温度对Offner高光谱成像光谱仪图像质量与光谱数据的影响

Offner高光谱成像光谱仪具有体积小,质量轻且结构简单等特点,并已成为深空深地、遥感、地质、民用等领域的重要装备。为了能够获得更清晰更准确的图像和光谱数据,我们对Offner高光谱成像光谱仪进行不同环境温度变化测试。通过理论分析到实验室模拟,再到实际运用,深入分析了环境温度在变化范围内(0℃~40℃)对图像及光谱数据的准确性和稳定性的影响。

基于MDLC-MS/MS技术的股骨头缺血性坏死的组织蛋白质组分析

目的:应用组织蛋白质组学方法探寻与成人非创伤性股骨头缺血性坏死(ONFH)相关的蛋白质。方法:自2008年7月至2009年2月,从非创伤性ONFH(男7例,女3例)和新鲜股骨颈骨折(男、女各5例)而行人工髋关节置换术的患者中随机选取10例,平均年龄分别为52岁和63岁。术中取ONFH患者股骨头中坏死骨组织为试验组,取股骨颈骨折患者股骨头中的正常骨组织样品为对照组。用四步溶剂法提取骨组织总蛋白,经SDS-PAGE分离和酶解,应用多维液相色谱与串联质谱联用技术分离鉴定组织蛋白,以TPP软件检测两组蛋白质的差异表达水平,并用Turbo SEQUEST软件鉴定差异表达蛋白质。同时Western免疫印迹验证质谱检测的准确性。结果:试验组和对照组样品中分别鉴定二肽段以上的高可信度蛋白质数量1233个和999个,假阳性率0.8%。试验组中共鉴定差异表达蛋白质192个,其中表达量上调3倍以上的蛋白点107个,下调3倍以上53个,其中34种蛋白质与ONFH密切相关。Western免疫印迹证实试验组样品中GPCR26和CHST2表达量下调,与质谱结果一致。结论:非创伤性ONFH存在复杂的病理生理学过程,本研究发现的差异表达蛋白极有可能成为ONFH早期临床诊断的候选生物学标志物。

乌蕨中抑菌活性成分核磁共振波谱分析

目的 :对乌蕨 (Stenolomachusanum(L)Ching)中活性成分进行分离提纯。方法 :采用层析法对乌蕨乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分化学成分进行分离纯化 ,再用质谱和核磁共振进行结构鉴定。结果 :得到了 3个具有抗菌成分的化合物 ,(1)芹菜素、(2 )丁香酸和 (3)原儿茶酸 ,其中芹菜素是在该植物成分中首次报道。结论 :丁香酸、原儿茶酸和芹菜素为该植物的主要抑菌活性成分。

在固相pH梯度4~7范围内海洛因成瘾者血浆蛋白质组分析(英文)

目的比较鉴定海洛因成瘾者和正常人血浆蛋白质组差异,为研究海洛因成瘾相关血浆蛋白提供线索。方法海洛因成瘾者（n=5）和正常对照者（n=5）血浆蛋白经剔除白蛋白和免疫球蛋白IgG后,以固相pH梯度4-7胶条等电聚焦为第一向,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,进行蛋白双向电泳。图像分析软件Image Master Elit 5.0分析蛋白质2维图谱。手工挖取组间相差1.5倍的差异点,串联质谱分析鉴定。结果每张图谱平均检测到350±21个蛋白（亚基）斑点,其中5个蛋白点在2组图谱中差异1.5倍以上,鉴定结果分别为γ纤维蛋白原、人α1B糖蛋白、α1-抗胰蛋白酶原、视黄醇结合蛋白载体蛋白四聚体单体和铜蓝蛋白。结论海洛因成瘾者血浆与正常人血浆对比存在蛋白质组差异。某些差异蛋白可能与海洛因成瘾造成的神经损伤相关。

大鼠脊髓横断后蛋白质的双向电泳分析及质谱鉴定

目的建立急性脊髓损伤双向电泳图,分析损伤后脊髓内蛋白质的差异表达。方法使用裂解液提取脊髓蛋白,以双向电泳技术分离蛋白质,凝胶染色、图象分析后选取蛋白点,通过质谱技术获取肽质量指纹谱,在蛋白质数据库中查询蛋白质。结果成功建立重复性较好的脊髓蛋白质组双向电泳图,找出13个表达明显变化的蛋白点并获得这些蛋白质的肽质量指纹谱,成功鉴定出11个蛋白质。结论成功构建大鼠正常脊髓与损伤脊髓双向电泳图,用质谱技术鉴定了部分蛋白质。这些蛋白质的有些功能最近才被人们认识。相信在脊髓损伤后的继发性损伤中这些蛋白质可能会起到重要的作用。

