Lica光激化学发光免疫分析系统检测乙肝两对半的性能评价

目的对Lica光激化学发光免疫分析系统主要性能进行初步评价。方法以美国临床实验室标准化协会(CLSI)制定的评价标准,通过一系列实验设计,对Lica光激化学发光免疫分析系统进行乙肝"两对半"检测的精密度、准确度、线性、分析灵敏度等进行评价。结果 Lica光激化学发光免疫分析系统进行乙肝"两对半"检测,批内不精密度变异系数在1.49%～4.40%,总不精密度在2.15%～6.22%,回收试验的回收率为96.32%～106.54%,HbsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、Anti-HBc的分析灵敏度分别为0.04ng/mL、1.72mIU/mL、0.09PEIU/mL、0.31PEIU/mL、0.02PEIU/mL。结论 Lica光激化学发光免疫分析系统各方面性能良好,测定样本快速、准确、精密可靠,能适应医院日常样本的检测需要。

全自动光激化学发光免疫分析系统LiCA500对血液标本中的丙肝抗体和梅毒螺旋体抗体检验的应用进展

随着丙肝及梅毒感染率的不断提高,感染疾病所带来的不良危害也得到越来越多的关注,如何降低疾病对患者健康及生命安全的影响已经成为当前临床上的重要课题,并得到了越来越多的关注。尤其是检验科,更是将如何确保诊断的有效性及安全性,作为了实际研究中的重点。而全自动光激化学发光免疫分析系统LiCA500,正是这些研究中的重要成果之一。检验仪器作为精确诊断及疗效评估的重要手段之一,在临床医疗中发挥了重要作用。因此,分析全自动光激化学发光免疫分析系统LiCA500对血液标本中丙肝抗体和梅毒螺旋体抗体的检验应用进展对临床有着重要意义。

人促卵泡激素光激化学发光免疫分析法的建立及性能评价

目的利用光激化学发光免疫分析法(AlphaLISA)建立人促卵泡激素(hFSH)的快速检测试剂。方法使用2株配对的hFSH单克隆抗体,一株hFSH单克隆抗体用生物素标记,另一株hFSH单克隆抗体包被于受体微球上,与包被有链霉亲合素的供体微球共同构成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hFSH试剂分析敏感性和功能敏感性分别为0.09和0.12 U/L,线性测量范围为0.09～192.00 U/L,试剂的分析内变异系数(CV)和分析间CV分别为4.2%～7.1%和7.5%～8.3%,均<10.0%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.16%、0.08%和0.02%。100份临床血清样本用本试剂与西门子Immulite 2000促卵泡生成激素化学发光(CLIA)检测试剂盒检测,其相关系数为0.979(P<0.001)。结论自制hFSH AlphaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,可用于临床血清样本hFSH浓度的测定。

光激化学发光免疫分析法检测孕妇血清W物质

目的建立定量检测孕妇血清W物质的光激化学发光免疫分析(LICIA)法并进行方法学评价。方法包被有W物质(T2S类似物)的感光微粒与兔抗W物质抗体连接,与生物素化羊抗兔IgG及包被有链霉亲合素的发光微粒构成检测体系;对LICIA法反应条件进行探索并进行方法学评价。结果 LICIA法的检测灵敏度为5 pg/mL,线性范围为5～10 000 pg/mL;批内、批间变异系数(CV)均<10%;回收率为89.2%～108.1%;T3S<10 ng/mL、T4S<100 ng/mL、Hb<5.0 g/L、T-Bil<500mol/L、TG<3 mmol/L对LICIA法检测W物质无显著干扰;LICIA法稳定性较好;与放射免疫分析(RIA)法比较,LICIA法检测W物质差异无统计学意义(t=1.012,P>0.05)。检测孕早期孕妇血清W物质的参考值上限为847 pg/mL。结论 LICIA法检测W物质灵敏且简便易行,可用于孕妇血清W物质的检测。

