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基于光激活定位显微镜的膜蛋白鉴定技术
被引量:
1
1
作者
黄丽
方维焕
+1 位作者
俞盈
宋厚辉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期1378-1387,共10页
病原菌膜蛋白的原位标记和定位追踪是一项非常繁琐的工作。为了建立一种可以用于快速鉴定膜蛋白、且分辨率达到纳米级别的膜蛋白荧光定位技术,将结核分枝杆菌外膜蛋白OmpA与具有光敏活性的蛋白mEos2m在无致病性的耻垢分枝杆菌中进行融...
病原菌膜蛋白的原位标记和定位追踪是一项非常繁琐的工作。为了建立一种可以用于快速鉴定膜蛋白、且分辨率达到纳米级别的膜蛋白荧光定位技术,将结核分枝杆菌外膜蛋白OmpA与具有光敏活性的蛋白mEos2m在无致病性的耻垢分枝杆菌中进行融合表达。重组菌固定在载玻片上后,利用405 nm激光激活mEos2m。利用普通荧光体视显微镜、正置荧光显微镜和超分辨率光激活定位显微镜观察OmpA-mEos2m,分析融合蛋白在细菌内的分布情况,并捕获光激活蛋白在细胞膜上释放的光子信号。通过超分辨率光激活定位显微镜,发现OmpA-mEos2m融合蛋白在细胞膜上呈"带"状环绕分布,这是观察到膜蛋白在细胞膜上定位的最直接证据。mEos2m与OmpA融合表达后,并不改变OmpA的膜蛋白属性和定位特征。因此可以将mEos2m用于其他非多聚体膜蛋白的融合和定位研究。可以应用非致病性的耻垢分枝杆菌作为模型,采用高分辨率活菌成像技术,研究致病性的结核分枝杆菌蛋白结构、定位和功能。这是目前为止国内采用光激活定位显微成像技术研究膜蛋白的首次报道。
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关键词
光激活定位显微镜
结核分枝杆菌
膜蛋白
光
子
原文传递
用于细胞脂滴超分辨荧光成像的有机荧光探针研究进展
被引量:
3
2
作者
周日
王晨光
卢革宇
《中国光学(中英文)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1228-1242,共15页
脂滴是真核细胞中必不可少的一种球形细胞器,与很多细胞生理学过程息息相关。荧光成像技术是观察研究脂滴最有力的工具之一。受光学衍射极限的限制,传统的宽场以及共聚焦显微镜所能达到的成像分辨率约为250 nm左右,这对于观测小脂滴,尤...
脂滴是真核细胞中必不可少的一种球形细胞器,与很多细胞生理学过程息息相关。荧光成像技术是观察研究脂滴最有力的工具之一。受光学衍射极限的限制,传统的宽场以及共聚焦显微镜所能达到的成像分辨率约为250 nm左右,这对于观测小脂滴,尤其是新生脂滴(尺寸约30~60 nm)来说是远远不够的。在这种情况下,近年来新兴的各种能够打破衍射极限的超分辨荧光显微镜(如受激发射损耗显微镜、结构光照明显微镜以及光激活定位显微镜等)逐渐吸引了科研人员的兴趣。为了得到高分辨率脂滴荧光图像,除了上述超分辨显微镜之外,还需要具有与之相匹配的高性能荧光探针。本文将简要介绍这几种超分辨显微镜的工作原理,讨论其对荧光探针光物理性质的特殊要求,并进一步系统总结脂滴超分辨成像荧光探针的研究进展。与此同时,本文将分析对比不同超分辨显微镜在脂滴荧光成像方面的优势与不足,并对其发展趋势进行展望。
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关键词
脂滴
超分辨成像
受激发射损耗
显微镜
结构
光
照明
显微镜
光激活定位显微镜
荧
光
探针
下载PDF
职称材料
超分辨率荧光显微技术——2014年诺贝尔化学奖简介
被引量:
1
3
作者
葛春洋
马宏佳
《化学教与学》
2014年第11期2-4,共3页
介绍了2014年诺贝尔化学奖获奖成果超分辨率荧光显微技术的原理和发现过程、获奖者简况以及超分辨率荧光显微技术的应用前景。
关键词
诺贝尔化学奖
超分辨率荧
光
显微镜
受激发射损耗
显微镜
光激活定位显微镜
下载PDF
职称材料
题名
基于光激活定位显微镜的膜蛋白鉴定技术
被引量:
1
1
作者
黄丽
方维焕
俞盈
宋厚辉
机构
浙江农林大学动物科技学院
浙江大学动物预防医学研究所浙江省动物预防医学重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期1378-1387,共10页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA101602)
国家自然科学基金(Nos.31272570
+1 种基金
30800014)
浙江农林大学人才启动项目(No.2034020075)资助~~
文摘
