先天性纤维蛋白原缺陷症分子诊断及基因治疗的研究进展

先天性纤维蛋白原缺陷症是罕见的以凝血功能障碍为主要特点的血液疾病,多有出血、血栓形成等临床表现,实验室检查可发现凝血功能异常,既往以临床诊断为主要方式。近年来随着分子遗传学和分子诊断的进步与发展,致病机制研究不断深入,突变基因及新的突变位点陆续被发现,分子诊断逐步成为诊断该病的主要标准,基因治疗作为目前前沿的方案,对该病的治疗仍处于起步阶段。通过对该罕见病三种致病基因(FGA、FGB、FGG)及相应突变方式及致病机制进行归纳总结,探究目前该病基因治疗的研究进展,以提升大众对于此病的关注。

先天性低纤维蛋白原血症消化道大出血1例

病例患儿,男,29小时。因血便2.5小时由产科转人儿科。为第一胎足月顺产,无窒息,母乳喂养,已排正常胎粪两次。生后26小时半时始解鲜红色血便两次,约40ml,无呕叶发热,其余部位无出血表现。肌注维生素 K_15mg 及止血敏。

FGA基因c.104G>A杂合突变导致的先天性低纤维蛋白原血症家系的基因分析

目的通过对1例先天性低纤维蛋白原血症患者家系的基因分析,探讨先天性纤维蛋白原血症的发生机制。方法采集先证者及其家系成员的外周血,进行凝血相关项目以及肝肾功能的检测,PCR扩增先证者FGA、FGB、FGG的全部外显子及其侧翼序列、5'和3'非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,PCR产物纯化后直接测序,寻找突变位点,以反向测序验证所发生的突变;采用生物信息学工具分析该突变对蛋白质的影响。结果先证者及其父亲Fg:C、TT明显异常,而Fg:Ag水平均在正常参考范围,家系其他成员凝血指标均正常;基因测序结果显示本家系存在FGA基因第2外显子c.104G>A的错义突变(密码子CGT→CAT,即精氨酸突变为组氨酸),生物信息学软件预测结果表明,该突变的发生具有致病性。结论导致本家系成员低纤维蛋白原血症的分子机制是FGA基因Arg16His杂合突变。

新型FGG基因突变导致遗传性纤维蛋白原缺陷症的研究

目的:对临床发现的1例遗传性纤维蛋白原缺陷症患者及其家属进行凝血相关指标检测和基因型分析,并探讨可能的分子发病机制。方法:采集先证者及其家属共4人的外周血,检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体及8项凝血因子指标。对编码纤维蛋白原3条肽链的FGA、FGB和FGG基因的所有外显子和侧翼序列进行测序并进行生物信息学分析。结果:先证者及其长姐的8项凝血因子中FⅤ、FⅧ稍高,TT明显延长,Fg明显降低;测序结果显示FGG基因存在c.901C>T杂合突变。生物信息学分析显示,突变改变了原有的蛋白结构,减少了氢键数目。结论:纤维蛋白原γ链c.901C>T杂合突变是引起该家系遗传性纤维蛋白原缺陷的主要原因,该突变是首次在国内外报道。

一个家族性多囊肾伴纤维蛋白原缺陷症家系的基因诊断、临床特征及文献回顾

目的:分析一个家族性多囊肾伴纤维蛋白原缺陷症家系的基因诊断及相关临床表现,研究其发病机制并为临床治疗提供指导。方法:将患者外周血样本中分离出基因组DNA,进行全外显子组测序,Sanger法对多囊肾病1(polycystic kidney disease 1,PKD1)和纤维蛋白原β链(fibrinogen beta chain,FGB)基因突变结果进行验证。肾脏超声检查多囊肾,Clauss法检测血浆纤维蛋白原活性,免疫比浊法检测血浆纤维蛋白原抗原。检索国内外2种疾病相关的文献并进行分析总结。结果:PKD1在第15外显子发生c.6586C>T,p.Q2196X杂合无义突变,FGB在第2外显子发生c.130C>T,p.R44C杂合错义突变。患者超声结果诊断为多囊肾,纤维蛋白原抗原正常(2.3 g/L)、活性降低(1.25 g/L)。文献检索结果显示2种突变在国外均有报道,在国内首次报道。结论:PKD1 p.Q2196X和FGB p.R44C杂合突变分别导致该患者的多囊肾和异常纤维蛋白原血症。目前临床表型主要由多囊肾引起,应以多囊肾治疗为主,定期随访,保护肾功能。

家族遗传性异常纤维蛋白原血症家系的基因型分析

遗传性无纤维蛋白原血症（inheritdafibrinogenemia）是一种纤维蛋白原基因缺陷引起的常染色体隐性遗传疾病,患者表现为纤维蛋白原完全缺乏,发病率大约为百万分之一。与血友病相比,遗传性无纤维蛋白原患者黏膜出血较严重,但肌肉和骨骼的出血不如血友病常见[1]。第一例异常纤维蛋白原血症基因突变发现于1968年[2],目前国内外共发现了约400多例遗传性异常纤维蛋白原血症。

