石蒜儿茶酚氧位甲基转移酶基因克隆与原核表达

采用同源克隆与RACE相结合的方法,首次从石蒜叶片中克隆到可能与加兰他敏生物合成相关的儿茶酚氧位甲基转移酶基因,命名为LrCOMT。核酸序列分析显示,该cDNA全长1 246bp,开放阅读框1 101bp,编码366氨基酸。氨基酸序列分析与比对发现,LrCOMT编码的氨基酸序列具有COMT蛋白的特征区域,且与鸢尾、玉米、烟草等植物COMT的同源性大于60%。将LrCOMT基因连接到原核表达载体pET-29a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)的原核表达结果显示,重组蛋白受IPTG诱导表达,分子量大小约为40kD,与已报道的其他植物COMT大小基本一致。

精神分裂症攻击行为与儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性

目的研究中国昆明地区汉族人群儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因Val158Met多态性与精神分裂症攻击行为的相关性。方法采用外显攻击行为量表(OAS)测量88例符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSMⅣ)和中国精神障碍分类与诊断标准第3版(CCMD3)的精神分裂症患者;并应用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)的方法检测他们的COMT基因多态性。结果攻击行为患者与无攻击行为患者各基因型及基因型频数分布无显著差异;但分性别后发现:有攻击行为男性患者与无攻击行为男性患者等位基因频率比较有显著性差异(P<0.05),将158Met作为危险因素,OR值等于4.55,95%CI为1.36～15.19。而有、无攻击行为的女性患者间的等位基因频数比较无显著差异(P>0.05)。结论COMTVal158Met基因多态性与精神分裂症的攻击性行为有关,中国昆明地区的男性患者的低活性等位基因与攻击性行为显著相关联。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与精神分裂症关联分析

目的 探测中国汉族人儿茶酚O 甲基转移酶(COMT)基因第 108位密码子由缬氨酸到甲硫氨酸突变的多态性与精神分裂症的关系。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)技术,检测 309例精神分裂症患者(患者组)和 367名正常人(对照组)的COMT基因多态性。结果(1)患者组COMT等位基因A频率(23. 78% )低于对照组( 30. 93% ),等位基因G频率 (76. 22% )高于对照组(69. 07% ),差异均有非常显著性(P=0. 003)。按性别比较,等位基因A和G频率在两组男性之间的差异均具显著性(P=0. 02),而两组女性间的差异则不具显著性(P=0. 073)。(2)COMT基因A/A基因型频率两组的差异无统计学意义(P=1. 000, P=0. 815).患者组及其男性和女性的A/G基因型频率(分别为 39. 80%、40. 75%和 39. 35% )均低于对照组(分别为 53. 68%、55. 76%和 51. 98% );P=0. 000,P=0. 006,P=0. 018。患者组及其男性和女性的G/G基因型频率(分别为 56. 32%、57. 15%和 55. 48% )均高于对照组(分别为 42. 23%、41. 21%和 43. 07% );P=0. 000、P=0. 004和P=0. 020。结论 该结果提示,在我们研究的样本中COMT108Met多态性与精神分裂症关联。所以,不能排除中国汉人 22号染色体存在精神分裂症易患性基因的可能性。

首发抑郁障碍认知功能与儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性的关联分析

目的:探讨首发抑郁障碍认知功能与儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因多态性的关系。方法:应用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,检测40例首发抑郁障碍患者和40例健康志愿者COMT基因多态性分布,并进行神经心理学评估。结果:COMT等位基因与基因型频率在两组间差异无显著性(均P>0.05);患者组神经心理学测验成绩在COMT等位基因、基因型之间差异均无统计学意义(均P>0.05);患者组持续错误数与基因型A/A呈负相关(r=-0.351,P=0.026),与等位基因G呈正相关(r=0.351,P=0.026)。结论:首发抑郁障碍的认知功能的改变与COMT基因多态性可能存在相关性。

