂肪酶在非水相反应体系中催化茶多酚中EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)的乙酰化反应,以增加EGCG的脂溶性。研究了反应体系溶剂、加酶量、反应时间、反应温度、底物物质的量比等条件对EGCG乙酰化转化率的影响。利用单因素试验和正交试验确定了最佳的反应条件:反应体系溶剂为乙腈、温度45℃、时间10h、乙酸乙烯酯与EGCG物质的量比0.5:1、加酶量7%。并且初步研究了乙酰化产物在大豆油中的抗氧化性,实验表明在相同添加量的情况下,乙酰化EGCG的抗氧化性要高于未改性EGCG及BHT,低于TBHQ。

表没食子儿茶素没食子酸酯对脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤和凋亡的干预作用

【目的】探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脂多糖(LPS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)炎症和凋亡的影响及其潜在的保护机制。【方法】利用LPS诱导BMECs构建细胞炎症模型。通过CCK-8检测细胞活力,筛选EGCG最佳浓度。将BMECs分为对照组、LPS处理组和EGCG+LPS共处理组,利用实时荧光定量PCR检测细胞中炎性因子、凋亡因子以及抗氧化相关基因mRNA表达水平;利用试剂盒检测BMECs的线粒体膜电位和活性氧(ROS)水平;通过流式细胞术检测BMECs凋亡情况。【结果】使用LPS处理BMECs后,与0 h相比,各时间段细胞中炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8和IL-1β基因mRNA表达量均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),成功构建BMECs细胞炎性损伤模型。CCK-8检测细胞活力结果显示,EGCG最佳作用浓度为5μmol/L。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,LPS诱导的BMECs中IL-6、IL-8、丙二醛(MDA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)基因mRNA表达量均极显著升高(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、B细胞淋巴瘤蛋白-2(Bcl-2)基因mRNA表达量极显著降低(P<0.01);与LPS组相比,EGCG+LPS组细胞中IL-6、IL-8、IL-1β、MDA、Bax和Caspase-3基因mRNA表达量均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),GSH-Px、超氧化物歧化酶(SOD)、Bcl-2基因mRNA表达量均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。线粒体膜电位检测结果显示,与对照组相比,LPS组BMECs红色荧光明显减弱,绿色荧光有所增强,而EGCG和LPS共孵育后则对BMECs红色荧光没有明显影响,绿色荧光相对减弱;ROS水平检测结果显示,与对照组相比,LPS组细胞绿色荧光明显增强,而EGCG和LPS共孵育后,细胞绿色荧光有所减弱。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,LPS处理后死亡细胞和凋亡细胞明显增多,细胞凋亡率极显著升高(P<0.01),而EGCG和LPS共孵育后凋亡细胞则明显减少,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。【结论】EGCG可以通过抑制LPS诱导BMECs中ROS释放和缓解线粒体损伤等综合作用,缓解炎性反应并抑制细胞凋亡,研究结果为EGCG预防和治疗奶牛乳腺炎提供理论基础。

表没食子酸儿茶素没食子酸酯(EGCG)在小鼠肾脏分布研究

本文应用RP-HPLC建立了小鼠肾脏中儿茶素EGCG检测方法,同时探索儿茶素EGCG在小鼠肾脏组织分布特征。小鼠腹腔注射后,不同时间点采集肾脏组织,RP-HPLC检测其中EGCG含量,计算儿茶素EGCG在肾脏中的分布。研究结果表明所建立的HPLC检测方法在0.5～200mg/L范围内线性关系良好(r>0.99),平均回收率85.0%以上,日内和日间精密度均低于10.0%。该方法操作简便、灵敏、准确,适合于肾脏组织分布研究。

