家兔食管粘膜下肿瘤光动力学诊断的实验研究

目的 探讨利用光敏剂单天门冬酰胺二氢卟酚e6 (NPe6 )的长波长区吸光谱对较深部食管肿瘤作光动力学诊断的可能性 ,以及NPe6的理想剂量和照光时间。方法 雄性日本纯种白兔 12只 ,在全麻下开腹 ,将VX2肿瘤细胞混悬液 (5× 10 6细胞 /ml) 0 1ml种植于食管粘膜下。 1周后将家兔随机分成 4组 (每组 3只 ) ,1组作为对照组 ,其余 3组分别按 1 0、2 5和 5 0mg/kg耳缘静脉注射NPe6 ,给药后 2、4、6和8h用半导体激光内镜荧光观测系统对食管粘膜下肿瘤及周围正常组织中的NPe6荧光进行观察 ,并计算肿瘤组织 /正常组织相对荧光强度 (T/N)比值。结果 各给药组家兔给药后不同时间在食管肿瘤部位发射出较强的NPe6荧光 ,与邻近正常食管呈鲜明对照。食管肿瘤与周围正常组织中NPe6荧光强度随给药后时间增加而减弱 ,但在给药后 2～ 6h ,T/N比值随时间增加而增大。 5 0mg/kg组T/N比值在给药后 4～ 8h明显高于其他 2组 (P <0 0 5 ) ,于 6h时显示最大值 (3 49± 0 32 )。而其他 2组间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。对照组家兔的肿瘤及正常组织均未检测出荧光。结论 利用NPe6长波长区吸光谱 ,对较深部食管肿瘤作光动力学诊断是可行的 ,给药剂量为 5 0mg/kg、给药后 6h进行诊断较为适宜。

5-氨基酮戊酸光动力学诊断腹膜转移癌的研究进展

腹膜转移(peritoneal metastasis,PM)一直被视作癌症的终末阶段。20世纪90年代早期,外科肿瘤学界发展了细胞减灭术(cytoreductive surgery,CRS)加腹腔热灌注化学药物治疗(hyperthermic intraperitoneal chemotherapy,HIPEC)的综合治疗策略,可延长部分经谨慎选择的PM患者生存期。细胞减灭程度(completeness of cytoreduction,CCR)是该综合治疗后最重要的独立生存预测因子。然而,现行的手术技术容易遗漏肉眼难以发现的隐匿部位PM或微小癌灶,PM仍是常规CRS术后主要的复发形式。因此,近年来,光动力学诊断(photodynamic diagnosis,PDD)方法逐渐发展,并用于检测PM。本综述旨在总结5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)PDD技术在PM中的应用进展。

膀胱灌注5-氨基乙酰丙酸光动力学检查在膀胱癌早期诊断中的意义

光动力学诊断是一种新型的膀胱肿瘤早期诊断方法。本文对光动力学诊断和传统诊断方法进行比较,并简单介绍此新方法的原理、技术方法、材料设备、效果、优势和不足等相关问题。

光动力技术介导膀胱癌精准诊疗的研究进展

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,现阶段常规诊疗手段取得的效果并不令人满意。近年来,光动力技术发展迅速,在膀胱癌的诊断与治疗中均得到应用,其效果在临床上得到了广泛认可:光动力学诊断(PDD)在膀胱癌的诊断中已经展现价值,与白光膀胱镜(WLC)相比,蓝光膀胱镜(BLC)灵敏度及特异度更高,更好地适用于微小病变及原位癌(CIS)等隐匿性病变的诊断,但昂贵且耗时。以尿液为样本的非侵入性靶向光动力诊断技术开始展现潜力;PDD引导的经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)具有更好的诊断敏感性及手术精确性。同时,光动力学治疗(PDT)是膀胱癌理想的治疗方式。新型光敏剂的开发,双光子PDT技术、间断性和节律性PDT技术的应用,均有助于在提高疗效的同时减少PDT的操作次数,从而减少额外创伤;有学者尝试使用纳米技术结合PDT与化疗药物进一步改善肿瘤治疗效果;光动力技术与新型分子靶向技术相结合的靶向光动力技术是膀胱癌治疗领域新的热点,单克隆抗体、抗体片段、蛋白质支架、肽和小分子靶向分子示踪剂各自具备不同的特点,新的联合治疗手段正在被研究与开发,光动力技术为膀胱癌治疗带来了新的机遇。

光动力学在泌尿外科中的应用

光动力学诊断(photodynamic diagnosis,PDD)是利用部分肿瘤细胞对光敏剂有一定的特异性吸收和积蓄的特性,在特定波长的激光照射下,光敏剂由于发生光化学反应和光生物学反应从而发出特定的荧光。