我国福建汉族人群儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性研究

目的:了解福建省汉族人儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)1947位点基因多态性分布,为探讨该基因多态性与疾病的相关性及对药物代谢影响提供遗传背景资料。方法:应用聚合酶链反应技术-限制性内切酶分析检测了166名福建汉族正常人的COMT基因1947位点多态性,并比较了不同人群之间的基因型与等位基因频率。结果:福建汉族人COMT1947位点基因型(GG,GA和AA)分布频率分别是58.4%,36.7%,4.8%。COMT1947位点等位基因频率G和A分别是77%和23%。福建汉族人COMT1947位点的基因型分布和等位基因频率同肯尼亚人、日本人、台湾地区汉族人群比较差异无显著性,与美国、英国、芬兰和东南亚人比较,差异有极显著性(P<0.01)。福建汉族人COMT的GG纯合型显著高于美国、英国、芬兰和东南亚人群;而AA纯合型显著低于美国、英国、芬兰和东南亚人群。结论:福建汉族人COMT1947位点基因多态性分布不同于某些地区的人群,具有种族差异。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因的3种单核苷酸多态性与精神分裂症及其认知功能的关系

目的:探讨基因的3种单核苷酸多态性与精神分裂症及其认知功能的相关性。方法:实验在济宁市中心血站分子生物学实验室完成。选取位于儿茶酚氧位甲基转移酶基因启动子区域的5’-启动子HindⅢ多态、外显子4的Val158Met多态和外显子6的BglⅠ多态作为研究的位点。利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态分析技术,在119例精神分裂症患者(2001-07/2003-07曾在山东省济宁医学院附属二院精神科住院患者)及52名正常对照人群中进行3个单核苷酸多态检测,比较患者组与对照组之间基因型分布及等位基因频率的差异。同时对精神分裂症患者的认知功能进行评定,口语流畅性测验要求受试对象分别说出食物、日常用品、人名、地名,各限时1min,以说出的总词汇数为统计指标。简易精神状况检查共30个小项,每项回答正确评1分,回答错误或答不知道评0分,以所得总分为统计指标,以1～24分为有认知功能障碍。并探讨不同基因型的认知功能情况。结果:患者组119例和对照组59人全部采集到血样并完成认知功能检查,均进入结果分析。①儿茶酚氧位甲基转移酶基因3个单核苷酸位点的基因分型:5’-启动子HindⅢ多态和外显子4Val158Met多态呈A/G多态、外显子6BglⅠ多态呈C/-多态;②患者组与对照组之间5’-启动子HindⅢ多态、外显子4Val158Met多态、外显子6BglⅠ多态3个多态的基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义(P均>0.05)。③患者组儿茶酚氧位甲基转移酶基因外显子4Val158Met多态与口语流畅性测验总词汇数相关,相关系数为-0.19,P<0.05。结论:儿茶酚氧位甲基转移酶基因的5’-启动子HindⅢ多态、外显子6BglⅠ多态可能与精神分裂症无关联;而外显子4Val158Met多态可能与精神分裂症认知功能有关,在其发病中起一定作用。

强迫症患者认知功能与儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性的关系

目的探讨强迫症(OCD)患者认知功能与儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因多态性之间的关联性。方法对88名OCD患者应用PCR及RFLP技术检测COMT基因的多态性;并采用威斯康星卡片分类测试(WCST)、连线试验A和B、韦氏积木拼图子测试测评所有患者的执行功能、注意和操作智商。结果 OCD患者COMT基因多态性频率分布符合Hardy-Weinberg平衡法则(χ2=0.00,P=0.99);患者的WCST测试,连线测试A和B以及韦氏积木拼图测试在G/G、G/A、A/A三个基因型组间均无显著性差异(P>0.05)。结论 OCD患者的执行功能、注意和操作智商可能并不会受COMT基因多态性的影响。