病原菌膜蛋白的原位标记和定位追踪是一项非常繁琐的工作。为了建立一种可以用于快速鉴定膜蛋白、且分辨率达到纳米级别的膜蛋白荧光定位技术,将结核分枝杆菌外膜蛋白OmpA与具有光敏活性的蛋白mEos2m在无致病性的耻垢分枝杆菌中进行融合表达。重组菌固定在载玻片上后,利用405 nm激光激活mEos2m。利用普通荧光体视显微镜、正置荧光显微镜和超分辨率光激活定位显微镜观察OmpA-mEos2m,分析融合蛋白在细菌内的分布情况,并捕获光激活蛋白在细胞膜上释放的光子信号。通过超分辨率光激活定位显微镜,发现OmpA-mEos2m融合蛋白在细胞膜上呈"带"状环绕分布,这是观察到膜蛋白在细胞膜上定位的最直接证据。mEos2m与OmpA融合表达后,并不改变OmpA的膜蛋白属性和定位特征。因此可以将mEos2m用于其他非多聚体膜蛋白的融合和定位研究。可以应用非致病性的耻垢分枝杆菌作为模型,采用高分辨率活菌成像技术,研究致病性的结核分枝杆菌蛋白结构、定位和功能。这是目前为止国内采用光激活定位显微成像技术研究膜蛋白的首次报道。
关键词
光激活定位显微镜
结核分枝杆菌
膜蛋白
光
子
Keywords
photoactivatable localization microscope, Mycobacterium tuberculosis, membrane protein, photon
分类号
Q51-3 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
用于细胞脂滴超分辨荧光成像的有机荧光探针研究进展
被引量:
3
2
作者
周日
王晨光
卢革宇
机构
吉林大学电子科学与工程学院集成光电子学国家重点实验室
出处
《中国光学(中英文)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1228-1242,共15页
基金
国家自然科学基金(No.61831011,No.62075079)。
文摘
脂滴是真核细胞中必不可少的一种球形细胞器,与很多细胞生理学过程息息相关。荧光成像技术是观察研究脂滴最有力的工具之一。受光学衍射极限的限制,传统的宽场以及共聚焦显微镜所能达到的成像分辨率约为250 nm左右,这对于观测小脂滴,尤其是新生脂滴(尺寸约30~60 nm)来说是远远不够的。在这种情况下,近年来新兴的各种能够打破衍射极限的超分辨荧光显微镜(如受激发射损耗显微镜、结构光照明显微镜以及光激活定位显微镜等)逐渐吸引了科研人员的兴趣。为了得到高分辨率脂滴荧光图像,除了上述超分辨显微镜之外,还需要具有与之相匹配的高性能荧光探针。本文将简要介绍这几种超分辨显微镜的工作原理,讨论其对荧光探针光物理性质的特殊要求,并进一步系统总结脂滴超分辨成像荧光探针的研究进展。与此同时,本文将分析对比不同超分辨显微镜在脂滴荧光成像方面的优势与不足,并对其发展趋势进行展望。
关键词
脂滴
超分辨成像
受激发射损耗
显微镜
结构
光
照明
显微镜
光激活定位显微镜
荧
光
探针
Keywords
lipid droplets
super-resolution imaging
stimulated emission depletion microscopy
structured illumination microscopy
photoactivated localization microscopy
fluorescent probes
分类号
O652.7 [理学—分析化学]
O439 [机械工程—光学工程]
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职称材料
题名
超分辨率荧光显微技术——2014年诺贝尔化学奖简介
被引量:
1
3
作者
葛春洋
马宏佳
机构
《化学教与学》杂志社
南京师范大学教师教育学院
出处
《化学教与学》
2014年第11期2-4,共3页
文摘
介绍了2014年诺贝尔化学奖获奖成果超分辨率荧光显微技术的原理和发现过程、获奖者简况以及超分辨率荧光显微技术的应用前景。
关键词
诺贝尔化学奖
超分辨率荧
光
显微镜
受激发射损耗
显微镜
光激活定位显微镜
分类号
G633.8 [文化科学—教育学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于光激活定位显微镜的膜蛋白鉴定技术
黄丽
方维焕
俞盈
宋厚辉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
原文传递
2
用于细胞脂滴超分辨荧光成像的有机荧光探针研究进展
周日
王晨光
卢革宇
《中国光学(中英文)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
下载PDF
职称材料
3
超分辨率荧光显微技术——2014年诺贝尔化学奖简介
葛春洋
马宏佳
《化学教与学》
2014
1
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职称材料
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