小麦光敏雄性不育基因的遗传分析及RAPD标记

通过对小麦光敏雄性不育系A31与恢复系 1376杂交所得的F2 分离群体育性的分析研究表明 ,F2 分离群体共5 82株的平均结实率为 4 2 16 % ,变异范围为 0～ 86 6 7% ,由于受异源胞质的影响 ,F2 群体中可育株平均自交结实率低于恢复系 1376的平均结实率。经卡方测验表明 ,F2 群体的育性分离符合一对基因的分离比例 ,所以 ,A31光敏育性可能由一对基因控制。以光敏雄性不育系A31与其恢复系 1376杂交所得的F2 分离群体为材料 ,按F2 单株的育性分群 ,建立可育DNA池和不育DNA池 ,分别以其为模板进行RAPD分析 ,用 10 base随机引物进行多态性引物筛选。从 14 7供试引物中筛选出 2个引物在不育群体和可育群体间扩增出多态性产物。经过进一步对F2 分离群体的单株检测 ,其中的一个引物 (S110 6 )扩增出了得到重复验证和可靠的多态性扩增产物 ,它是与小麦A31光敏雄性不育基因连锁的 ,可作为A31光敏不育基因的连锁标记。

利用AFLP技术对谷子光敏雄性不育基因进行分子标记

利用AFLP技术对谷子光敏雄性不育基因进行了分子标记,对96对引物进行了筛选,通过Kosambi函数计算,P56/M40和P56/M76的引物组合与基因间的连锁距离为10.14,15.46 cM。

用RAPD方法分析水稻光敏核不育基因

本文以农垦５８Ｓ与ＦＬ_２杂交所得的Ｆ_２分离群体为材料，按其育性分为不育和可育两大群体，分别以混合的可育群体核ＤＮＡ和不育群体核ＤＮＡ为模板，进行ＲＡＰＤ分析，从检测过的３００个引物中发现有２个引物在不育群体和可育群体中扩增出多态性产物。就其中一个引物对杂交亲本和Ｆ_２个体的ＲＡＰＤ分析进一步证明了这种多态的可靠性。转移杂交实验表明这个多态性产物是一种重复顺序。

SSR方法标记谷子光敏雄性不育基因

为加快谷子杂种优势利用的研究进展、寻找谷子光敏雄性不育基因,利用SSR方法对谷子光敏雄性不育基因进行了分子标记。首先用166对引物在谷子光敏不育系GM与恢复系恢东1号两亲本间进行了筛选,其中有61对引物在亲本间存在差异;经F2群体153株单株验证后,仅有一对引物b159和目标基因连锁;通过Kosambi函数计算,其连锁距离为13.5 cM,位于第6条染色体。

鉴定与水稻光敏核不育基因pms3连锁的AFLP-RFLP标记

运用 ＡＦＬＰ技术对农垦 ５８Ｓ×１５１４的 Ｆ２代群体构建的极端集团进行了分析，在 ２５３对ＡＦＬＰ引物中，９１％具有多态性带，有２０对引物扩增到了阳性带．阳性带经克隆后用作ＲＦＬＰ探针进行极端集团分析，其中４个具有多态性带．２个（Ｆ３和Ｖ４）表现为阳性带．Ｆ２代不育群体ＲＦＬＰ分析结果显示，Ｆ３和Ｖ４两个标记与第１２染色体上的光敏核不育基因ｐｍｓ３连锁．通过极大似然法估算，Ｆ３和Ｖ４标记距光敏核不育基因ｐｍｓ３的遗传距离分别为５.８０ｃＭ和７．７５ ｃＭ．

水稻光敏核不育基因pms3的精细定位

为了进一步研究水稻晚粳品种农垦 5 8转变为光敏核不育水稻农垦 5 8S的突变位点 ,并精细定位光敏不育基因pms3,我们利用农垦 5 8S/15 14杂交组合的 F1 进行花药培养构建了一个 DH群体 ,验证了在该群体中光敏不育受 pms1、pms3两对基因的控制 ,并根据分子标记分析选择第 12染色体是 15 14基因型、第 7染色体农垦 5 8S基因型的 DH系 DH80与农垦 5 8S杂交构建一个 pms3光敏不育单基因分离的群体。根据 F3家系的育性分离情况推测出 F2 的基因型 ,结合分子标记分析进一步验证了 pms3在第 12染色体上的位置 ,并将其定位在 RFL P标记 M36和 RZ2 6 1之间 ,与两标记的遗传距离分别为 1.5 c M和 3.0 5 c M,为启动 pms3区域的染色体步查打下了基础。同时还比较分析了 RFL P标记在 DH群体及F2 群体中的分离情况 ,发现第 12染色体上 pms3区域在 F2 群体中正常分离的多个标记在 DH群体中发生了严重的偏分离 ,另外还发现 DH群体第 3、 7、