LiCA800光激化学发光法在人类免疫缺陷病毒血清抗体检测中的评价

目的评价LiCA800光激化学发光法在人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测中的准确性。方法回顾性分析2021年5—10月于苏州大学附属第三医院送检的临床血液标本中,符合检测要求并通过LiCA800光激化学发光法检测HIV抗体,结果S/CO≥1的标本53例。以疾控中心反馈的WB结果为HIV抗体检测结果的金标准,分析LiCA800的检测结果。结果LiCA800检测有反应性结果(S/CO≥1)样本53例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和RT方法进行初筛试验:两种初筛方法均为阴性24例,对其余29例初筛呈反应性的样本进行WB抗体确证试验,WB条带阴性6例(11.32%),WB条带不确定7例(13.21%),WB条带阳性16例(30.19%)。WB条带阳性样本的S/CO值在30.31~223.97,S/CO值>100的病例占比75.00%。WB条带阳性样本S/CO值明显高于WB条带不确定、WB结果阴性和ELISA和RT法初筛阴性标本S/CO值,差异有统计学意义(P<0.05)。WB阳性结果中,gp160、gp120、p24出现率为100.00%,p55出现率较最低为43.75%。结论LiCA800检测血清HIV抗体时阳性符合率不高,仅为30.19%,S/CO值与血清HIV抗体WB确证结果相关,实验人员应对S/CO值和WB结果予以关注,避免纠纷。

光激化学发光均相免疫分析的应用动态

光激化学发光均相免疫分析(LOCI)技术,是一种新型的免疫纳米传感技术,它结合了激光技术、化学发光传感技术与免疫分析技术的优点,并以其简单快速、灵敏度高、特异性强、适用面广等优势引起越来越多的关注,成为当今免疫传感检测领域的前沿热点.LOCI技术有效避免了传统免疫分析方法中的洗脱、分离等繁琐步骤,降低了交叉反应的可能性以及背景噪音的影响,显著提高了分析效率和检测灵敏度.LOCI技术在诸多领域的高通量检测和筛选中得到了广泛应用,因此,极有必要对LOCI技术的相关应用及发展趋势进行总结,从而加速其推广应用.本文综述了LOCI技术在生物医学、药物学、食品安全以及检验检疫等领域的应用状况,并根据各自学科发展的不同特点探索了其发展趋势.

均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展

均相光激化学发光免疫分析技术是一种基于纳米微珠的化学发光的新型技术,其具有更高的敏感度、均一性、背景低,且不用洗涤及样本需求量少等特点。该技术可用于生物标志物、激酶及抗原抗体的检测,蛋白:蛋白相互作用的检测,高通量分析的研究及疾病诊断等方面。优化和发展均相光激化学发光免疫分析技术将会在更多研究领域中得到应用。

β-人绒毛膜促性腺激素光激化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种检测人血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）浓度的光激化学发光免疫分析方法。方法采用2株针对不同抗原表位的抗β-HCG抗体,其中一株抗体用来包被发光微粒,另一株抗体标记生物素,以双抗体夹心法检测人血清中的β-HCG浓度,并与Beckman-Coulter公司试剂（化学发光法）进行比较。结果发光微粒浓度为100μg/mL、生物素标记抗体浓度为7μg/mL时,检测范围为0~1 000 mIU/mL,灵敏度为0.16 mIU/mL,平均回收率为100.3%,批内变异系数（CV）为0.80%~3.99%,批间CV为2.25%,与TSH、FSH和LH的交叉反应率低,稳定性较好,与化学发光法的符合率好（r=0.99）。结论光激化学发光免疫分析方法测定β-HCG具有较高灵敏度、精密度和准确性,与化学发光法的符合率较好,适用于临床测定。

光激化学发光免疫分析法测定低浓度HBsAg效果评价

目的比较光激化学发光免疫分析法(LICA)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及胶体金法测定低浓度HBsAg,并评价LICA测定HBsAg的临床效果。方法以广西壮族自治区临检中心提供的临界值控制品作为质控,经ECLIA筛选的HBsAg标本吸光度与仪器所给临界值(Cut-off)的比值(COI)为1～50(低浓度)的临床标本80例(观察组),HBsAg COI<1的临床标本30例(对照组),分别使用LICA、ECLIA、ELISA及金标法测定。结果 LICA测定HBsAg的灵敏度为0.25ng/mL,平均批内变异系数(CV)为8.6%;ECLIA法测定HBsAg的灵敏度为0.12ng/mL,CV为7.8%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.50ng/mL,CV为11.9%,胶体金法灵敏度1ng/mL。观察组标本中LICA检出阳性为79例,ELISA检出阳性为75例,胶体金法检出阳性为20例。结论 LICA检测HBsAg与ECLIA有很高的符合率,在低浓度的HBsAg检测中,可最大程度地减少假阴性结果,且该法可进行自动化定量检测,适于临床使用。

胃蛋白酶原光激化学发光免疫测定方法的建立

目的建立一种检测人血清胃蛋白酶原浓度的光激化学发光免疫测定方法。方法采用双抗体夹心法建立检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ浓度的方法,评估其分析灵敏度、回收率和批内精密度,并与雅培（化学发光法）进行比较。结果胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ的分析灵敏度分别为0.8ng/mL和0.6ng/mL,回收率分别为100.3%、106.5%,批内变异系数（CV）为0.93%~4.1%、1.2%~4.3%,与化学发光法的相关性较好（r=0.99）。结论该方法测定胃蛋白酶原具有较高灵敏度、精密度和准确性,适用于临床。方法建立后可进一步进行长期稳定性试验。