胰腺癌胰液肽表达谱变化的分析

目的:分析正常胰液与胰腺癌胰液多肽表达谱的差异。方法:用ZipTipC18提取胰液样品多肽,采用基质辅助激光解析离子化飞行时间/飞行时间质谱技术(MALDITOF/TOFMS)对胰液的多肽表达谱进行肽质量指纹图谱(PMF)分析,对获得的数据进行标准化处理,对高丰度的差异肽段进行TOF/TOF分析,建立胰腺癌胰液的诊断模型。结果:通过质谱分析,得到了反映胰腺癌胰液多肽组成的特征图谱,通过TOF/TOF分析,一个胰腺癌胰液相关的肽段鉴定为fibrinogenα链前体,氨基酸序列为DS-GEGDFLAEGGGVR。结论:ZipTipC18富集胰液样品后直接进行MALDI-TOF/TOFMS分析的技术,可应用于快速扫描与胰腺癌有关的多肽表达谱,建立胰腺癌胰液的多肽诊断模型,具有较好的临床应用价值。

苯磺酸氨氯地平片在健康人体的药动学及生物等效性评价

目的:研究苯磺酸氨氯地平片在健康人体的药代动力学特征及其生物等效性评价.方法:18名健康志愿受试者,口服苯磺酸氨氯地平试验品和参比品10 mg,用标准二阶段交叉设计自身对照试验方法,以液相色谱-质谱-质谱联用法测定服药后120 h内不同时刻的血药浓度,计算主要药动学参数,并采用方差分析和双单侧t检验(1-2α)90%置信区间进行生物等效性评价.结果:受试者分别口服受试品和参比品后,其主要药动学参数Tmax,Cmax,t1/2和AUC(0-120 h)分别为:(8.9±2.5)和(8.2±2.2)h;(5.1±2.3)和(5.0±2.2)μg/L;(45±10)和(48±24)h;(191±69)和(196±53)μg/(L.h).受试品的相对生物利用度为(99±23)%.结论:结果表明,两种制剂具有生物等效性.

LC-MS法评价两种苯磺酸氨氯地平片的人体生物等效性

目的：建立LC-MS法测定人体血浆中苯磺酸氨氯地平的药物浓度,并进行两种制剂的生物等效性评价。方法：20例健康受试者单剂量交叉口服10 mg苯磺酸氨氯地平供试制剂或参比制剂后,采用LC-MS测定人体血浆中不同时间点苯磺酸氨氯地平的浓度,计算其药代动力学参数和相对生物利用度,评价两制剂的生物等效性。结果：苯磺酸氨氯地平供试制剂和参比制剂主要药代动力学参数如下：Cmax分别为（6.21±1.88）（、6.03±1.08）ng/ml,AUC0-120分别为（250.68±52.61）、（246.14±52.11）ng·h/ml,Tmax分别为（6.0±2.3）、（6.1±2.5）h,t1/2分别为（40.45±6.68）、（43.74±9.05）h。本方法在0.1-20.0 ng/ml浓度范围内线性关系良好。最低可定量浓度为0.1 ng/ml,两制剂主要药动学参数经统计学检验无显著性差异。结论：本方法简单、快速、准确,两种制剂具有生物等效性。

用液相色谱-质谱-质谱法测定人血清中非洛地平浓度

目的:建立液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)法测定人血清中非洛地平的浓度。方法:血清样品经液-液萃取预处理。色谱柱为Xterra柱(50 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.02%氨水,采用梯度洗脱,流速为0.3 mL/min。非洛地平和尼莫地平(内标)的多反应监测(MRM)扫描离子对分别为m/z382.1→145和m/z417.2→92,两者的保留时间分别为1.24 min和1.06 min。结果:非洛地平在0.04～20 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999 7),低、中、高浓度(0.08、8.0、16.0 ng/mL)的日内RSD分别为6.60%、7.22%和5.01%(n=6),日间RSD分别为9.42%、8.46%和5.12%(n=14),准确度为98.21%～106.20%(n=6)。结论:本法操作简便,检测准确、灵敏、专一,重复性好,适用于非洛地平血药浓度监测和药动学及生物利用度研究。

高效液相色谱-串联质谱联用法测定蒲地蓝消炎口服液中六种成分的含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用法(UPLC-MS-MS)测定蒲地蓝消炎口服液中野黄芩苷、黄芩苷、绿原酸、汉黄芩素、黄芩素和咖啡酸6种成分的含量。方法色谱柱为Phenomenex Luna C8(2.0 mm×50 mm,3μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,采用梯度洗脱,体积流量为200μl/min。质谱采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行负离子扫描。结果 6种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,加样回收率在96.25%~101.79%。结论该方法专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于蒲地蓝消炎口服液的质量控制。