水稻光敏核不育基因相关蛋白产物初步研究

寻找与光敏不育基因表达特异相关的蛋白产物是近年来对光敏核不育水稻研究的热点之一。光敏核不育现象是外界环境因子中光周期、温度、光周期与温度互作等多因子参与调控的综合结果。目前通常以花粉败育度及自交结实率来判定败育程度,但这两者仅为植株整体水平的和生理过程最终的表现型。所以,利用发育生物学的研究方法,探知特定时空点光敏不育基因的分子水平表型,即特异相关蛋白产物。

水稻光(温)敏核不育基因的定位分离、研究进展及对策

本文从经典遗传学的角度分析了水稻光（温）敏核不育性，认为在定位、分离光（温）核不育基因时，应尽可能选择受１对基因控制的不育系及其分离群体。对标记基因法、同工酶标记法和ＤＮＡ标记法进行光（温）核不育基因染色体定位的优缺点及其定位结果不一致的原因进行了探讨。比较了各种植物基因克隆技术在分离光（温）核不育基因上的优缺点，认为图谱分离法虽已有一定的基础，但要在距不育基因１ｃＭ范围内找到分子标记并克隆出此基因，还需作大量的工作。ＤＤ－ＰＣＲ和ＲＤＡ技术可充分利用光（温）核不育水稻的“环境敏感型”这一重要特性，应用这两种技术可能是分离光（温）敏核不育基因的较好途径。

长臂光敏基因探针对结核性浆膜腔积液的诊断价值

目的 研究聚合酶链反应 (PCR)联合长臂光敏生物基因探针对浆膜腔积液性质的诊断价值。方法 通过PCR特异扩增人型结核分枝杆菌 (H37Rv)IS986基因序列 2 45bp片段 ,构建含该特异片段的重组质粒 ,以该重组质粒DNA为模板 ,用PCR扩增IS986产物制备长臂光敏生物素标记的基因探针 ,进行探针特异性检测。同时对 6 5份胸腔积液标本进行基因扩增联合探针检测并与传统的病原学检测方法进行比较。结果 通过PCR联合探针检测结果显示 :该探针除了与人型、牛型、田鼠及非洲分枝杆菌有特异杂交信号外 ,与其他的分枝杆菌没有杂交反应。故此探针具有良好的特异性。对 6 5份临床胸腔积液标本进行结核分枝杆菌检测 ,其阳性检出率 (4 6 .6 6 % )分别高于PCR(2 6 6 6 % )、涂片 (0 % )及培养 (13.33% )的检出率。结论 该基因探针特异性强、敏感性高 ,与目前涂片镜检、培养法、单纯PCR扩增相比均有明显优势 ,适用于临床检测 ,有推广价值。

茎瘤芥光敏色素PHYB基因片段的克隆与序列分析

通过RT-PCR技术在茎瘤芥幼苗叶片中克隆了茎瘤芥光敏色素PHYB基因片段,命名为BjPHYB1(GenBank登录号:JQ178243)。结果表明,该片段长1 544 bp,编码514个氨基酸;该氨基酸序列包含两个完整的PHYB保守结构域PHYTOCHROMEREGION和PAS DOMAIN,且与甘蓝和拟南芥PHYB同源性分别为98%和96%;系统进化树分析表明BjPHYB1与同科植物的PHYB亲缘关系较近。茎瘤芥PHYB基因片段为首次克隆,为今后对该基因功能研究奠定了基础。

水稻光敏核不育基因分子标记的研究

石明松（１９７３）从晚粳品种农垦５８大田中发现了具有光周期敏感核不育性状的水稻农垦５８Ｓ，并被正式命名为湖北光周期敏感核不育水稻（ＨＰＧＭＲ），它的发现及利用可以将杂交水稻种子的生产方式由“三系法”改变为更经济的“二系法”，这将对杂交水稻的生产起到十...

