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cGAS/STING信号通路参与猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞产生Ⅰ型干扰素
1
作者
陈洪博
李凤
+4 位作者
赖文琰
方宇豪
江铭涌
段滇宁
杨小燕
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第9期3201-3210,共10页
为研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)分泌Ⅰ型干扰素信号通路,以PCV2病毒感染PAMs为研究对象,采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELI...
为研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)分泌Ⅰ型干扰素信号通路,以PCV2病毒感染PAMs为研究对象,采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量PCR和Western blotting,分析PCV2感染对PAMsⅠ型干扰素的诱导、cGAS/STING信号通路相关基因mRNA和蛋白表达的影响,并应用靶向cGAS和STING特异性si RNA、抑制剂BX795和BAY 11-7082,解析cGAS、STING、TBK1和NF-κB/P65在PAMs生成Ⅰ型干扰素中的作用。结果显示,PAMs感染PCV2病毒48 h后Ⅰ型干扰素的表达量显著升高(P<0.05),cGAS mRNA的表达量在感染48 h和72 h后显著升高(P<0.01),STING mRNA表达量在PCV2感染72 h后显著上升(P<0.01),TBK1mRNA、IRF3 mRNA感染48 h后显著升高(P<0.01)。PCV2能够显著升高PAMs胞浆STING、TBK1和IRF3蛋白含量,降低胞浆NF-κB/p65的含量,促进NF-κB/p65和IRF3入核。敲低PAMs中cGAS或STING表达水平后,PCV2感染PAMs 48 h后,Ⅰ型干扰素的表达水平显著下降(P<0.01);BAX795抑制TBK1后,PCV2感染PAMs48 hⅠ型干扰素的表达水平显著下降(P<0.01),BAY 11-7082抑制NF-κB/P65表达后,PCV2感染PAMs 48 hⅠ型干扰素的表达量与PCV2组相比无显著性差异(P>0.05)。结果表明,PAMs感染PCV2后通过cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路诱导Ⅰ型干扰素分泌。
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关键词
猪圆环病毒2型
猪肺泡巨噬细胞
Ⅰ型干扰素
先天性免疫信号通路
原文传递
题名
cGAS/STING信号通路参与猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞产生Ⅰ型干扰素
1
作者
陈洪博
李凤
赖文琰
方宇豪
江铭涌
段滇宁
杨小燕
机构
龙岩学院生命科学学院
福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第9期3201-3210,共10页
基金
福建省科技重大专项(No.2019NZ09005)
中央引导地方科技发展专项项目(No.2019L3011)
+1 种基金
福建省自然科学基金(Nos.2018J01461,2019J01803)
大学生创新创业训练项目(No.202011312054)资助。
文摘
为研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)分泌Ⅰ型干扰素信号通路,以PCV2病毒感染PAMs为研究对象,采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量PCR和Western blotting,分析PCV2感染对PAMsⅠ型干扰素的诱导、cGAS/STING信号通路相关基因mRNA和蛋白表达的影响,并应用靶向cGAS和STING特异性si RNA、抑制剂BX795和BAY 11-7082,解析cGAS、STING、TBK1和NF-κB/P65在PAMs生成Ⅰ型干扰素中的作用。结果显示,PAMs感染PCV2病毒48 h后Ⅰ型干扰素的表达量显著升高(P<0.05),cGAS mRNA的表达量在感染48 h和72 h后显著升高(P<0.01),STING mRNA表达量在PCV2感染72 h后显著上升(P<0.01),TBK1mRNA、IRF3 mRNA感染48 h后显著升高(P<0.01)。PCV2能够显著升高PAMs胞浆STING、TBK1和IRF3蛋白含量,降低胞浆NF-κB/p65的含量,促进NF-κB/p65和IRF3入核。敲低PAMs中cGAS或STING表达水平后,PCV2感染PAMs 48 h后,Ⅰ型干扰素的表达水平显著下降(P<0.01);BAX795抑制TBK1后,PCV2感染PAMs48 hⅠ型干扰素的表达水平显著下降(P<0.01),BAY 11-7082抑制NF-κB/P65表达后,PCV2感染PAMs 48 hⅠ型干扰素的表达量与PCV2组相比无显著性差异(P>0.05)。结果表明,PAMs感染PCV2后通过cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路诱导Ⅰ型干扰素分泌。
关键词
猪圆环病毒2型
猪肺泡巨噬细胞
Ⅰ型干扰素
先天性免疫信号通路
Keywords
porcine circovirus type 2
porcine alveolar macrophages
typeⅠinterferon
innate immune signaling pathway
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
cGAS/STING信号通路参与猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞产生Ⅰ型干扰素
陈洪博
李凤
赖文琰
方宇豪
江铭涌
段滇宁
杨小燕
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
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