树突状细胞联合细胞因子诱导的肿瘤杀伤细胞生物学特性及其在肿瘤治疗中的研究进展

恶性肿瘤是导致死亡的重大疾病之一,而肿瘤的生物治疗因具有符合生理、高效和低毒的特点,已经成为手术、化疗、放疗外的第四种肿瘤治疗方式,有着巨大的治疗前景。免疫活性细胞的体内注射是肿瘤生物治疗的一个重要领域。其中,树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞是肿瘤生物治疗的两个主要组成部分,两者联合确保了一个高效和谐的免疫系统,已成为当今肿瘤治疗研究的热点之一。该文就DC-CIK细胞的生物学特性及其在肿瘤生物治疗中的研究进展进行综述。

细胞因子诱导性杀伤细胞联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目的:探索细胞因子诱导性杀伤细胞(CIK)联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效。方法:选取CHB患者50例,CIK联合阿德福韦酯组25例,单用阿德福韦酯组25例,治疗1、3、6个月后复查HBVDNA和HBV血清标志物。结果:治疗1、3、6个月后两组HBV DNA均明显下降,但相比差异有显著性意义(P<0.05),治疗1、3、6个月后,HBV DAN转阴率CIK联合阿德福韦酯组分别为20%、64%和80%,而单用阿德福韦酯组分别为0、36%和52%,两组相比均P<0.05;两组患者治疗1、3、6个月后HBeAg转阴率和HBeAg血清学转换率相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:阿德福韦酯单用或与CIK联合治疗CHB 3～6个月后,能使CHB患者HBV DNA水平显著下降,在与CIK联合治疗后使HBV DNA水平下降更加显著,特别是提高了HBV DNA转阴率,显示核苷类似物阿德福韦酯与CIK联合治疗能增强抗乙型肝炎病毒的效率,有助于病毒的清除。

光动力联合细胞疗法治疗中晚期食管癌的临床疗效

目的:探讨光动力联合细胞疗法治疗中晚期食管癌的临床疗效及免疫效应。方法:收治中晚期食管癌患者90例,采用非随机对照的方法,按治疗意愿分为3组:A组30例,仅行单纯光动力治疗;B组30例,行光动力联合CIK治疗;C组30例,仅行单纯CIK治疗。对所有患者进行评估疗效,监测生活质量、免疫功能,随访6个月、1年死亡人数。结果:B组、A组临床总有效率均高于C组(90.0%vs.86.7%vs.63.3%,P<0.05),B组与A组疗效相当(P>0.05);B组生存质量提高率均显著高于A组、C组(86.7%vs.60.0%vs.33.3%,P<0.05),A组高于C组(60.0%vs.33.3%,P<0.05);B组CD3+、CD3+CD56+较A组、C组有明显改善(P<0.05),A组与C组比较差异无统计学意义;3组6个月生存率比较差异无统计学意义,B组1年生存率高于A组、C组(73.9%vs.55.6%vs.29.4%,P<0.05)。结论 :光动力联合细胞疗法具有免疫协同作用,能提高患者机体整体免疫功能,明显改善患者生存质量,延长生存期,显示了良好的临床前景。

光动力疗法联合CIK细胞治疗对中晚期食管癌患者免疫功能及临床预后的影响

目的探讨光动力疗法（PDT）联合CIK细胞治疗对中晚期食管癌患者免疫功能及临床预后的影响。方法将62例中晚期食管癌患者随机分为2组：A组32例行单纯PDT治疗,先给予光敏剂喜泊分注射液5 mg/kg静脉注射,于24 h后在胃镜引导下使用630nm波长的激光进行照射,功率密度150 m W/cm2,持续30 min,能量密度270 J/cm2。B组30例行PDT联合CIK治疗,CIK免疫细胞培养14 d,期间第12天给光敏剂药物,第13天进行胃镜引导下激光照射治疗,第14天回输免疫细胞,每次回输细胞〉1×109个,间隔1~2 d 1次,共3次。检测2组治疗前1周及治疗后第2周T淋巴细胞亚群水平,观察患者治疗期间及治疗后肝肾功能的变化以及治疗过程中出现的不良反应,统计2组患者治疗后发热、胸痛、咳嗽咳痰不良反应发生率,复查内镜并取组织病理检查治疗后3个月、6个月、12个月肿瘤原位复发情况。结果 A组治疗后CD3＋、CD3＋CD8＋均明显高于治疗前（P均〈0.05）,B组治疗后CD3＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋均明显高于治疗前（P均〈0.05）;B组治疗后CD3＋、CD3＋CD56＋明显高于A组（P均〈0.05）,2组CD3＋CD8＋比较差异无统计学意义（P〉0.05）。B组发热、胸痛、咳嗽咳痰发生率明显低于A组（P均〈0.05）,12个月局部控制失败率明显低于A组（P〈0.05）。结论 PDT联合CIK细胞治疗模式具有协同效应,可提高患者机体整体免疫功能,改善肿瘤微环境,减少不良反应,降低肿瘤复发率,值得临床推广应用。