光敏核不育水稻光敏色素基因的RFLP分析

以籼稻“ＩＲ３６”（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．ｓｓｐ．ｉｎｄｉｃａ）光敏色素基因ｐｈｙＡ 的ｃＤＮＡ 克隆作探针，对光敏核不育水稻“农垦５８Ｓ”和对照水稻“农垦５８”（Ｏ．ｓａｔｉｖａ Ｌ．ｓｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ）进行ＲＦＬＰ分析，限制性内切酶Ｅｃｏ ＲⅤ、ＤｒａⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ等都没有显示出多态性，而用ＨｐａⅡ显示出了多态性。ＭｓｐⅠ和ＨｐａⅡ是一对同裂酶（识别位点为ＣＣＧＧ），但二者对识别位点上第２个胞嘧啶（即ＣｐＧ）甲基化的敏感性不同。实验结果表明，“农垦５８Ｓ”ｐｈｙＡ 基因中ＣｐＧ甲基化程度低于“农垦５８”，即在“农垦５８Ｓ”ｐｈｙＡ 基因中某些ＣｐＧ 发生了脱甲基化。此外，以“ＩＲ３６”、“农垦５８”、“农垦５８Ｓ”的ＤＮＡ 作模板，用ＰＣＲ方法在ｐｈｙＡ 基因转录起始位点上游扩增出一大小均为０．４ ｋｂ 的ＤＮＡ片段（称为ＰＣＲＦ）。测序结果表明，“农垦５８Ｓ”的ＰＣＲ２ 比“ＩＲ３６”的ＰＣＲ１ 多一个碱基，且另有８ 个碱基不同。以“ＩＲ３６”的ＰＣＲＦ作探针进行ＲＦＬＰ分析，在“农垦５８Ｓ”和“农垦５８”中杂交得到的片段都不同于“ＩＲ３６”中得到的片段。根据“ＩＲ３６”ｐｈｙＡ基因?

茶树光敏色素基因家族成员的生物信息学及其表达量与黄酮含量的相关性分析

【目的】分析茶树光敏色素(PHY)基因(CsPHY)的生物学信息及不同采摘时间点茶叶中光敏色素基因表达量与黄酮含量的相关性,为茶叶适时采摘及品质调控提供理论参考。【方法】从茶树基因组数据库(CSA)中筛选出CsPHY基因家族成员,对其进行生物信息学分析,并通过邻接法(NJ)构建系统发育进化树。以一天中不同时间点0:00(R0)、6:00(R6)、12:00(R12)和18:00(R18)采摘的乌龙茶品种肉桂鲜叶为试材,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CsPHY基因家族成员在不同时间点的表达量,并采用三氯化铝比色法检测茶叶中黄酮含量的日变化,以皮尔逊(Pearson)相关系数评估CsPHY基因相对表达量与黄酮含量的相关性。【结果】共筛选获得6个CsPHY基因家族成员,编码蛋白的氨基酸数量674~1142个,分子量为76126.75~126714.53Da,等电点(pI)为5.74~5.96,脂溶性系数为91.11~95.27,其中,CsPHY1基因属于PHYC亚族,CsPHY2和CsPHY4基因属于PHYA亚族,CsPHY3和CsPHY5基因属于PHYB亚族,CsPHY6基因属于PHYE亚族,说明CsPHY2和CsPHY4蛋白属于PhyI型光敏色素,CsPHY1、CsPHY3、CsPHY5和CsPHY6蛋白属于PhyII型光敏色素。6个CsPHY蛋白均与双子叶植物PHY蛋白的亲缘关系较近,其中,CsPHY2蛋白与水晶兰PHYA亚族蛋白的亲缘关系较近,CsPHY4蛋白与美味猕猴桃PHYA亚族蛋白的亲缘关系较近;CsPHY3和CsPHY5蛋白均与美味猕猴桃PHYB亚族蛋白的亲缘关系较近,且CsPHY5蛋白与葡萄PHYB亚族蛋白的亲缘关系相近;CsPHY1蛋白与河岸葡萄PHYC亚族蛋白的亲缘关系较近,CsPHY6蛋白与中华猕猴桃和河岸葡萄PHYE亚族蛋白的亲缘关系较近。CsPHY1、CsPHY3、CsPHY4和CsPHY5基因在R6时的表达量最高,其中,CsPHY4和CsPHY5基因在R6时的表达量显著高于其他时间点的表达量(P<0.05,下同),而CsPHY2和CsPHY6基因分别在R12和R18时的表达量达最高,其中CsPHY6基因在R18时的表达量显著高于R12时的表达量。在R0~R18时段内茶树鲜叶中的黄酮含量无显著变化(P>0.05),整体呈先下降后上升趋势,在R18时达最高值,在R12时最低值。6个CsPHY基因家族成员中,仅CsPHY6基因与黄酮间呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】CsPHY基因家族中仅缺少PHYD亚族成员,尽管各成员间功能结构较相似,但表达模式存在明显差异。光照影响茶树叶片中黄酮含量,CsPHY6基因编码的光受体蛋白CsPHY6参与调控茶树叶片中的黄酮含量。