遗传性无纤维蛋白原血症分子机制的研究进展

遗传性无纤维蛋白原血症是一种由于纤维蛋白原基因缺陷所致的常染色体隐性遗传性疾病。引起该病的突变皆为纯合突变或复合杂合突变,其中FGA基因IVS4+1G>T剪接突变为其突变热点。但无论何种突变都可引起纤维蛋白原基因的异常表达,从而造成血浆中纤维蛋白原缺如,最终导致无纤维蛋白原血症的临床表现。本文对近年来该病分子机制的研究进展作一综述。

遗传性异常纤维蛋白原血症及其治疗

遗传性异常纤维蛋白原血症（congenital dysfibrinogenemia，CD）是由纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）编码基因缺陷导致№分子结构与功能异常的遗传性疾病。该病可表现为无症状、出血、血栓或出血与血栓并存，其多样化的临床表现给其治疗带来困难。我国由于实验室检测Fg方法单一，易导致CD误诊或漏诊；近几年来，通过应用两种方法测定Fg活性及其抗原浓度，

1例新型FGA基因纯合突变导致的遗传性纤维蛋白缺陷症家系分析

纤维蛋白原(FIB)是一个由Aα链,Bβ链和γ链3对多肽链组成的,由29个链间二硫键连接而成的相对分子质量为340×10^(3)的糖蛋白。3条肽链分别由FIB α链(FGA)、FIBβ链(FGB)和FIBγ链(FGG)3个同源基因编码^([1])。遗传性FIB缺陷症(CFD)主要分为Ⅰ型和Ⅱ型两种类型,Ⅰ型为FIB数量减少,包括低纤维蛋白血症和无纤维蛋白血症;Ⅱ型则为患者血浆中FIB数量正常或减少,但活性水平不成比例的显著降低.

FDA批准纤维蛋白原浓缩液上市

FDA批准CSL Behring公司的纤维蛋白原浓缩液（RiaSTAP）上市，这是首个和迄今惟一用于治疗先天性纤维蛋白原缺陷（包括纤维蛋白原缺乏血症和低纤维蛋白原血症）患者急性出血的药物。先天性纤维蛋白原缺乏十分罕见，罹患本病者约为百万分之一，但其却是具有潜在致死危险的出血性疾病。本品尚不适用于其他异常纤维蛋白原血症。

FGG基因c.1073C>A突变致新生儿先天性纤维蛋白原缺乏症临床分析并文献复习

目的探讨编码纤维蛋白原(Fg)γ多肽链基因-FGG突变,所致新生儿先天性纤维蛋白原缺乏症(CA)的临床及遗传学特点。方法选择2021年5月,青岛大学附属医院新生儿科诊治的1例CA新生儿为研究对象,回顾性分析其临床病例资料。采用单基因病高通量测序技术,检测本例患儿外周血FGG基因,患儿父母进行特定基因位点的Sanger法测序,以明确患儿基因突变来源。对中国知网数据库、万方数据知识服务平台及PubMed数据库中,关于新生儿期起病的FGG基因突变所致CA病例进行检索,总结CA新生儿的临床及遗传学特点。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。监护人对患儿的诊治知情同意,并签署临床研究知情同意书。结果①临床资料:本例患儿系女性,生后11.7 h时,因"发现面部淤斑4 h"入院,无发热,不伴其他部位出血等。除面部淤斑外,体格检查无异常。入院时凝血常规检查结果异常,主要为抗凝血酶Ⅲ与血浆Fg含量均较正常值低,分别为31.0%与0.18 g/L;凝血酶原时间与凝血酶时间均较正常值延长,分别为22.3 s与24.0 s。同时,患儿母亲于分娩前发现血浆Fg减少(为0.52 g/L),不伴出血症状。②本例患儿及其母亲外周血检出FGG(4q28|NM_000509.4)基因exon 8:c.1073C>A p.(Ser358Tyr)错义突变、杂合突变,患儿该突变来自其母亲。该突变位点在人类基因变异数据库(HGMD)等基因库中目前未见收录,亦未见文献报道,生物信息学软件预测其有致病可能。③经静脉输注冷沉淀治疗后,患儿症状好转出院,出院诊断为新生儿CA,低出生体重儿。对本例患儿随访至5个月龄,无出血表现。④文献检索结果:仅发现3例新生儿期起病的FGG基因突变所致CA患儿。其中,患儿1、2(患儿1缺乏详细描述,患儿2为女性,诊断时为10 d龄)为FGG基因缺失/移码突变(均为纯合子)所致CA,FGG基因突变分别为g.194delA、c.1096delC,临床症状为脐带断端出血和(或)关节腔积血。患儿3为男性,来自一个CA家系(母亲FGG基因突变纯合子,为先证者),患儿3基因检测为FGG基因c.1073C>G错义突变(杂合子),并且仅表现为轻度出血。结论新生儿期起病的CA患儿目前被报道较少,临床对该病认识尚不足。通过Fg相关基因检测对该病进行早期诊断,可预防危及其生命的成年期创伤、术后严重出血等。

