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题名光果柱花草转基因毛状根及其原生质体制备体系的建立
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作者
孙昊
张建禹
罗丽娟
刘攀道
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机构
海南大学热带农林学院
海南大学三亚南繁研究院
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
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出处
《草地学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第5期1583-1591,共9页
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基金
海南省自然科学基金项目(No.323CXTD387
No.322RC771)
+1 种基金
国家自然科学基金面上项目(No.32371769)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(No.1630032022023)资助。
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文摘
光果柱花草(Stylosanthes leiocarpa)是柱花草属(Stylosanthes Sw.)中可用于林果园间作的一个野生种。截至目前,光果柱花草的转基因体系尚未建立。本研究以光果柱花草的子叶节为外植体,比较不同的发根农杆菌菌株与潮霉素B浓度对毛状根诱导率及转基因阳性率的影响。结果发现,以K599为诱导菌株且培养基添加8 mg·L^(-1)潮霉素B为筛选压,是最优的毛状根诱导条件,诱导率达23.33%,阳性率为100%。在此基础上,利用转基因毛状根制备原生质体,结果表明,添加2.5%纤维素酶和2%离析酶,以及8 h的酶解时间为最优条件,原生质体的产量达2.745×10^(5)个·g^(-1),活力为91.02%,制备的原生质体100%为转基因细胞。本研究成功建立了一种发根农杆菌介导的光果柱花草转基因毛状根诱导体系及原生质体制备体系,为后续光果柱花草的基因功能研究奠定了基础。
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关键词
光果柱花草
发根农杆菌
转基因毛状根
原生质体制备
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Keywords
Stylosanthes leiocarpa
Agrobacterium rhizogenes
Transgenic hairy roots
Protoplast preparation
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分类号
Q789
[生物学—分子生物学]
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