荧光膀胱镜在尿路上皮膀胱癌中的诊断价值

目的:评估以5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)作为荧光剂的荧光膀胱镜检查对非肌层浸润性膀胱癌的诊断价值。方法:按照筛除纳入标准,纳入97名研究对象,膀胱灌注50 mL浓度为3%的5-ALA溶液,保留1小时后,排空膀胱后置入膀胱镜,分别在普通白光和荧光下观察,对白光和/或荧光下显示阳性或可疑区域取组织做病理活检,同时行电切术。结果:97例患者中,19例患者普通白光膀胱镜及荧光膀胱镜下检查均为阴性,剩余78例患者取156处组织进行活检,平均每例患者取2块组织。结果显示97处病理报告为尿路上皮癌。经计算得出荧光膀胱镜的敏感性为91.75%(89/97),特异性为64.41%(38/59);普通白光膀胱镜的敏感性为71.13%(69/97),特异性55.93%(33/59);P<0.05,差异具有统计学意义。结论:荧光膀胱镜在诊断尿路上皮膀胱癌上的敏感性和特异性均显著高于普通白光膀胱镜,具有较高的临床应用价值。

盐酸吡柔比星荧光膀胱镜对非肌层浸润性膀胱癌的诊断价值

目的:评估以盐酸吡柔比星作为荧光剂的荧光膀胱镜检查对非肌层浸润性膀胱癌的诊断价值。方法:本次研究共63例患者,膀胱灌注盐酸吡柔比星溶液40 mg,保留30 min后排空置入膀胱镜,分别在普通白光及荧光下观察,对白光和/或荧光下显示阳性或可疑区域进行活检,同时行电切术。结果:63例患者中,18例患者普通白光膀胱镜及荧光膀胱镜检查均阴性;其余45例患者共取活检92处,平均每例患者取活检2.04处。其中53处病理报告为尿路上皮癌,荧光膀胱镜敏感性为90.57%(48/53),特异性为64.10%(25/39);普通白光膀胱镜敏感性为71.70%(38/53),特异性为56.41%(22/39)。结论:吡柔比星荧光膀胱镜诊断非肌层浸润性膀胱癌的敏感性和特异性均显著高于普通白光膀胱镜,具有较高的临床应用价值。

光动力疗法在外阴病变的应用进展

光动力疗法通过产生单线氧特异性杀伤靶细胞。局部应用5-氨基酮戊酸的光动力疗法,应用于人乳头瘤病毒相关的尖锐湿疣、外阴/宫颈上皮内瘤变等外阴病变皮损,能特异性引发光毒性作用,与传统的治疗方法相比有显著优越性。针对光照诱导的原卟啉Ⅸ的聚集、荧光光谱的特异性等,探讨光动力学诊断的可能性。

荧光诊断技术在头颈肿瘤早期诊断中的应用

自身荧光诊断与光动力学诊断是新型的肿瘤早期诊断方法,在各种肿瘤尤其是头颈肿瘤的诊断和研究中,具有广阔的发展前景及临床意义。现就其技术原理、组成、在肿瘤早期诊断中的运用及发展前景作一综述。

血啉甲醚的时间分辨荧光光谱研究

实验研究了用于肿瘤光动力学诊断的第二代新型光敏剂血啉甲醚(HMME)分别在不同血型人血清和生理盐水环境中的时间分辨光谱,同时还研究了在不同荧光发射峰处的荧光寿命以及光敏剂浓度对荧光寿命的影响。结果表明:HMME在625和690nm处的荧光寿命基本相同,无显著差异。HMME在生理盐水和人血清环境中的荧光寿命具有显著差异,分别为14.6和16.6ns,同时实验结果还表明光敏剂浓度对荧光寿命没有影响。结论对于开展肿瘤的时间分辨药物荧光光谱诊断与成像技术具有重要的指导意义。

5-氨基乙酰丙酸荧光膀胱镜在膀胱肿瘤诊治中的应用评价(附56例报告)

目的与普通膀胱镜相比较,评价5-氨基已酰丙酸荧光膀胱镜检查在膀胱肿瘤诊断和治疗中的价值。方法术前1.5h,1.4%的碳酸氢钠溶液50mL溶解1.5g的5-氨基乙酰丙酸(5-ALA),膀胱灌注。术中对普通光下及蓝光下的可疑部位取活检,并对活检部位电切和电灼,活检组织送病理检查。结果56例患者共取活检155处,平均2.8次/人。荧光膀胱镜的敏感性98.4%(63/64位点),特异性73.5%(61/83位点),两者有显著统计学差异(P<0.01)。蓝光下发现普通光下未发现的肿瘤位点14处。未发现5-ALA的局部和全身毒副作用。结论5-ALA荧光膀胱镜是一种高敏感的用于膀胱肿瘤诊断和治疗的有效方法,能够提高对膀胱原位癌的诊断敏感性及降低术中因未发现和切除不完全所带来的膀胱肿瘤复发危险性。