儿茶素EGCG对胆汁酸的结合及调控脂质代谢研究

在体外模拟人体消化环境,以考来烯胺作为阳性对照,采用分光光度法测定了体外儿茶素EGCG对6种胆酸盐的结合能力;同时探讨了EGCG对高血脂模型大鼠血脂代谢的调控功能。研究结果显示,除胆酸钠外,儿茶素EGCG与6种胆酸盐平均结合率均较高,达到60%以上;其中EGCG结合牛磺胆酸钠(STC)、甘氨胆酸钠(SGC)、牛磺石胆酸(EA)和牛磺脱氧胆酸(ST)的平均结合率分别是考来烯胺的78.99%、90.14%、82.00%和93.48%。高脂模型大鼠脂质代谢结果显示血清中TC、TG及LDL-C含量与模型组相比显著下降(P<0.05),HDL-C显著升高(P<0.05),肝脏组织HE染色显示EGCG处理组肝细胞脂肪变性明显改善,肝细胞排列整齐。因此,上述研究结果表明儿茶素调控脂质代谢的机制至少部分源自对小肠中胆汁酸的吸附,抑制其重吸收,从而发挥其脂质代谢调控功能。

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)生物活性研究进展

综述近年来国内外有关EGCG生物活性的研究进展,着重阐述EGCG在抗氧化、保护神经系统、抗肿瘤及保护心脑血管方面的活性,综述其在免疫、内分泌和代谢酶抑制方面的研究成果,展望这一研究领域的发展前景和发展方向,期望为茶多酚类物质深入研究及产品开发提供思路。

粗茶多酚中的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的提取方法研究

从溶剂的选择和混合试剂提取物等方面,对茶多酚粗品中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的提取进行了研究。结果表明:采用正丁醇提取的产品中,EGCG含量最高,纯度达到41.00%,较甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等提取物相比,其含量提高了2倍以上。在此基础上进行了混合溶剂提取试验,结果显示:以正丁醇∶石油醚为1∶2时,提取物中EGCG含量最高,达到了70.30%。

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与Ni^(2+)共同作用对舌鳞癌细胞cyclinD1和survivin基因表达的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)及镍离子(Ni2+)共同作用对舌鳞癌细胞系Cal-27 cyclinD1和survivin基因表达的影响。方法 MTT法检测Cal-27的细胞存活率;real-time PCR法检测cyclinD1及survivin mRNA水平表达的影响;Western blot法检测cyclinD1和survivin蛋白水平的表达情况。结果高浓度EGCG(>100μmol/L)可明显抑制Cal-27生长,且对细胞cyclinD1和survivin基因转录及蛋白表达有明显下调作用(P<0.05);Ni2+与EGCG共同作用增加了对Cal-27的抑制作用,cyclinD1和survivin表达更加显著下降(P<0.05)。结论 Ni2+与EGCG共同作用后可增强EGCG对细胞生存率及cyclinD1和survivin基因表达的抑制作用,两者起协同作用。

绿茶的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抗血液肿瘤血管新生机制的研究

目的对绿茶的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对血液肿瘤血管新生抑制作用进行研究,为EGCG用于白血病治疗提供依据。方法采用MTT法,测定不同浓度的EGCG对白血病细胞株K562细胞增殖的抑制作用,并采用RT-PCR方法检测EGCG处理前后K562细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况。结果EGCG可明显抑制K562增殖,IC50值为118.34μM,并可以下调K562细胞VEGF mRNA的表达。结论EGCG可下调VEGF mRNA的表达,从而减少VEGF的分泌。既可以减少VEGF的旁分泌,减弱其促进内皮细胞增生的作用;又可以减少VEGF的自分泌,削弱其通过白血病细胞细胞表面VEGF受体促进肿瘤细胞的分裂增殖、抑制肿瘤细胞的凋亡的作用。从不同途径发挥其抗血液肿瘤血管新生的作用。

表没食子儿茶素没食子酸酯对金华猪生产性能、肉品质、肠道菌群及抗氧化能力的影响

试验旨在研究饲粮中添加表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对金华猪生长性能、肉品质、机体抗氧化能力和肠道微生物组成的影响。选取24头平均体重为59.76 kg的金华猪(阉公猪),随机分为对照组(基础饲粮)和EGCG组(基础饲粮中添加0.3%EGCG),每组12头,3个重复,每个重复4头,试验预试期7 d,正试期40 d。结果表明:与对照组相比,EGCG组降低了金华猪的日均采食量(P<0.05)及耗料增重比(P<0.05);饲粮中添加0.3%EGCG可提高眼肌面积(P<0.05),降低平均背膘厚(P<0.05);饲粮中添加0.3%EGCG降低了血清甘油三酯含量和血清及肝脏的丙二醛含量(P<0.05),提高了血清超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性(P<0.05),提高了肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05);与对照组相比,EGCG组放线菌门(Actinobacteria)相对丰度降低(P<0.05),粪球菌属3(Coprococcus_3)、瘤胃梭菌属9(Ruminiclostridium_9)和多尔氏菌属(Dorea)的相对丰度升高(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加0.3%EGCG能显著提高金华猪生长性能,改善胴体性状,提高金华猪的脂代谢和抗氧化能力,并且改变肠道微生物组成。