HIF-1α在食管上皮细胞中的诱导表达及对光动力疗法的影响

目的:探讨食管上皮Het1A细胞经诱导表达HIF1α后对光动力学效应的影响。方法:HIF1α的稳定高表达采用氯化钴(CoCl2)化学诱导法,并应用光敏剂5ALA处理细胞,光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)光照射采用波长>600nm的红光光源,细胞存活活性以MTS法测定,应用Westernblot测定HIF1α蛋白质水平,RNA干扰采用脂质体转染法,并利用TdT流式细胞法测定细胞凋亡率。结果:Het1A细胞经100μmol/L的CoCl2孵育4h后可诱导HIF1α蛋白的高表达;PDT后高表达HIF1α的细胞具有较高的细胞存活活性,且细胞凋亡率由未诱导时的16%降低至4%;不同浓度CoCl2诱导的HIF1α蛋白质水平与PDT后细胞存活活性相一致;siRNA转染阻断HIF1α的诱导表达,细胞又恢复了对PDT的应答能力。结论:HIF1α在Het1A细胞中的高表达使PDT效果下降;HIF1α部分通过抑制PDT引起的细胞凋亡而抵御PDT效应。提示HIF1α可作为治疗靶基因,降低肿瘤组织HIF1α表达水平可能有助于改善PDT临床疗效。

化疗联合DC-CIK治疗老年晚期非小细胞肺癌的疗效评价

目的探讨化疗联合树突细胞诱导的细胞因子激活的杀伤细胞(DC-CIK)治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。方法收集2010年1月—2012年1月收治的非小细胞肺癌62例设为DC-CIK组,应用化疗联合DC-CIK治疗。选择发病时间、年龄相近,性别、病理及分期(大多为临床分期)相同的肺癌62例设为对照组,应用相同化疗。比较两组2年内中位生存时间及总生存率。结果 DC-CIK组和对照组中位生存期分别为16、13个月。DC-CIK组生存率明显高于对照组(P<0.05)。结论老年非小细胞肺癌患者应用化疗联合DC-CIK治疗,能显著提高2年内的中位生存时间和总生存率。

CIK细胞联合紫杉醇治疗上皮性卵巢癌的初步研究

目的:探讨自体多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)输注同步化疗紫杉醇治疗上皮性卵巢癌患者的综合治疗方法,观察安全性和临床疗效。方法:分析2011年11月-2013年11月在本院接受自体CIK细胞输注同步联合紫杉醇治疗的上皮性卵巢癌患者17例。检测治疗前后患者淋巴细胞亚群和血清细胞因子的变化,观察其临床疗效和不良反应。结果:治疗过程中未出现明显治疗相关不良反应,评估后客观有效率(CR+PR)88%。治疗后外周血CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例较治疗前明显升高(P<0.05),CD3+CD4+比例和CD4+CD25+Treg细胞比例下降。治疗后血清中白介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)较治疗前明显上升(P<0.05)。结论:自体CIK细胞同步输注联合紫杉醇治疗上皮性卵巢癌,可改善患者免疫功能,提高患者Th1类细胞因子水平,是一种有前景的治疗上皮性卵巢癌治疗手段。