先天性低纤维蛋白原血症合并妊娠二例

一、病例摘要病例1：患者28岁,因孕35＋1周,羊水少2 d入河北省人民医院。入院查凝血四项：纤维蛋白原含量（FBI）：0.85 g/L,凝血酶凝结时间（TT）：27.7 s,凝血酶原时间（PT）：11.8 s,部分活化凝血活酶时间（APTT）：26 s,血浆D-二聚体0.29 mg/L;复查凝血四项：FBI 0.79 g/L,TT27.5 s,PT 12.1 s,APTT 25.9 s;生化全项、产科彩超未见异常。查患者母亲及弟弟纤维蛋白原均1.0 g/L。

146例先天性纤维蛋白原病的基因突变谱及纤维蛋白原输注药代动力学分析

目的探讨先天性纤维蛋白原病的基因突变类型与分型、临床表现、实验室检查、诊断及纤维蛋白原替代治疗情况。方法对2003年4月至2020年11月就诊于中国医学科学院血液病医院的146例先天性纤维蛋白原病患者进行回顾性分析。结果146例患者中,男61例(41.8%),女85例(58.2%),就诊时中位年龄为33.5岁;共采集到98例患者的临床症状学信息,34例(34.7%)因出血症状而就诊,33例(33.7%)因手术前检查而确诊,55例(56.1%)患者至少有1次出血,42例(42.9%)无出血表现。纤维蛋白原活性(FIB∶C)与ISTH-BAT出血评分之间呈负相关(rs=-0.412,P<0.001)。在56例患者中检出34种基因突变(包括新突变16种),其中84.1%为错义突变,FGA外显子2和FGG外显子8突变占全部突变位点的71.4%。无纤维蛋白原血症患者(7例)中位年龄为2(1~12)岁,ISTH-BAT评分为4分;异常纤维蛋白原血症患者(50例)中位凝血酶时间为28.5(19.2~36.6)s。输注纤维蛋白原后1 h、24 h的活性回收率(IVR)分别为(127.19±44.03)%、(101.78±43.98)%。输注纤维蛋白原后,FIB∶C明显提升,凝血酶时间及凝血酶原时间明显下降,用药24 h后凝血酶时间较基线平均下降(15.2±12.1)%。结论多数先天性纤维蛋白原缺乏症患者症状轻微或无症状;无纤维蛋白原血症患者出血症状较为严重,FIB∶C与出血程度之间存在负相关;基因检测有助于疾病分型诊断;FIB∶C/纤维蛋白原抗原(FIB∶Ag)比值<0.7可作为临床分型依据。凝血酶时间可作为异常纤维蛋白原血症诊断及纤维蛋白原替代治疗的疗效判定依据。

新生儿先天性无纤维蛋白原血症1例

本文报道1例以脐带出血为首发表现的先天性无纤维蛋白原血症患儿,凝血功能明显异常,压迫止血无效,予局麻下缝合止血后出院,8 d后因“左前臂大片淤青”再次入院,基因检测发现FGA基因5号外显子c.744del(p.Trp*)发生无义变异,最终明确诊断。

FGA基因c.1368delC纯合框移突变致先天性无纤维蛋白原血症1例

先天性无纤维蛋白原血症主要表现为反复的出血包括脐部出血、青紫、鼻出血、牙龈出血、脾出血、肝出血、胃肠道或泌尿生殖道出血等。本案例患者出生后反复出血、反复低纤维蛋白原血症,经过先天性无纤维蛋白原血症基因筛查及家系验证提示患儿系FGA基因,核酸突变c.1368delC纯合框移变异,氨基酸突变p.T457Rfs*27。其父母均携带该位点杂合框移变异。后患儿出现肺出血,但无相关临床症状与体征,经过布地奈德福莫特罗粉吸入剂早晚两次雾化吸入治疗1个月后,肺部出血病灶明显吸收。

十例遗传性纤维蛋白原缺陷症的分子发病机制与临床表型分析

目的探讨10例遗传性纤维蛋白原（fibrinogen，Fg）缺陷症先证者的基因突变类型与临床特性。方法检测凝血酶原时间、凝血酶时间、Fg活性和Fg抗原等指标以明确诊断；PCR法扩增先证者Fg基因的所有外显子区域及其侧翼序列，产物纯化后直接测序，寻找突变位点，并反向测序证实。结果10例遗传性纤维蛋白原缺陷症先证者Fg活性为0．52～0．91g／L，Fg抗原0．62～2．98g／L。5例先证者属于Ⅰ型缺陷，5例属于Ⅱ型缺陷，共发现7种基因突变类型，6种发生在D区，1种发生在E区，均为点突变。其中γThr277Arg、γAsp316His、γTrp208Leu和γLys232Thr四种突变为国际首次报道，aArg19Ser为国内首次报道，有4例均发生在7Arg275位点。10例遗传性纤维蛋白原缺陷症患者中，Ⅰ型缺陷患者临床表型为轻型、中型或无症状，Ⅱ型缺陷患者临床表型为中型或重型。同为Arg275Cys突变的患者临床表现不一致。结论γ链D区是本地区Fg基因较易发生突变的区域，Arg275为本地区突变热点。纤维蛋白原基因突变的位点与临床表型无绝对相关性。