格列齐特2种缓释片单次和多次给药 的药动学和生物利用度比较(英文)

目的:比较国产和进口格列齐特缓释片的人体药动学和相对生物利用度。方法:采用单次和多次给药的4周期双交叉设计,用液相色谱质谱联用法测定20名健康男性志愿者血浆中格列齐特的浓度。结果:单次口服国产和进口格列齐特缓释片后的药动学参数分别为:tmax为(7.2±s1.5)h和(6.9±1.4)h,cmax为(2.4±0.8)mg·L-1和(2.3±0.6)mg·L-1,t1/2为(13.4±1.2)h和(13.7±1.3)h,AUC0～60为(48±14)mg·h·L-1 和(48±14)mg·h·L-1,AUC0～∞为(51±15)mg·h·L-1和(50±14)mg·h·L-1,平均滞留时间(MRT)为(22.4±1.9)h和(22.78±1.9)h。多次(60mg,6d)口服国产和进口格列齐特缓释片后的稳态药动学参数分别为:tmax为(6.1±1.4)h和(6.5±1.4)h,cmax为(4.6±0.9)mg·L-1和(4.7±1.1) mg·L-1,cmin为(0.23±0.08)mg·L-1和(0.26±0.08)mg·L-1,稳态血药浓度均值(cav)为(1.6±0.3)mg·L-1和(1.6±0.3)mg·L-1,AUCss为(94±19)mg·h·L-1和(95±20)mg·h·L-1,波动度(DF)为(282±33)%和(283±43)%。单次和多次口服国产与进口格列齐特缓释片相对生物利用度分别为(102±9)%和(99±10)%。上述单次和多次给药的药动学参数经方差分析无显著差异(P>0.05)。结论:双单侧t检验表明2种制剂具有生物等效性。

薄层色谱扫描法和气相色谱/质谱法快速诊断有机磷农药中毒

目的建立薄层色谱法快速定性和气相色谱(GC)/质谱(MS)法定性定量检测有机磷农药,快速诊断有机磷农药中毒。方法检材经二氯甲烷萃取后,薄层色谱法快速定性,GC/MS选择离子模式定性定量检测检材中有机磷农药浓度。结果对硫磷、甲拌磷、马拉硫磷、辛硫磷和久效磷在紫外灯下均有较好的紫外吸收,用双波长薄层色谱扫描仪对斑点做原位紫外吸收扫描,最大吸收波长分别为300,240,225,290,260nm,可配合比移值进行定性分析;GC/MS选择离子检测方式进行定性定量检测,各药物的特征离子峰分别为:97,109,291;76,97,121;93,125,173;77,97,129;67,97,127。结论薄层色谱扫描法定性检测检材中有机磷农药,具有快速、准确、操作简便等特点,加上GC/MS定性定量检测,不仅提高了方法的灵敏度,而且使结果更加准确可靠,可应用于有机磷农药中毒的快速诊断和有机磷农药中毒致死的法医学鉴定。

HPLC-MS法测定人血浆中依普利酮浓度

目的:建立人血浆中依普利酮浓度的HPLC-MS测定法.方法:血浆样品中加入内标溶液后,以液-液萃取方法进行样品处理,采用HPLC-MS方法测定其血药浓度.结果:标准曲线线性范围为2.080～4160μg/L,标准曲线线性关系良好,回归方程为:f=0.0005520+0.001333×C(r=0.9984).高、中、低3浓度的批内和批间变异均小于15%,提取回收率在73.6%～75.5%.结论:建立人血浆中依普利酮浓度的HPLC-MS测定法操作简便,灵敏度高,适用于依普利酮的血药浓度检测及药动学研究.

液相色谱-线性离子阱质谱法检测草鱼中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物

目的建立鱼中的孔雀石绿（MG）、结晶紫（GV）及其代谢物无色孔雀石绿（LMG）、无色结晶紫（LGV）的测定方法。方法使用液相色谱线性离子阱串联质谱技术和同位素稀释技术，Mcllvaine缓冲液和乙腈提取，OASIS MCX SPE柱净化，洗脱液在选择反应检测模式（SRM）下测定。结果方法的检出限CCα为0．03～0．05μg／kg，定量限CCβ为0．05～0．09μg/kg。5个不同加标水平鱼样中4种目标化合物的平均回收率为84．7％～105．1％，RSD为1．3％～14．9％（n=5）。结论本方法定量准确可靠，可用于鱼样品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物的测定。