甘蓝型油菜光敏色素(PHY)家族基因的鉴定及表达分析

光敏色素(phytochrome,PHY)作为植物体内感受红光和远红光的受体,在植物的避荫反应及生物、非生物胁迫响应中起重要的调节作用。鉴定甘蓝型油菜中PHY家族基因并解析其分子机理,有助于提高油菜光能利用率,培育抗逆性强、适合密植直播和机收的油菜品种。为了研究PHY基因在甘蓝型油菜(Brassica napus L.)中的家族特征,以5个拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtPHY基因为基础序列,在甘蓝型油菜、甘蓝(B.oleracea)、白菜(B.rapa(Lour.)Rupr.)、黑芥(B.nigra)、芥菜型油菜(B.juncea)和埃塞俄比亚芥(B.carinata)中分别鉴定出11个、6个、5个、5个、10个和9个PHY基因。生物信息学分析结果显示PHY基因在芸薹属中高度保守。在甘蓝型油菜11个BnaPHY基因中,PHYA亚组成员主要在根中表达,PHYB亚组主要在叶片中表达。此外PHYA和PHYB均显著受高温和低温胁迫的调控,而非生物胁迫和激素处理对PHY基因表达的影响不明显。春化处理中的PHYB亚组表达量下调,PHYC和PHYE亚组表达量则上调,而在PHYA亚组只有部分基因表达量上调。大部分PHY基因表达明显受核盘菌抑制,有两个PHYA成员的表达明显受核盘菌诱导。

水稻光敏素基因(phyA)和-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因(rbcS)的染色体定位

以生物素标记的水稻单拷贝光敏素基因（ｐｈｙＡ） 和１ ，５二磷酸核酮糖羧化酶／ 加氧酶小亚基基因（ｒｂｃＳ） 的基因组克隆为探针，其大小分别为６ ．６ 和１ ．１ ｋｂ ，通过原位杂交技术将它们分别定位到水稻染色体上。ｐｈｙＡ 和ｒｂｃＳ基因的检出率分别为２９ ．７９ ％ 和２１ ．５６ ％ 。ｐｈｙＡ在第３ 染色体上有３ 个座位：长臂近着丝粒、短臂末端、长臂中部。ｒｂｃＳ分别定位于第７ 染色体长臂近着丝粒（８ ．６２ ％ ） 、第５ 染色体长臂末端、第６ 染色体长臂距着丝粒近２／３ 处。此外，对信号转导相关基因定位的意义，水稻染色体的准确识别、功能基因在染色体上的分布及位置意义等也进行了讨论。

高羊茅光敏色素A基因FaPHYA的克隆与分析（英文）

以高羊茅转录组学测序获得的PHYA序列为模板,同时结合3’RACE和5’RACE方法从高羊茅中扩增出PHYA基因的全长c DNA序列,命名为Fa PHYA。该序列c DNA全长3 983 bp,具有完整的开放阅读框（ORF,293~3 682 bp）,编码蛋白为1 129个氨基酸,Fa PHYA的N端由GAF和Phytochrome结构域组成;C端包括2个重复的PAS结构域,1个组氨酸激酶A结构域,1个类似组氨酸激酶的ATP酶结构域。对编码蛋白氨基酸序列的同源性分析表明,Fa PHYA与单子叶植物PHYA蛋白的氨基酸序列一致性较高,同源一致性水平达85%以上,亲缘关系较近。与双子叶植物的PHYA蛋白的氨基酸序列一致性较低,亲缘关系相对较远。

光敏色素在水稻生长发育中的作用

光敏色素是植物体内的重要光受体,主要感受红光和远红光,调节着植物生命循环中许多重要发育过程。水稻光敏色素基因家族包括3个成员,即PHYA、PHYB和PHYC。对水稻光敏色素突变体的研究表明,3个水稻光敏色素基因在水稻光形态建成中既有独特作用又有交叉作用。根据已有报道和作者在该领域的研究工作,总结了光敏色素在水稻幼苗去黄化、根的向地性和延伸、株型、花期和育性等发育过程中的作用,并提出了水稻光敏色素研究领域急需解决的问题。

光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析

通过对NK58S和NK58F这一对光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析,比较了AFLP,RAPD及RFLP检测DNA多态性的相对效率。结果表明,这三种分子标记的DNA多态性检出效率依次为AFLP>RAPD>RFLP;找出了水稻AFLP分析的最适反应条件;通过AFLP和集群混合分析(Bulkedsegregatinganalysis,BSA),筛选出了一批与水稻光敏核不育(PGMS)基因连锁的多态性AFLP产物,已完成了对4个多态性AFLP产物的克隆,Southern杂交证明其中2个为单拷贝顺序,另外2个为低拷贝顺序。对上述三种分子标记各自的优缺点及它们在DNA多态性检测中的适用之处进行了分析探讨。

调整小麦生长发育对环境因子的敏感性培育可应对气候变化的新品种

小麦的生长发育节律受光周期、温度和水分等环境因子影响,唯有光周期在年际间是恒定的。在保持小麦具备中早熟性的前提下,提高品种的光周期敏感性,使其在特定的日照长度时抽穗和开花,利用光周期的稳定性来确保小麦生长发育的稳定性,将温度波动对生育期的影响降为最低,是稳定小麦生产的重要举措。研究了光敏性对稳定小麦发育进程的作用、评价小麦光敏性的农艺方法及光敏性品种的培育方法。