金丝桃素介导的光动力学疗法强化CIK对人乳腺癌细胞的抑制作用

目的探讨金丝桃素(Hyp)介导的光动力学疗法(PDT)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对人乳腺癌细胞MCF7的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养人CIK细胞,以不同剂量Hyp-PDT诱导MCF7细胞免疫原性细胞死亡(ICD),AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,将Hyp-PDT诱导的MCF7细胞上清液加入CIK细胞共培养,流式细胞术检测共培养后CIK细胞免疫表型,噻唑蓝(MTT)实验检测共培养后CIK细胞对MCF7细胞的抑制率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Hyp-PDT诱导MCF7细胞ICD后上清液中高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)、热休克蛋白70(HSP-70)和钙网蛋白(CRT)3种损伤相关分子模式(DAMPs)的含量。结果经不同剂量Hyp-PDT诱导的MCF7细胞呈现不同程度的凋亡,经Hyp-PDT诱导的MCF7细胞的上清液加入CIK细胞共培养使CIK细胞中CD^(+)_(3)、CD^(+)_(8)、CD16/56^(+)效应细胞的比例均明显高于对照组(均P<0.05),共培养后CIK细胞对MCF7细胞的杀伤活性明显高于对照组(均P<0.05),且上清液中HMGB-1、HSP70、CRT含量与Hyp-PDT剂量呈正相关(均P<0.05),而还原型谷胱甘肽(GSH)则可以减轻Hyp-PDT对MCF7细胞造成的损伤。结论Hyp-PDT与CIK联用具有协同抗肿瘤作用,其效应可能与Hyp-PDT诱导MCF7细胞ICD并释放较高水平的DAMPs分子有关。

氨基酮戊酸光动力联合激光治疗尖锐湿疣疗效评价

尖锐湿疣（ CA）是人乳头瘤病毒（ HPV）感染引起的一种常见的性传播性疾病。潜伏期长,复发率高。氨基酮戊酸光动力（ ALA－PDT）是近年来兴起的一种肿瘤消融技术,可选择性杀伤肿瘤细胞或生长旺盛的细胞。我科2012－2013年应用 ALA－PDT 联合 CO2激光治疗30例CA,取得满意疗效,报道如下。

CIK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤效应

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合西妥昔单抗对KRAS突变(DLD-1)及野生型(Caco-2)结直肠癌细胞的杀伤效应。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),在体外经抗-CD3单抗及多种细胞因子联合诱导生成CIK细胞;ELISA实验检测CIK细胞培养前后上清中干扰素-γ(IFN-γ)及转化生长因子-β(TGF-β)的水平,流式细胞检测DLD-1及Caco-2细胞表面表皮生长因子受体(EGFR)及CIK细胞表面分子的表达,采用实时无标记细胞分析仪(RTCA)检查CIK细胞联合西妥昔单抗对DLD-1及Caco-2细胞的杀伤作用。结果:DLD-1及Caco-2肿瘤细胞表面均高表达EGFR,培养前后CIK细胞亚群可见培养后CD8^+T、CD3^+CD56^+NKT及CD16^+CD56^+NK细胞比例均较培养前显著增高;与培养第一天比较,培养至第14天,CIK细胞培养基上清中细胞因子IFN-γ水平显著增高(P<0.01),而同时TGF-β的水平显著降低(P<0.01);RTCA检测发现CIK细胞联合西妥昔单抗对DLD-1及Caco-2杀伤作用明显高于单一的CIK细胞组。结论:CIK联合西妥昔单抗对EGFR受体阳性的野生型结直肠癌细胞与突变型结直肠癌细胞均有杀伤效果。

金纳米棒标记的人CIK细胞用于胃癌靶向光声成像与免疫治疗

目的:利用金纳米棒标记的人细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)主动靶向体内胃癌细胞的特性,实现胃癌的局部光声成像,观察金纳米棒在胃癌组织中的分布,测量血清中细胞因子浓度变化。方法:取健康志愿者的全血提取外周血单个核细胞,在多种细胞因子的诱导下扩增出CIK细胞;采用种子合成法制备金纳米棒并对其表面进行二氧化硅修饰与表征;利用胃癌细胞系MGC803细胞建立裸鼠胃癌皮下瘤模型;制备金纳米棒标记的CIK细胞,尾静脉注射进入荷胃癌的裸鼠模型,注射后不同时间点,进行光声成像观察金纳米棒标记的CIK细胞在肿瘤部位的分布;注射后3 d,收集裸鼠血清,测量IL-2、IL-17、γ-IFN的浓度,评判免疫治疗效果。结果:CIK细胞成功制备;制备的金纳米棒长为60 nm,宽为8 nm,二氧化硅厚度为20 nm;制备的金纳米棒被人CIK细胞内吞;金纳米棒标记的人CIK细胞能够主动靶向体内胃癌组织,在胃癌组织中大量聚集,呈现出增强的光声成像信号;细胞因子IL-2、IL-17与γ-IFN的浓度显著升高(P<0.05)。结论:金纳米棒标记的CIK细胞能够主动靶向体内胃癌组织,高效聚集并呈现出增强的光声成像信号,同时升高血液中细胞因子水平,增强免疫治疗功能。