光激化学发光免疫检测法测定TSH功能灵敏度的评价

目的采用光激化学发光免疫技术(LiCA)测定促甲状腺激素(TSH)项目的功能灵敏度。方法制备系列低浓度的TSH样本,使用LiCA对其进行检测。将待测样本分成10个批次,选用3个批号的TSH检测试剂,并进行3次校准,最终以批间变异系数(CV)=20%确定TSH项目的功能灵敏度,对其进行验证。结果 LiCA检测TSH项目的功能灵敏度验证值为0.018 mIU/L。结论 LiCA检测TSH项目的功能灵敏度能够达到美国国家临床生化学院(NCAB)的相关要求,有助于TSH项目实验室检测技术发展的需要。

光激化学发光法与电化学发光免疫法检测甲胎蛋白的一致性

目的:参照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)的EP9-A2文件,对测定血清中甲胎蛋白(AFP)含量的电化学发光免疫法和光激化学发光法进行方法学比对试验,比较二者结果的一致性。方法:收集40例患者血清标本,以罗氏Cobas601电化学发光免疫分析仪为比较仪器(x),博阳LICA光激化学发光免疫分析仪为实验仪器(y),同时检测血清中AFP的含量;分析2种生化仪测定结果之间的相关性和2种方法检测结果的一致性。结果:2种仪器测定的结果相关性良好(r=0.9925),预期偏倚可以接受。结论:在严格按操作规程进行检测的前提下,2种方法测定结果基本一致,其偏差可为临床所接受。当同一实验室同一检验项目存在2种以上检测方法时,应进行方法比对,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性。

小鼠肿瘤坏死因子-α光激化学发光免疫法的建立

采用光激化学发光免疫法（LICA）建立快速定量检测小鼠mTNF-α。用两株mTNF-α不同表位的单克隆抗体（McAb）,一株McAb包被发光微粒,另一株为生物素化McAb,两者与链亲和素包被的感光微粒构建双McAb夹心法mT-NF-α-LICA。数据采用双对数函数处理程序。结果表明：方法灵敏度为0.5ng/L;ED20、ED50、ED80分别为14.96 ng/L、77.5 ng/L、401.0 ng/L;可测范围为0.5~1200 ng/L;批内和批间CV分别为7.8%和10.5%;平均回收率为100.3%。mTNF-α-LICA与ELISA有较好的相关性。本文建立的mTNF-α-LICA法是mTNF-α检测中灵敏的方法,该方法稳定性好,具有很好的应用前景。

尿游离皮质醇化学发光免疫分析

目的 :应用IMMULITE化学发光系统测定尿游离皮质醇并进行评价。方法 :尿液以二氯甲烷抽提后行化学发光免疫分析。结果 :抽提回收率为 (92 7～ 10 5 33) % ,平均为 97 74 % ;稀释试验O/E比值为 87 9～ 10 7 9,平均为 10 0 76 % ;批内变异系数分别为 9 4 %、3 7%、8 1% ,平均 7 1% ,批间变异系数为 7 7%、5 7%、9 7% ,平均 7 7% ;4 2份样本结果分析本法与RIA相关性好r =0 .90 5 (P <0 .0 1) ;正常人参考范围(17 34～ 116 0 2 ) μg/2 4h。结论 :本法具有良好的准确性、健全性和重复性 ,适用于临床常规测定。

增强化学发光分析仪器中光电检测系统的设计与实验

增强化学发光分析仪器中光电检测系统的设计与实验王勇徐大雄（北京邮电大学无线系１０００８８）朱一川许士坤邹俊伟齐莉周蓉李海珠（北京市新技术应用研究所１０００３５）和平（陕西省华阴市场８８＃西安７１４２００）增强化学发光（ＥｎｈａｎｃｅｄＣｈｅｍｉｌｕｍ...