稳定性同位素稀释技术结合气相色谱-离子阱质谱法检测葡萄酒中的氨基甲酸乙酯

目的建立葡萄酒中氨基甲酸乙酯（EC）的测定方法。方法使用气相色谱-离子阱质谱法和稳定性同位素稀释技术,采用硅藻土Extrelut NT进行基质固相分散萃取净化,二氯甲烷洗脱,选择离子储存方式SIS测定。结果方法的线性范围在10-1000μg/kg,检出限为2μg/kg,定量限为6μg/kg。3个不同加标水平葡萄酒中氨基甲酸乙酯的平均回收率为88.5%～112.8%,RSD为5.8%-9.5%（n=5）。结论本方法准确可靠,可用于葡萄酒中氨基甲酸乙酯的测定。

高效液相色谱/质谱联用法测定保健食品中荷叶碱的含量

为建立高效液相色谱-紫外-电喷雾质谱(HPLC-UV-ESI/MS)联用测定保健食品中荷叶碱的方法,以乙腈和0.1%三乙胺水溶液作流动相,在反相C18柱上梯度淋洗,以质谱定性,紫外定量进行检测.结果在0.2～20 μg/ml范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系,样品平均回收率为97.3%.该方法抗干扰能力强,可以快速、准确地测定保健食品中的荷叶碱.

液相色谱-质谱联用法测定犬血浆中青蒿素浓度

目的建立犬血浆中青蒿素(ART)浓度的液相色谱-质谱联用方法。方法以蒿甲醚(AMT)为内标,采用乙腈和10mmoL/L醋酸铵(含0.1%甲酸)溶液(85:15,V/V)为流动相,流速为0.3ml/min,Agilent-C18(50mm×4.6mm,1.8μm)色谱柱为分析柱,采用电喷雾电离源(ESI),多反应监测方式进行正离子检测。结果测定犬血浆中青蒿素浓度的线性范围为2～500ng/ml,定量下限为2ng/ml。日内、日间精密度(RSD)均<7.7%,提取回收率78%～90%。结论本方法适应于犬体内青蒿素药代动力学研究。

人晶状体上皮细胞蛋白质组的双向电泳和质谱鉴定

目的:建立人晶状体上皮细胞蛋白质组研究体系,探讨双向电泳和质谱鉴定技术在人晶状体上皮细胞蛋白质组研究中的作用。方法:体外培养人晶状体上皮细胞株,用两种不同方法提取总蛋白,进行固相pH梯度(IPG)等电聚焦双向凝胶电泳,凝胶通过GS-800扫描仪(Bio-Rad)获取图像并使用PDQuest专业图像分析软件分析。在此基础之上,胰酶消化蛋白质斑点并进行质谱分析。结果:获得了重复性较好的人晶状体上皮细胞蛋白质组电泳图谱。晶状体蛋白质斑点在等电点pH值为4-7、相对分子质量为17-72 kD之间均有分布。其中高丰度蛋白点主要分布于分子量19-50 kD、PI 5-7范围内。2个蛋白点通过质谱分析和数据库的检索得到了初步的鉴定。结论:建立起了一个稳定的分析人晶状体上皮细胞蛋白质组学实验体系;为进一步研究人类晶状体在生理状态及白内障等病理条件下的改变提供了蛋白质组学的研究方法和途径。

用液相色谱-串联质谱法测定人血清和尿液中非那西丁及其代谢物浓度

目的：建立测定人体血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的液相色谱一串联质谱法。方法：用乙酸乙酯萃取血清和尿液中非那西丁及其代谢产物。色谱柱为Restek Allure PFPP柱（100mm×2．1mm，5μm），流动相为乙腈-0．1％甲酸水溶液（30：70，V／V），流速0．3mL／min。以磺胺甲氧嘧啶为内标，非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的多反应监测（MRM）离子对分别为m／z 180→138、152→110和281→156。测定13名健康受试者口服非那西丁1．25g后血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的浓度。结果：非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的保留时间分别为4．1、1．4和2．8min。在0．2～50μg／mL范围内，非那西丁和对乙酰氨基酚的浓度与峰面积相关性良好（r〉0．9990）。非那西丁和对乙酰氨基酚的准确度分别为87．1％～101．5％和89．5％～107．3％，精密度分别为0．85％～7．83％和2．53％～8．74％，提取回收率为53．0％～76．0％，基质效应为92．0％～106．3％，均符合生物样本分析方法的有关要求。除万古霉素和甲泼尼龙外，其他临床常用药物对测定无干扰。13名健康受试者血清中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为（5．94±4．79）和（8．81±2．91）μg／mL；尿液中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为（3．25±1．10）和（570．45±187．13）μg／mL。结论：该方法简便、灵敏、特异性强，具有临床实用价值。