CIK细胞联合光动力治疗中晚期食管癌的疗效观察

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合光动力(PDT)治疗中晚期食管癌的临床疗效及对生活质量的影响。方法将收治的63例中晚期食管癌患者随机分为2组,单纯CIK组33例,行单纯CIK细胞治疗;联合治疗组30例,CIK细胞联合PDT治疗;CIK细胞培养14 d,分3次安全回输患者体内,间隔1~2 d,每次回输细胞数量>1×10~9个,活力>95%。联合治疗组:CIK细胞培养14 d,期间第12天按照5 mg/kg静脉注射光敏剂喜泊分注射液,第13天在胃镜引导下使用630 nm波长的激光进行照射,功率密度150 m W/cm^2,持续30 min,能量密度270 J/cm^2,第14天回输CIK细胞。对所有患者进行临床症状缓解率、内镜下总有效率、免疫功能及生活质量评价。结果联合治疗组临床症状缓解率(93.3%vs 60.6%)及内镜下评价总有效率(90.0%vs 63.6%)均高于单纯CIK组(P<0.01,P<0.05);两组CD3^+、CD3^+CD56^+治疗前后差异有统计学意义(均P<0.05),且治疗后联合治疗组CD3^+、CD3^+CD56^+较单纯CIK组明显上升(P<0.05);联合治疗组生活质量提高率显著高于单纯CIK组(86.7%vs 33.3%,P<0.01)。结论 CIK细胞联合光动力治疗中晚期食管癌患者,对提高患者的近期临床疗效,增强免疫功能等具有较好的临床价值。

不同方式诱导的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠免疫治疗的研究

目的比较不同方式诱导的树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK细胞)对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的免疫治疗效果及其安全性的研究。方法建立BALB/c裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为6组,每组3只裸鼠:空白对照组、DC-CIK组(D组)、HT29细胞干细胞全细胞裂解液-DC-CIK组(L-D组)、HT29细胞干细胞RNA-DCCIK组(R-D组)、DC-CIK联合化疗5-Fu组(F-D组)和化疗5-Fu组。其中D组、L-D组、R-D组和F-D组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×106个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次,共3周;5-Fu组和F-D组在裸鼠给予DC-CIK治疗前1天通过尾静脉注射50 mg/kg剂量的5-Fu化疗药物,每周1次,共3周;空白对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,绘制裸鼠生长曲线,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白磷酸化(AKt)信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果各组治疗结束后,比较各组瘤体生长速率,L-D组<R-D组<D组<F-D组<空白对照组<5-Fu组。在裸鼠生存状态方面,L-D组、R-D组、D组始终情绪平稳,活动自如,进食进水正常;F-D组、5-Fu组精神萎靡,活动减弱,进食进水减少,空白对照组于第3周开始活动受阻,瘤体破溃。各组裸鼠瘤体中c-Myc基因与空白对照组相比均有所下调。结论 DC-CIK各组均能明显抑制肿瘤增长,其中以L-D组效果最佳,为临床治疗结肠癌提供了新思路。

细胞因子诱导杀伤细胞治疗恶性胃肠道间质瘤一例并文献复习

胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）是胃肠道中最常见的间叶源性肿瘤,具有非定向分化的不同特征和生物学行为,其发病率为0.1/10万至0.2/10万[1]。手术是GIST最主要的治疗手段,因术后复发率及转移率高,故单靠手术治疗效果并不理想。新辅助治疗及靶向治疗成为GIST的研究热点,根据患者的临床表现、突变类型和个体差异,对其进行个体化治疗可以获得最佳的治疗效果。