胎盘儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与子痫前期的关系

目的：探讨胎盘儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因rs4680、rs6269位点单核苷酸多态性（SNP）与子痫前期发病的关系。方法：选择2011年3月至2012年8月在南方医科大学附属深圳市妇幼保健院产科住院分娩的孕妇217例，其中子痫前期孕妇92例为子痫前期组，健康孕妇125例为对照组，收集两组孕妇产后胎盘组织，提取胎盘DNA，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）平台及MassARRAY-IPLEX技术对COMT基因rs4680及rs6269位点进行检测，分析其基因型及等位基因分布情况。结果：胎盘组织COMT基因rs4680位点基因型GG、GA、AA的基因型频率和G、A等位基因频率在子痫前期组与对照组之间的分布差异均无统计学意义（P〉0.05）。两组胎盘COMT基因rs6269位点GG、GA、AA3种基因型频率差异有统计学意义（P=0.019）；且G、A等位基因频率在子痫前期组和对照组分布差异有统计学意义（X2=6.382，P=0.012），A／GOR=1.707（95％CI=1.125～2.590）。胎盘COMTrs4680与rs6269单核苷酸多态性与孕妇血压无明显相关性。结论：胎盘COMTrs6269单核苷酸多态性与子痫前期发生相关，携带A等位基因是发生子痫前期的危险因素；胎盘COMTrs4680单核苷酸多态性与子痫前期发生无关。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与迟发性运动障碍的关联研究

目的 探讨广东地区汉族人群中儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因Val158／108Met多态性与抗精神病药物所致迟发性运动障碍（TD）及其严重程度的关系。方法采用病例．对照研究。检测87例伴有TD和92例无TD的精神分裂症患者COMT基因Val158Met多态性分布，采用异常不自主运动量表（AIMS）评定TD的严重程度。比较两组间基因型和等位基因频率的差异，并分析该多态性与TD严重程度的关系。结果COMT基因型（Val／Val，Val／Met，Met／Met）频率在TD组（0．40，0．49，0．10）与非TD组（0．53，0．36，0．11）之间差异无显著性（P〉0．05）；等位基因（Val，Met）频率在两组间（TD组0．65，0．35，非TD组0．71，0．29）差异无显著性（P〉0．05）；不同基因型的男性TD患者的AIMS总分差异存在显著性（P=0．011），Met／Met纯合子的AIMS总分[（9．16±4．60）分]显著高于Val／Val纯合子和Val／Met杂合子[（6．73±2．19）分,（5．84±1．89）分]。结论 COMT基因Val158Met多态性与迟发性运动障碍易感性之间不存在关联，但可能与男性TD患者的症状严重程度相关。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与单纯强迫症及共病双相障碍强迫症的关联分析

目的 探讨中国汉族人群中儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因多态性与单纯强迫症以及共病双相障碍强迫症之间的关系.方法 按美国《精神疾病诊断与统计手册》（DSM-Ⅳ）,对符合诊断标准的单纯强迫症患者（单纯强迫症组）86例、共病双相障碍的强迫症患者（共病组）76例和正常对照（正常对照组）120例分别应用聚合酶链式反应（PCR）及限制性片段长度多态性（RFLP）技术检测COMT基因的多态性,采用病例-对照的关联分析方法对3组基因型和等位基因频率进行分析.结果 3组COMT基因型符合Hardy-Weinberg平衡法则；COMT的基因型和等位基因频率分布在3组间差异无统计学意义（P＞0.05）；经性别分层后,3组中COMT基因型与等位基因频率的分布差异也无统计学意义（P＞0.05）.结论 COMT基因多态性与单纯强迫症及共病双相障碍的强迫症可能无关联.

儿童精神分裂症注意功能缺陷与儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性

目的:探讨儿童首发精神分裂症及其神经认知功能损害与儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因多态性的相关性。方法:应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术,检测77例儿童首发精神分裂症患者(简称患者组)和90名正常人(简称对照组)的COMT基因型,采用整合视听连续执行测验(IVA)评估25例儿童首发精神分裂症患者的注意功能、反应控制能力;比较分析儿童首发精神分裂症及其注意功能与COMT基因多态性的相关性。结果:两组COMT基因多态性的基因型频率差异无显著性(χ2=5.042,P=0.080),患者组的COMT基因的高活性等位基因缬氨酸(VAL)频率高于对照组,但差异无显著性(χ2=0.756,P=0.385);注意障碍组和非注意障碍组的COMT基因型频率分布两组之间的差异无显著性(χ2=0.818,P=0.366),注意障碍组和非注意障碍组的COMT基因的等位基因频率分布两组之间的差异无显著性(χ2=0.063,P=0.802)。结论:COMT基因可能不是儿童精神分裂症的易感基因,儿童精神分裂症注意功能缺陷与COMT基因可能不存在显著相关性。

