光学离焦性近视眼视网膜pax-6基因表达的研究

目的 研究幼猴光学离焦性近视眼发生、发展过程中视网膜 pax- 6基因的表达情况 ,探讨pax- 6基因是否参与近视眼的发生、发展和正视化过程。 方法 选用猴龄为 1～ 3个月的恒河猴 9只 ,采用配戴眼镜或施行角膜屈光手术的方法 ,造成幼猴视网膜光学离焦。用反转录聚合酶链反应及定量分析方法检测不同时间视网膜 pax- 6基因的表达 ,并与非光学离焦眼进行比较。 结果 远视性光学离焦导致幼猴玻璃体腔增长速度加快 ,形成近视眼 ,其视网膜 pax- 6基因表达量明显比正常对照眼高 (t=3.4 80 ,P=0 .0 0 4 )。 结论 远视性光学离焦幼猴的视网膜 pax- 6基因表达明显增加 ,表明 pax- 6基因可能参与视觉依赖的眼球生长和正视化过程。

豚鼠离焦性近视眼模型组织形态学观察及短期恢复对屈光和眼轴的影响

目的:建立凹透镜诱导的豚鼠离焦性近视眼模型,观察视环境的改变即离焦与近视形成后的短期恢复对豚鼠屈光状态、眼轴长度的影响,以及巩膜组织形态学改变。方法:-7D的凹透镜离焦14d天建立豚鼠光学离焦性近视眼模型,检测屈光度和眼轴长度变化,光镜和电镜进行巩膜胶原纤维形态学观察,苦味酸特殊染色进行巩膜胶原半定量。结果:实验眼的后极部巩膜变薄,胶原纤维排列紊乱,间隙变大,小直经纤维增多以及成纤维细胞的形态异常,离焦诱导近视眼形成后去除镜片、经过2d的恢复,近视度数下降,进一步证实短期视环境改变即可引起屈光度变化,但眼轴长度没有改变。巩膜形态学观察见离焦性近视眼豚鼠后部巩膜胶原纤维排列紊乱,巩膜变薄。电镜下胶原纤维密度减少,小直径胶原纤维增多,成纤维细胞形态不规则。苦味酸-天狼猩红胶原染色显示I型胶原主要分布于后极部,实验眼I型胶原纤维密度减少,排列紊乱。结论:实验性近视眼的形成是巩膜异常重塑的过程,Ⅰ型胶原的改变是近视眼巩膜重塑的重要因素,但是巩膜重塑导致的眼轴伸长短期内不能恢复。

睡眠剥夺对豚鼠离焦性近视及视网膜多巴胺代谢的影响

目的:探究睡眠剥夺(SD)对豚鼠光学离焦性近视(LIM)形成及视网膜近视相关信号因子多巴胺(DA)代谢的影响。方法:实验研究。2022年3月采用随机数表法将30只21日龄三色豚鼠分为LIM组和LIM+SD组,予以右眼离焦处理,左眼为自身对照,所有实验动物予以14 d正常睡眠环境或每天SD处理20 h。每组进行角膜曲率半径、屈光度和眼轴长度等生物学参数测量。采用高效液相色谱电化学法测定视网膜DA、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量,计算DOPAC/DA比值;通过免疫组织化学染色法及Western blot检测视网膜酪氨酸羟化酶(TH)分布及表达。豚鼠左右眼屈光参数及神经递质含量比较采用配对样本t检验,LIM组与LIM+SD组间屈光参数及神经递质含量比较采用独立样本t检验。离焦眼视网膜DA含量分别与眼球屈光度、眼轴长度进行Pearson相关分析。结果:LIM组对照眼与LIM+SD组对照眼屈光度、眼轴长度比较差异均无统计学意义(均P>0.05);与LIM组离焦眼相比,LIM+SD组离焦眼的近视程度更深、眼轴延长更长(t=5.63,P<0.001;t=-3.87,P=0.001)。2组豚鼠离焦眼视网膜DA、DOPAC含量均低于自身对照眼(LIM组:t=-8.64,P<0.001;t=-13.03,P<0.001;LIM+SD组:t=-11.72,P<0.001;t=-16.32,P<0.001),其中LIM+SD组离焦眼视网膜DA、DOPAC含量均较LIM组更低(t=5.35,P<0.001;t=3.80,P=0.002),而DOPAC/DA比值升高且组间差异具有统计学意义(t=-3.60,P=0.003)。豚鼠离焦眼视网膜DA含量与屈光度、眼轴长度均有相关性(r=0.93,P<0.001;r=-0.77,P=0.001)。免疫组织化学染色结果显示,TH阳性反应细胞主要分布在视网膜神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层和内核层,外丛状层可见少量着色;与自身对照眼相比,豚鼠离焦眼视网膜染色均减弱。Western blot检测显示,离焦眼视网膜TH蛋白表达均明显低于自身对照眼(LIM组:t=-40.25,P<0.001;LIM+SD组:t=-17.64,P<0.001),但LIM组与LIM+SD组离焦眼视网膜TH蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SD对正常屈光发育豚鼠的屈光发育无明显作用,但能促进豚鼠LIM进展,可能通过加快DA代谢而不影响DA合成水平,降低DA含量,促进近视进展。