CIK联合治疗肿瘤的研究方法及临床应用

随着生物技术的不断发展,免疫治疗已成为手术、放化疗、分子靶向治疗外治疗恶性肿瘤的重要手段,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)是具有强大抗瘤活性的非MHC限制性T杀伤细胞,已应用于临床,为了增强其杀伤活性,通过CIK联合疫苗、导入细胞因子基因、联合放化疗、联合中药及其他天然药物、联合分子靶向药物等诸多研究正在进行中,本文综述了其联合应用研究进展。

晚期黑素瘤过继免疫治疗的Ⅱ期临床研究

目的:观察化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)治疗转移性恶性黑素瘤(metastatic melanoma,MM)的疗效及其安全性。方法:53例MM患者接受福莫司汀100mg/m2,第1～5天;氮烯咪胺400mg/d,第2～6天;CIK第7、14、和16天;每28d为1个周期的联合治疗,每2个周期评价疗效。结果:34例可评价患者中完全缓解(com-plete response,CR)1例(2.9%),部分缓解(partial response,PR)7例(20.6%),总有效率(overall response,ORR)为23.5%;疾病稳定(stable disease,SD)14例(44%),临床获益率(clinical benefit rate,CBR)67.5%;中位无进展生存期(progressionfree survival,PFS)8个月;中位总生存期(overall survival,OS)11个月;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)正常者的OS长于升高者;有效或稳定患者的PFS和OS长于疾病进展(progression disease,PD)患者。不良反应中G3+G4血小板减少41%,白细胞减少23.5%;发生2例超敏反应。无治疗相关死亡。结论:化疗联合CIK治疗MM患者耐受性尚好,有效率高于常规化疗,可延长LDH升高和疗效评价未PD患者的生存时间,但仍有待Ⅲ期临床研究进一步验证。

DC-CIK免疫治疗联合化疗治疗血液恶性肿瘤的安全性和有效性分析

本研究旨在研究树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(dendritic cell and cytokine-induced killer cell,DC-CIK)免疫治疗联合化疗治疗血液恶性肿瘤的临床疗效。本研究从PubMed、Web of Science、The Cochrane Library、Embase、CNKI、WanFang Data、SinoMed和VIP等数据库中,收集2000年1月至2023年2月发表的符合要求的随机对照研究,应用RevMan 5.4.1软件进行Meta分析。共纳入15篇文献,894例患者,包括686例骨髓瘤患者和208例白血病患者,其中DC-CIK免疫治疗联合化疗治疗组共451例,设置为联合治疗组,而单纯化疗组共443例,设置为化疗(对照)组。分析结果显示,联合治疗组在临床疗效、预后情况、生活质量及各项免疫指标(T淋巴细胞亚群分布和细胞因子分泌水平)等方面均优于化疗组,且不会给患者带来特异性的副作用。研究结果表明,DC-CIK免疫治疗联合化疗能够改善恶性血液肿瘤患者的免疫功能,增强机体的抗肿瘤能力,从而显著提高临床治疗的效果。

声动力疗法与光动力疗法联合使用的合理性探讨

光动力疗法是一个已经得到大量基础研究证实,并经临床验证对部分肿瘤疗效显著的方法。在对光动力的研究中,一些研究者发现超声也可以激发一些化学药物产生毒性物质,杀伤肿瘤细胞,并称之为声动力治疗。一些光敏剂同时具有声动力效应,但这种效应并不强。声动力是一种在探索研究阶段的肿瘤治疗方法,尚缺乏足够的临床前基础研究以证明其安全性和有效性。在这样的背景下,国外的一些研究进行了不负责任的临床实践,甚至有夸大疗效、借机敛财的行为,给这种疗法的研究和发展带来负面影响。为了帮助读者对此方法及临床试用情况有更明确的认识,本刊刊发黄正博士的一篇论述,不仅提醒广大医学工作者正确对待新型疗法的研究和应用,更从黄正博士的论述中,学习正确的临床科研思路和方法——临床科研一定要建立在坚实的基础研究、理疗指导基础上,并从伦理学的角度进行充分论证,任何不为患者考虑的"科学",都将给科学本身带来极大的负面作用,终将被唾弃。本文根据英文资料汇编而成,仅为读者了解一些历史背景和现状,不代表本刊、作者单位和作者立场。