重性抑郁症共病焦虑障碍与重性抑郁症的儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性研究

目的:探讨重性抑郁症共病焦虑障碍患者与重性抑郁症患者儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因多态性的差异。方法:应用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)技术,检测15例重性抑郁症共病焦虑障碍患者(研究组)和15例单纯诊断为重性抑郁症患者(对照组)的COMT基因多态性。结果:研究组患者与对照组患者相比,无论是等位基因A、等位基因G频率还是基因型A/A、A/G及G/G频率均无显著差异;只是在等位基因A频率上,研究组的男性患者(22.22%)显著高于对照组的男性患者(5.56%)。结论:抑郁与焦虑共病的基因多态性研究值得进一步深入研究。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与抑郁症症状表型的关联性研究

目的探讨中国汉族儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)基因多态性与抑郁症及症状表型的相关性。方法应用聚合酶链反应(PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法,检测抑郁症患者(患者组)和健康志愿者(对照组)COMT基因多态性分布。采用24项汉密尔顿抑郁量表(HAMD24)评定患者组的症状表型。结果COMT等位基因与基因型频率在患者组和对照组内均有显著性差异(χ2检验,P均<0.01),在两组间无显著性差异(χ2检验,P均>0.05);患者组COMT等位基因、基因型在HAMD24认知障碍因子分上均有显著性差异(F检验,P均<0.05);患者组基因型A/A与认知障碍(r=-0.210,P=0.036)、绝望感(r=-0.331,P=0.001)均呈负相关;等位基因A与绝望感呈负相关(r=-0.220,P=0.028);等位基因G与认知障碍(r=0.210,P=0.036)、绝望感(r=0.331,P=0.001)均呈正相关。结论提示COMT基因多态性与抑郁症症状表型可能相关。

儿茶酚氧位甲基转移酶基因Val/Met及Ala22/72Ser多态性对无抽搐电休克治疗精神分裂症患者认知功能的影响

目的探讨儿茶酚氧位甲基转移酶基因Val/Met、Ala22/72Ser多态性对无抽搐电休克治疗精神分裂症患者认知功能的影响.方法检测50例精神分裂症患者的基线儿茶酚氧位甲基转移酶基因Val/Met、Ala22/72 Ser多态性,并予以无抽搐电休克治疗,于治疗前后进行认知功能测评及神经心理测验,比较治疗前及治疗后不同基因型患者认知功能及神经心理测验结果的差异.结果治疗后入组患者P300潜伏期N1较治疗前显著缩短(P<0.05),波幅P3较治疗前显著增高(P<0.05),波幅P2与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05);颜色连线、Stroop测验的单词、颜色、色词及威斯康星卡片分类测验的正确应答数、持续错误数、概念化应答数均较治疗前显著改善(P<0.05或0.01).治疗前及治疗后,Val/Met、Ala22/72 Ser不同基因型患者P300及神经心理测试结果比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论无抽搐电休克治疗对精神分裂症患者的认知功能有改善作用,但在儿茶酚氧位甲基转移酶Val/Met、la22/72 Ser不同基因型患者认知功能改善方面无明显差异.

抑郁症状可以调节儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性对疼痛的影响

儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）是一种儿茶酚胺的催化酶，可以调节多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的水平。目前，已有研究证实COMT基因变异与颞下颌关节紊乱病（TMD）疼痛有关，心理因素诸如人际冲突、生活压力和抑郁与疼痛症的发生、严重性和长期性有关。