不同剂量EGCG改善代谢综合征的效果及其机制

为探究不同剂量表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对高脂饮食诱导的代谢综合征小鼠的干预作用,将小鼠分为正常饮食对照组、高脂饮食对照组、低剂量EGCG干预组、中剂量EGCG干预组及高剂量EGCG干预组,其中低、中、高EGCG灌胃剂量分别为50、100、200 mg/kg b.w.,每周监测体质量,连续灌胃12周后测定小鼠的血清生理生化指标、检测回肠组织中脂质代谢相关基因的表达量以及肠道氧化应激指标。结果表明,不同剂量EGCG干预均可显著降低高脂饮食小鼠体质量的增加并改善脂质代谢异常,这可能与降低肠道中脂质吸收相关基因的表达有关,但中、高剂量EGCG可能具有一定的肠毒性。

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯缓解顺铂所致大鼠急性肾损伤效果评价

【目的】评价不同浓度表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)对顺铂所致大鼠急性肾损伤的保护效果,筛选出EGCG缓解顺铂肾毒性的最佳浓度。【方法】将30只Wistar大鼠随机分为5组(6只/组):正常对照组(CON)、顺铂组(CIS)、低剂量EGCG(20 mg/kg)+顺铂组(LCE)、中剂量EGCG(40 mg/kg)+顺铂组(MCE)及高剂量EGCG(80 mg/kg)+顺铂组(HCE)。CON和CIS组大鼠持续28 d灌胃生理盐水(40 mg/kg),CIS组在第26天腹腔注射CIS(7 mg/kg);LCE、MCE和HCE组大鼠持续28 d灌胃相应剂量的EGCG,在第26天腹腔注射CIS,第29天采集大鼠血清和肾脏组织。检测药物灌服期间大鼠生理和生化指标变化,病理学检测各组大鼠肾脏组织病理变化,初步评价EGCG在CIS所致大鼠急性肾损伤中保护作用,筛选出EGCG最佳有效浓度;Western blotting检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3及炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和IL-10蛋白表达变化,进一步证实EGCG的保护效果。【结果】与CON组相比,CIS组大鼠采食量、饮水量和体重在第28天显著下降(P<0.05),血清中尿素氮(BUN)与肌酐(CRE)含量显著上升(P<0.05),肾小管扩张明显,有蛋白管型,肾损伤严重;与CIS组相比,MCE组大鼠采食量、饮水量和体重显著上升(P<0.05),血清中BUN、CRE含量显著下降(P<0.05),MCE组肾脏肾小管扩张程度得到明显改善,LCE和HCE组无明显变化。因此,选用40 mg/kg EGCG用于后续试验。Western blotting检测结果表明,与CON组相比,CIS组Bax、IL-6、Caspase-3蛋白表达量显著上升(P<0.05),Bcl-2、IL-10蛋白表达量显著下降(P<0.05);与CIS组相比,MCE组Bax、IL-6、Caspase-3蛋白表达量显著下降(P<0.05),Bcl-2、IL-10蛋白表达量显著升高(P<0.05)。【结论】EGCG对CIS诱导的大鼠急性肾损伤具有保护作用,以40 mg/kg为最佳,其保护机制与抑制肾细胞凋亡和炎症相关。