膀胱灌注5-氨基酮戊酸诱导内生PpⅨ荧光的组织分布

目的通过膀胱灌注5-氨基酮戊酸(5-ALA)探讨其所诱导产生内源性PpⅨ在膀胱组织中分布及不同病变表达上的差异.方法 20例无痛性肉眼血尿患者行荧光膀胱镜检查.以50 ml 5-ALA缓冲液膀胱灌注,2～3 h后置入荧光膀胱镜,用光动力学诊断系统进行荧光膀胱镜检,采用407 nm激发光照射膀胱壁,对产生荧光的红色区域及非荧光的蓝色区域分别进行标记活检,取活检组织做快速冰冻切片,每块组织均做2份,1份用HE染色进行组织病理学检查,另1份用甘油封闭后在激光共聚焦显微镜下荧光成像,分析各标本荧光分布并定量检测不同组织PpⅨ荧光含量.结果共取活检组织32处,病理检查结果,膀胱移行细胞癌共18处、良性病变12处、正常膀胱上皮2处.激光共聚焦显微镜下所见,5-ALA诱导PpⅨ荧光主要分布在组织表层,深部组织PpⅨ荧光很弱.荧光量化分析显示,表层组织荧光强度高出深部组织5～10倍,对比各样本表层组织荧光,其强度与肿瘤分级相关(G3> G1-2),而肿瘤组织平均荧光强度明显高于良性病变的平均荧光强度.结论 (1)由于PpⅨ荧光主要分布在组织表层,荧光膀胱镜检只能发现表层的病变,因此对于位于正常膀胱黏膜下的病变进行荧光诊断可能无价值,在荧光膀胱镜指示下行经尿道切除术(TUR)时,对于切除深度无指导意义.(2)5-ALA诱导荧光膀胱镜检对膀胱癌诊断特异性尚不高,但量化荧光强度可区分良、恶性病变,从而提高荧光膀胱镜检对肿瘤诊断的特异性.(3)PpⅨ可作为肿瘤标志物来判断肿瘤生物学行为.(4)激光共聚焦显微镜及其图像分析系统对于膀胱肿瘤光动力学诊断(PDD)临床应用价值的分析是一个很有用的工具.

膀胱癌的荧光细胞学检查

膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的肿瘤,复发率高是其重要特点,因此需要长期随访。目前诊断及随访的主要手段为膀胱镜检查和尿脱落细胞检查,但其均有不足。荧光细胞学检查以其灵敏度高、客观性强、无创等优点逐渐受到重视。笔者就荧光细胞学诊断膀胱癌的原理、技术方法、效果和发展前景等进行综述。

金丝桃素在肿瘤治疗和诊断中的应用

金丝桃素是从金丝桃属植物中分离得到的一种天然光敏剂。金丝桃素经光激活产生过氧化物可以诱导癌细胞凋亡并抑制其生长,同时其对肿瘤组织具有特异的亲和力(可以优先积聚在肿瘤组织),这种生理活性在光学诊断中已得到广泛应用。本文对金丝桃素基于光学性质的抗肿瘤作用及在光动力学诊断中的应用进行了概述,为充分利用金丝桃素资源,进行金丝桃素衍生物的研究和开发提供依据。

ALA联合小剂量HPD激光光动力学治疗皮肤肿瘤临床研究

目的:局部外敷ALA和静脉注射小剂量HPD联合用药后进行激光光敏诊断和光动力学治疗,探讨这种联合用药光动力学疗法治疗皮肤恶性肿瘤的疗效。并与常规HPD-PDT及激光气化肿瘤合并ALA-PDT治疗作临床疗效对比。方法:30例患者,45处皮肤损害。采用ALA-PDT与小剂量HPD-PDT联合的方案进行治疗。光敏药物剂量:8%ALA霜剂外敷,1.5mg/kg HPD静脉用药,波长630nm半导体激光照射(功率密度250mW/cm^2,照射时间20分钟/光斑)。同时在PDT治疗过程中,及以后的随访中均以激光光敏诊断技术指导治疗及判断避光时间。并与常规HPD(5mg/kg)-PDT治疗皮肤恶性肿瘤43例及三周前激光气化肿瘤加20%ALA霜剂外敷光动力学治疗29例作疗效比较。结果:ALA联合小剂量HPD激光光动力学治疗组,除一例鳞癌Ⅱ级患者及一例恶性黑色素瘤患者出现复发外,其余患者对联合治疗的效果均佳,随访6～24月,均获得了痊愈,近期痊愈率93.33%,显效率6.67%,皮肤避光时间减少到10～14天。HPD-PDT治疗皮肤恶性肿瘤组43例,40例达近期痊愈,近期痊愈率91.43%,3例显效,显效率8.57%(显效3例,2例为色素型基底细胞癌,1例为直肠癌肛周复发)。激光气化肿瘤加ALA-PDT治疗组29例,26例一次治疗痊愈,近期痊愈率89.66%,3例显效,显效率10.34%(显效3例,2例鳞癌Ⅱ级经二次治疗痊愈,1例汗管癌7周复发改用手术治疗)。结论:1.ALA联合小剂量HPD的光动力学疗法对于诊断和治疗皮肤恶性肿瘤有较佳的疗效。两种光敏剂的联合使用,使皮肤避光时间由原来常规剂量HPD-PDT所必需的4～5周缩短到2周左右,并改善了ALA-PDT作用深度浅(2mm)的弊端。2.光敏诊断是一种简便、快捷、灵敏、非创伤性的肿瘤诊断方法,对于提高肿瘤的早期诊断率有很大意义,又能作为判断避光时间的辅助手段。3.光动力学治疗是一种对肿瘤组织杀伤具有高度选择性的微创技术,病人对整个治疗过程的耐受性好,更适合于年老体弱或对皮肤美观有特殊需求的患者。

