脑心肌炎病毒先导蛋白结构与功能研究进展

脑心肌炎病毒(EMCV)可感染人和多种动物,其基因组先导蛋白编码区是比较保守的区域之一,含有两种高度保守的功能域,即锌指基序和酸性结构域。研究表明,先导蛋白基因组具有一定的容纳外源基因片段的能力,同时先导蛋白与病毒复制、干扰素产生以及细胞凋亡等均有关系。论文综述了EMCV先导蛋白结构与功能的研究进展。

稳定表达脑心肌炎病毒先导蛋白N_2a细胞系的建立与鉴定

为建立稳定表达脑心肌炎病毒先导蛋白的N_2a细胞系,本研究应用脂质体介导DNA转染法,将表达脑心肌炎病毒(EMCV)先导(L)蛋白的重组质粒pNTAP-B-L转染至N_2a细胞中,通过筛选G418抗性单克隆细胞,建立能够稳定表达融合蛋白TAP tag-L的N_2a细胞系;利用免疫印迹试验(Western blotting)和间接免疫荧光试验(IFA)对融合蛋白TAP tag-L的表达及细胞内定位情况进行鉴定检测。结果表明EMCV的L基因已经整合进N_2a细胞基因组DNA中且L蛋白在获得的阳性N_2a细胞中稳定表达,表达产物TAP tag-L主要分布在细胞浆内。建立的稳定表达L蛋白的N_2a细胞系,为进一步研究先导蛋白功能及EMCV感染过程中与宿主细胞(N_2a)相互作用蛋白的筛选奠定了基础。

地鳖纤溶蛋白对荷S_(180)和H_(22)小鼠的抑瘤作用研究

目的研究地鳖虫纤溶活性先导蛋白(EFP)对荷S180和H22小鼠肿瘤的抑制作用。方法通过体外实验,构建荷瘤小鼠模型,药物实验分为阳性对照组(环磷酰胺),阴性对照组(生理盐水),药物高浓度组、中浓度组和低浓度组。实体瘤通过瘤重计算抑瘤率,腹水瘤通过细胞浓度计算抑瘤率。结果 EFP对S180腹水瘤有较好的抑制率,药剂量为2.90mg/kg的抑制率为69.56%,明显高于环磷酰胺(20mg/kg)的51.75%的抑制率;EFP对S180实体瘤有较好抑制作用,药剂浓度为1.45g/kg时,抑制率为37.48%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的35.59%的抑制率,并呈现一定的药物剂量依赖性;药剂浓度为0.73mg/kg时,对H22实体瘤抑瘤率为41%,高于环磷酰胺(20mg/kg)的37%的抑制率。结论 EFP对荷S180和H22小鼠肿瘤有较好的抑制作用。