茶叶儿茶素抑制剂对胰脂肪酶构效关系的影响

运用圆二色光谱(CD)和荧光光谱法(FS),探讨茶叶儿茶素(EGCG)对胰脂肪酶(PPL)二级和三级结构的变化规律;同时,以橄榄油为底物,研究反应时间和EGCG浓度对胰脂肪酶活性的影响。结果表明:EGCG对PPL的抑制作用1h后达到最大值,抑制率为30%。EGCG低浓度(≤1mmol/L)时,EGCG对PPL的抑制率随EGCG浓度升高而增大,当EGCG超过此浓度时,抑制率随EGCG浓度的升高基本保持不变。Lineweaver-Burk作图可知,EGCG对PPL的抑制类型为非竞争性抑制作用。CD和FS分析表明,EGCG对PPL二级和三级结构均有一定的影响,PPL二级结构的变化与EGCG浓度呈正相关,而三级结构的变化与EGCG浓度没有显著的相关性。FS图谱还表明,EGCG对PPL色氨酸存在荧光淬灭现象,且静态淬灭和动态淬灭同时存在。

表没食子儿茶素没食子酸酯在食品体系中的抗氧化作用研究

目的:考察表没食子儿茶素没食子酸酯在食品体系中的抗氧化能力。方法:以高脂肪含量的压缩饼干为载体,通过添加不同浓度的EGCG,考察其抗氧化能力及与VE和BHA抗氧化能力的大小,并考察EGCG分别与VE和柠檬酸之间的协同作用。结果:EGCG在食品体系中的抗氧化能力优于VE和BHA,且在压缩饼干中的最佳添加量为200mg/kg,与VE和柠檬酸均有协同增效作用。结论:EGCG在食品体系的应用中能够发挥其较强的抗氧化能力。

EGCG对口腔鳞癌细胞增殖及信号传导通路的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对不同的人鳞癌细胞株增殖及信号传导通路的影响,并观察了EGCG对人口腔上皮癌移植瘤的抑制效应。方法体外培养人CAL-27、SCC-25、KB细胞株,应用MTT法检测EGCG对细胞增殖的影响,筛选出敏感细胞株。应用流式细胞术检测EGCG对CAL-27细胞细胞周期的影响,应用Protein Pathway Array技术检测EGCG对CAL-27细胞株蛋白表达的影响。KB细胞接种裸鼠建立人口腔上皮癌移植瘤模型,随机分为EGCG组和对照组,连续给药4周,测量移植瘤体积及质量,计算裸鼠肿瘤抑制率。结果 EGCG对多种类型的人口腔鳞癌细胞系均有抑制作用,并呈剂量依赖性。不同的细胞系对EGCG的敏感性不同,EGCG对CAL-27的抑制作用最强。流式细胞术显示EGCG对CAL-27细胞周期的影响主要是引起S期和G2/M期阻滞,G0/G1期细胞减少。应用Protein Pathway Array技术共分析了107种蛋白,应用EGCG处理CAL-27细胞后共有15种蛋白发生了明显变化。结论 EGCG能够抑制多种类型人口腔鳞癌细胞株的增殖,敏感细胞株为CAL-27。EGCG主要影响CAL-27细胞的EGFR和Notch信号传导通路,并通过以上信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达水平的变化,导致细胞周期S期和G2/M期阻滞。动物实验表明EGCG能明显抑制人类口腔上皮癌移植瘤的增长。

表没食子儿茶素没食子酸酯对慢性盆腔炎大鼠子宫组织的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对慢性盆腔炎大鼠子宫组织的影响。方法苯酚胶浆法制备慢性盆腔炎大鼠模型,高、中、低剂量组分别按80、40、20 mg/kg给予EGCG溶液,模型组、假手术组、正常组均灌胃给予等量生理盐水。观察各组大鼠子宫内膜病理改变,检测血清SOD、MDA、ET-1、TXB2、6-keto-PGF_(1α)及子宫组织TNF-α、IL-6、IL-10水平。结果治疗组子宫内膜病理形态有明显改善。模型组MDA、ET-1、TXB2、TNF-α、IL-6水平显著高于假手术组,SOD、6-keto-PGF_(1α)、IL-10水平显著低于后者(P<0.01);EGCG高、中剂量组MDA、ET-1、TXB_2、TNF-α、IL-6水平显著低于模型组,SOD、6-keto-PGF_(1α)、IL-10水平显著高于后者(P<0.01,P<0.05),均与给药剂量呈正相关。结论 EGCG可明显改善慢性盆腔炎模型大鼠子宫内膜炎性病变,其作用机制与该成分抗炎、抗氧化作用,以及保护血管内皮细胞、改善血液循环有关。