窄光成像膀胱镜在膀胱肿瘤诊断中的应用

目的探讨窄光成像诱导光动力学检查对膀胱肿瘤早期诊断的应用价值。方法应用高清窄光成像膀胱镜系统对28例血尿患者进行膀胱镜检，术中分别对普通光下及窄光下的可疑部位膀胱黏膜组织活检，普通光组取样35处，窄光组取样79处（含普通光35处，普通光镜下疑似者窄光均显示镜下疑似，不重复取样）送病理检查。比较窄光取样组和普通光取样组肿瘤检出敏感性。结果窄光取样组活检病理报告尿路上皮癌32处（21例），其中原位癌11处，腺性膀胱炎5处（2例），良性病变（炎性病变）3处（2例），正常黏膜4处（3例）。普通光取样组尿路上皮癌17处（15例），腺性膀胱炎2处（1例），无原位癌。活检病理阳性32处，窄光组病理阳性32处，肿瘤检出率100％（32／32）；普通光组病理阳性17处，肿瘤检出率53％（17／32）；膀胱肿瘤及原位癌检出率2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。共取样79处，其中窄光组阳性32处，敏感性41％（32／79）；普通光组阳性17处，敏感性22％（17／79），2组肿瘤取样敏感性比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论窄光成像膀胱镜能提高对膀胱肿瘤特别是原位癌的诊断敏感性，降低术中残存率，减少膀胱肿瘤复发危险性。

5-氨基乙酰丙酸诱导荧光膀胱镜在膀胱肿瘤诊断中的应用(附31例报告)

目的:研究5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)诱导荧光光动力学对膀胱肿瘤的早期诊断价值。方法:对血尿患者行5-ALA诱导荧光膀胱镜检查及活组织检查,以5-ALA膀胱灌注,2 h后采用D-light光源系统进行膀胱镜检,对荧光阳性区域及白光下肉眼可见异常但荧光阴性区域进行活检,活检后行经尿道膀胱肿瘤电切术。结果:31例患者中有4例荧光阴性且普通光肉眼观阴性者未活检。余27例患者共取活检96处,其中荧光阳性区域取活检89处(包括普通光肉眼观阴性区域35处),切缘取活检7处。病理检查结果显示:尿路上皮癌65处,阳性率为73.03%(65/89),非肿瘤性病变24例,假阳性率为27%(24/89),切缘活检7处为阴性。荧光下阳性而白光下阴性的肿瘤位点11处,切缘活检7处均为阴性。结论:5-ALA诱导荧光光动力学诊断对膀胱肿瘤有较高价值,能发现早期肿瘤,同时进行电切将更彻底。

血卟啉单甲醚荧光光谱对口腔黏膜癌的特异性诊断

目的在金黄地鼠口腔癌模型中确定血卟啉单甲醚荧光光谱对口腔黏膜癌的特异性诊断的可行性。方法选用成年金黄地鼠建立口腔黏膜癌模型,用9,10-二甲基1,2苯并蒽涂布于颊囊表面10周(n=20),小鼠处死前,组织中注射血卟啉单甲醚溶液,通过波长405nm的光纤光谱仪记录黏膜组织的药物荧光光谱,选用光谱参数S作为诊断标准,测量荧光光谱后,处死动物,对需测量的黏膜组织进行染色并记录组织病理学评价结果。结果 HMME染色的光谱显示正常组黏膜无明显染色,癌症组黏膜被染成不同程度的变化,两者呈现显著差异;癌性组织的S值(140≤S≤200)均高于正常组织(S≤10),且具有统计学意义。结论通过血卟啉单甲醚荧光光谱特异性荧光光谱可以作为诊断口腔黏膜恶性病变的一个标准。