基于光激化学发光均相免疫检测技术的黄曲霉毒素检测方法研究

黄曲霉毒素是一种毒性极强的生物毒素,广泛存在于各种农产品与食品中,对公众健康危害极大。提出了一种基于光激化学发光均相免疫检测技术的黄曲毒素B1检测方法,利用生物素亲和及抗原与抗体免疫反应,形成受体微球—AFB1-BSA完全抗原—AFB1单抗体—供体微球的聚合体系,在激发光作用下产生化学发光反应,根据化学发光值可定量分析样品中黄曲霉毒素浓度。通过分析并优化反应条件,包括各种反应物浓度、反应体系体积、反应温度与时间等,可实现最低检测限0.048ng/mL、最低定量限0.22ng/mL、批内与批间变异系数均小于10%、植物油样品中AFB1的加标回收率在87～105%之间。方法灵敏度高、特异性强、免清洗、检测速度快,在真菌毒素现场快速检测领域具有广阔的应用前景。

CHEMCLIN600全自动化学发光分析系统测定TP的性能验证与评价

医学实验室认可的专用准则-ISO 15189《医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学检验领域的应用说明》中，5“技术要求”中的5.5.2要求对检测系统或方法的主要分析性能进行验证，证实其能够达到临床检测所要求的标准［1-2］。本文结合实际工作，查阅相关文献，验证了CHEMCLIN600全自动化学发光分析系统测定梅毒抗体（TP）的分析性能，现将结果报告如下。

光激化学发光分析法定性检测血清CMV-IgM抗体

目的:建立一种基于光激化学发光分析(LiCA)技术定性检测血清CMV-IgM抗体的新方法。方法:利用CMV抗原包被的发光微球,生物素标记的鼠抗人IgM抗体以及链霉亲和素包被的感光微球共同构成完整的分析体系,优化反应缓冲液、抗原抗体工作浓度和待检血清稀释比例,并进行方法学评价和临床结果比对。结果:本方法的批内和批间变异系数为5.3%~6.1%和6.9%~9.8%,均小于10%;ROC曲线分析显示,曲线下面积为0.997,灵敏度为100%,特异度为98.9%;在100例血清样本的检测中,本方法与LIAISON检测结果符合率为95.0%。结论:成功建立了LiCA间接法反应模式定性检测CMV-IgM抗体的方法。该检测方法操作简单、快速、灵敏度高,有潜在的临床应用前景。

酶联免疫吸附法与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床价值对比

目的探讨酶联免疫吸附法与光激化学发光法检测乙型肝炎(乙肝)病毒的临床应用价值。方法84例疑似乙肝患者,均抽取清晨空腹静脉血,分为2份,分别进行光激化学发光法和酶联免疫吸附法检测。对比两种检验方法的乙肝两对半指标[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]阳性检出率及对乙肝的诊断效果。结果光激化学发光法的HBsAg、HBsAb和HBeAg阳性检出率分别为86.90%、86.90%、85.71%,显著高于酶联免疫吸附法的75.00%、73.81%、72.62%,差异有统计学意义(P<0.05)。光激化学发光法的“小三阳”检出率60.71%显著高于酶联免疫吸附法的45.24%,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA显示:阳性72例、阴性12例。光激化学发光法对乙肝的诊断特异度91.67%高于酶联免疫吸附法的75.00%,但差异无统计学意义(P>0.05);光激化学发光法对乙肝的诊断敏感度98.61%、准确性97.62%显著高于酶联免疫吸附法的87.50%、85.71%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论光激化学发光法用于乙肝病毒血清学检验的敏感度和准确性较高,可作为首选的检验方法,必要时可两者联合,进一步提升诊断准确性。

酶联免疫吸附检验与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床对比研究

目的探讨酶联免疫吸附检验与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床对比。方法选取该院2018年12月—2019年12月收治的100例乙肝病毒携带者,均经临床确诊,两组乙肝病毒携带者均按照常规方式获取标本,检测患者乙肝病毒标记物(乙肝核心抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原),根据不同检测分为两组,对照组(n=50)接受酶联免疫吸附法检测,观察组(n=50)接受光激化学发光法检测,对比两种检测方法的乙肝病毒标记物阳性概率和检测灵敏度。结果观察组乙肝核心抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性率分别为70.00%、42.00%、44.00%、24.00%、64.00%,对照组分别为66.00%、42.00%、30.00%、12.00%、50.00%。两组乙肝病毒携带者的乙肝病毒标记物中乙肝核心抗体、乙肝e抗原阳性概率对比差异无统计学意义(χ^(2)=0.368、0.000,P>0.05);观察组乙肝病毒标记物中乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性概率明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.204、4.878、3.998,P<0.05)。光激化学发光法的检测最低浓度为0.05 IU/mL;酶联免疫吸附法的检测最低浓度为0.14 IU/mL;0.05 IU/mL<0.14 IU/mL,说明光激化学发光法的检测灵敏度更高。结论两种检测方法均具有一定价值,但光激化学发光法的检测准确度和灵敏度更高,有利于动态监测乙型肝炎。