早发型重度子癎前期母体子宫动脉及胎儿血流动力学的研究

目的通过观察分析早发型重度子癎前期母儿血液动力学变化特点,结合其母儿预后, 进一步探讨母儿血流动力学监测在早发型重度子癎前期的临床诊治及预后估计中的应用价值。方法采用前瞻性病例-对照研究方法,应用彩色多普勒超声对36例早发型重度子癎前期和72例正常同期孕妇进行血液动力学有关参数测定(包括UA-S／D,UA-PI、MCA-S／D、MCA-PI、UtA-S／D、UtA- PI),并结合其预后进行统计分析。结果在早发型重度子癎前期组和正常妊娠组,胎儿UA、MCA 血流及孕妇UtA血流的S／D、PI值均随着妊娠的进展,呈逐渐下降的趋势,早发型重度子癎前期的 UA-S／D,UA-PI,UtA-S／D,UtA-PI比正常妊娠时明显增高(P<0．05),而MCA-S／D和MCA-PI 在妊娠33周前则比正常妊娠组降低,妊娠33周后有显著性差异。当早发型重度子癎前期出现母胎血流动学变化时,围产儿不良结局的发生率高于正常妊娠组。本研究中有7例胎儿产前出现脐动脉舒张末期血流缺如(AEDV),全部合并FGR,围产儿死亡6例。结论母胎血流动学参数在早发型重度子癎前期时常发生明显的改变,并与不良的围产儿结局有关,AEDV的出现意味着胎儿循环已出现或临近失代偿阶段,警示预后不良。

维生素E对子痫前期血清诱导人脐静脉内皮细胞VCAM-1表达及NF-KB活性的影响

目的探讨子痫前期（pre-eclampsia，PE）血清诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vascular endothelial cell，HUVEC）血管内皮细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecules-1，VCAM-1）的表达、核因子-kB（nuclear factor kappa B，NF-kB）活性及维生素E（vitamin E，VitE）对其的影响。方法采用胰酶消化培养法培养正常妊娠HUVEC，传代后待细胞长满至70％～80％，加或不加Vit E作用30min后分别加入正常妊娠及PE血清，培养2h，Western印迹法测定细胞胞浆核因子kB抑制因子（inhibit I kappa B，I-kB）、胞核NF-kB p65含量；培养48h，MTT测定细胞活力，流式细胞学测定细胞凋亡，酶联免疫法测定HUVEC和VCAM-1的表达。结果PE血清培养的HUVEC胞浆I-kB含量明显低于对照组，胞核NF-kBp65含量、VCAM-1的表达、细胞凋亡率明显高于正常妊娠组（P〈O．05），细胞活力明显低于对照组（P〈0．05）。加Vit E预处理后：PE组HUVEC胞浆I-kB含量明显增加；胞核NF-kB p65含量、VCAM-1的表达、细胞凋亡率明显下降（P〈0．05），细胞活力明显增加（P〈O．05）。结论PE血清可促进HUVEC NF-kB活性及VCAM-1的表达，Vit E可抑制PE患者血清诱导HUVEC的NF-kB活性及VCAM-1的表达。

重度子痫前期和正常妊娠胎盘中微小RNA-155及富含半胱氨酸蛋白61的差异表达

目的探讨微小RNA-155（microRNA-155，miR-155）和富含半胱氨酸蛋白61（cysteine—rich61，CYR61）在重度子痢前期和正常妊娠胎盘中差异表达的意义。方法取18例重度子痫前期患者（孕36～40周）胎盘和同期分娩且孕周匹配的18例正常产妇胎盘，从mRNA水平检测miR-155和CYR61mRNA的表达情况，并在蛋白水平检测CYR61的表达情况。结果与正常产妇胎盘相比，重度子痢前期组胎盘的miR-155表达水平明显增高（165．7±16．4和527．9±49．1，t=7．00，P〈0．01）；而CYR61mRNA表达水平及蛋白表达水平均降低（31．7±2．7和16．4±1．2，t=5．10，P〈0．01；36．4±1．5和19．7±1．2，t=36．26，P〈0．01）。重度子痢前期和正常妊娠胎盘组织中的miR-155与CYR61mRNA的检测结果的相关性分析显示，两组内两者表达均呈负相关（r=-0．52，P〈0．05；r=-0．57，P％0．05）。结论重度子痢前期患者胎盘中miR-155的上调，可能与促血管生成因子——CYR61的表达下降有关。miR-155、CYR61可能共同参与了子痂前期胎盘血管缺陷的发生。

重度子癎前期患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体靶抗原PR3和MPO的表达

目的探讨重度子癎前期患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplas- mic autoantibodies,ANCA)两种主要靶抗原蛋白酶3(protein3,PR3)和髓过氧化物酶(myeloperoxi- dase,MPO)的表达与子癎前期发病的关系。方法用抗原特异性酶联免疫吸附法(ELISA)测定 31例重度子癎前期和31例同期正常孕妇(对照组)血清中的PR3和MPO。结果 (1)重度子癎 前期组PR3(+)者占25．8％(8／31),高于对照组的9．7％(3／31),但两组比较无统计学差异(X2= 2．763,P>0．05);重度子癎前期组MPO(+)占25．8％(8／31),对照组占19．4％(6／31),两组比较无统计学差异(X2=0．369,P>0．05)。(2)重度子癎前期组ANCA(+)者和ANCA(一)者比较各母儿并发症发生率无统计学差异,但肾功能不全患者共4例均发生于ANCA(+)者。结论 ANCA 可能与子癎前期的肾脏病变有关,是否参与子癎前期的发病机制还有待于进一步研究。

腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin和可溶性血管内皮生长因子受体-1重组蛋白的构建和功能初步鉴定

目的构建腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin（sEng）和可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）重组蛋白，观察其对内皮细胞管化及滋养细胞迁移的影响。方法提取小鼠胎盘组织总RNA，通过RT—PCR获得sEng和sFlt-1 cDNA，插入到穿梭载体pAdTrack—CMV中，获得pATC-sEng和pATC—sFh-1质粒，转化其至pAdeasy-1受体菌，选阳性克隆转染293A细胞，获得Ad／sEng和Ad／sFlt-1，制备高滴度病毒液。用病毒感染COS7细胞，检测sEng和sFlt-1蛋白表达，并通过成管和划痕实验观察两种蛋白对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）管化和Bewo细胞迁移的影响。结果成功获得sEng和sFlt-1重组腺病毒，其滴度分别为2．2×10^11pfu／ml和2．0X10^11pfu／ml。感染COS7细胞后，sEng和sFlt-1蛋白均较高表达，并能抑制HUVEC管化及Bewo细胞迁移，两者有协同作用。结论构建的腺病毒介导的小鼠sEng和sFlt-1重组蛋白对血管生成和滋养细胞迁移有明显抑制作用。