强迫症患者儿茶酚氧位甲基转移酶基因表达的研究

目的探讨汉族人群中外周血儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因表达与强迫症的关系。方法采用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术检测35例强迫症首次发病患者（强迫症组）与31名健康对照（对照组）外周血COMT基因表达水平；使用美国精神障碍诊断与统计手册第4版轴Ⅱ诊断结构式临床访谈问卷（SCID-Ⅱ）评估强迫症与强迫性人格障碍的共病情况。结果强迫症组COMT基因表达水平明显低于对照组（t=2．56，P〈0．05），下调约32％；无强迫人格患者（15例）与对照组间COMT基因表达水平的差异有统计学意义（t=2．41，P〈0．05），而伴强迫人格患者（20例）与对照组的差异无统计学意义（t=1．50，P〉0．05）；伴强迫人格与无强迫人格的强迫症患者COMT基因表达水平分别下调14％和56％；COMT表达水平与症状严重度无显著相关（r=0．09，P〈0．05）。结论COMT基因表达下调可能与强迫症发病有关；伴或无强迫人格患者的遗传机制可能存在差异。

注意缺陷多动障碍执行功能与儿茶酚胺氧位甲基转移酶基因的关联分析

目的探讨注意缺陷多动障碍(attention-deficit hyperactivity disorder,ADHD)执行功能与儿茶酚胺氧位甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase,COMT)基因rs4680多态性位点的关系。方法采用威斯康星分类测验(Wisconsin card sorting test,WCST)对114例符合美国精神障碍诊断与统计手册第四版(mental disorders versionⅣ,DSM-Ⅳ)诊断标准的ADHD儿童与76名正常对照组进行执行功能评估,并应用限制性片段长度多态性的方法进行COMT基因rs4680多态性位点分析。结果 ADHD组的WCST总应答数、完成第一个分类所需应答数和持续性应答数均明显高于正常对照组(P<0.05),而完成分类数明显低于正常对照组(P<0.01)。ADHD患者中不同基因型组之间WCST概念化水平百分数差异具有统计学意义(P=0.01),A/A组高于G/A组和G/G组(P<0.05),G/A组也高于G/G组但无统计学意义(P>0.05)。不同基因型组间WSCT其他指标的差异均无统计学意义(P≥0.05)。ADHD组和正常对照组之间COMT基因rs4680多态性基因型及等位基因的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论本研究未发现COMT基因rs4680多态性与ADHD存在关联,但rs4680多态性可能与ADHD的某些执行功能指标有关。

首发精神分裂症患者及其亲属的P_(300)与儿茶酚氧位甲基转移酶基因的相关性研究

我们以首发精神分裂症患者及其一级亲属为研究对象,论证P300作为精神分裂症遗传标记的可能性.

儿茶酚氧位甲基转移酶基因多态性与心境障碍的关联研究

目的 探讨中国汉族人 2 2号染色体儿茶酚O 甲基转移酶 (COMT)基因与心境障碍(MD)的关系。方法 应用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术 ,检测 90例MD患者 (患者组 )、90名正常人 (对照组 )及 5个MD高发家系 (共 2 5名成员 )的COMT基因多态性 ;用改进的传递 /不平衡 (TDT)方法分析 5个高发家系COMT基因与MD的关系。结果 (1)患者组COMT等位基因A频率 (2 2 78% )低于对照组 (35 0 0 % ) ,等位基因G频率 (77 2 2 % )高于对照组 (6 5 0 0 % ) ,差异均有非常显著性 (P =0 0 1)。按性别比较 ,等位基因A和G频率在两组男性之间的差异均无显著性 (P =0 10 ) ,而两组女性间的差异则具显著性 (P <0 0 5 )。 (2 )COMT基因A/A基因型频率两组的差异无统计学意义 (P =0 73) ;但患者组及其男性和女性的A/G基因型频率 (分别为 34 4 4 %、33 33%和 35 5 6 % )均低于对照组 (分别为 6 1 11%、6 0 0 0 %和 6 2 2 2 % ;P =0 0 0 ) ;患者组及其男性和女性的G/G基因型频率(分别为 6 0 0 0 %、6 0 0 0 %和 6 0 0 0 % )均高于对照组 (分别为 34 4 4 %、35 5 6 %和 33 33% ;P =0 0 0、P=0 0 2和P =0 0 1)。 (3)用TDT方法分析 ,5个MD高发家系COMT基因与MD存在关联 (P =0 0 4 )。结论 MD患者组与正常对?