骨髓间充质干细胞在大鼠视网膜光感受器细胞损伤中的应用研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在大鼠视网膜光感受器细胞损伤中的作用机制。方法选取24只SD大鼠,分为正常组(n=6)、光损伤组(n=6,视网膜下注射无菌生理盐水4μl)、磷酸盐(PBS)视网膜下注射组(n=6,视网膜下注射PBS 4μl,其中溶质为BMSCs)和BMSCs视网膜下移植组(n=6,视网膜下移植2×10~5个BMSCs),除正常组外,其余各组光照射24 h,光照后10 d进行手术。术后14 d将眼球摘除,培养大鼠BMSCs原代及传代,制作冰冻切片,行HE染色,计算视网膜外核层层数。采取免疫荧光法,检测大鼠BMSCs表面标志物表达情况。采取TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果与正常组比较其视网膜外核层层数明显减少,细胞凋亡百分比有所升高;与光损伤组、PBS组相比,BMSCs组视网膜外核层层数明显增加,细胞凋亡百分比有所降低;其中BMSCs细胞在视网膜下腔不表达MAP2、CD11b、Rh0dopsin、Calretintin,部分表达Nestin阳性;同时4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)阳性的BMSCs细胞视网膜下腔表达b FGF,不表达BDNF和CNIF。结论大鼠实验结果表明,BMSCs视网膜下移植,可减少视网膜光感受器细胞凋亡,作用原理是可能通过视网膜下腔分泌的b FGF发挥作用。