克林霉素耐药金黄色葡萄球菌检出率与抗菌药物使用的相关性分析

目的:建立基于偏最小二乘(PLS)回归算法的克林霉素耐药金黄色葡萄球菌(CRSA)检出率与抗菌药物使用相关性模型,为指导抗菌药物临床的合理使用提供依据。方法:以不同季度抗菌药物的用药频度(DDDs)为自变量,以同期和非同期CRSA的检出率为因变量,分别建立PLS回归模型,分析CRSA检出率比抗菌药物使用的滞后性。根据各变量的VIP值,筛选对CRSA检出率影响较显著的品种。结果:CRSA的检出率滞后于抗菌药物的使用2个季度,与头孢哌酮/舒巴坦、阿奇霉素、头孢呋辛的DDDs呈显著正相关。结论:PLS回归算法能同时分析CRSA检出率与多种抗菌药物使用的相关性,可为CRSA研究提供新的方法。

百里香酚对犊牛源生物被膜阳性金黄色葡萄球菌耐药性的消除作用

为了了解内蒙古地区犊牛病料中生物被膜阳性金黄色葡萄球菌的流行情况、耐药情况及百里香酚对生物被膜阳性金黄色葡萄球菌耐药性的消除作用。本试验采用生化鉴定和PCR方法,对采集到的104份犊牛病料进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定;采用K-B法检测了金黄色葡萄球菌分离株对18种抗菌药物的敏感性;采用改良结晶紫染色法测定分离株的生物被膜形成能力;选取2株生物被膜强阳性菌株,采用微量肉汤稀释法测定百里香酚对分离株的最小抑菌浓度,并进行百里香酚耐药性消除试验。结果显示,在104份犊牛病料中共分离鉴定获得43株金黄色葡萄球菌。药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离株对氨苄西林、头孢西丁、卡那霉素、复方新诺明和红霉素5种抗菌药物的耐药率达到50.0%以上;74.4%(32/43)的分离株为多重耐药株。生物被膜形成能力强、中、弱和无生物被膜形成能力的分离株分别占比23.3%(10/43)、16.3%(7/43)、32.6%(14/43)和27.9%(12/43);生物被膜阳性株中83.9%(26/31)为多重耐药株。百里香酚对2株生物被膜强阳性株的最小抑菌浓度均为256 mg/mL,经百里香酚处理后均恢复了对头孢噻肟的敏感性。结果表明,百里香酚对生物被膜阳性金黄色葡萄球菌具有一定的耐药消除作用。

奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了了解新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的耐药表型及耐药基因携带情况,试验对采自石河子地区2个规模化奶牛场患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离,使用种特异性引物对分离株进行鉴定,并采用纸片琼脂扩散法、最小抑菌浓度(MIC)测定法和PCR方法对分离得到的金黄色葡萄球菌的耐药表型和耐药基因进行检测。结果表明:从患乳房炎奶牛的138份乳样中共分离出74株金黄色葡萄球菌,镜检为阳性球菌,经PCR扩增确定为金黄色葡萄球菌,分离率为53.62%(74/138)。所有分离株均有不同程度的耐药性,对万古霉素、甲氧西林、磺胺甲口恶唑、林可霉素、青霉素、恩诺沙星的耐药率分别为97.30%、82.43%、79.73%、71.62%、67.57%、67.57%,其他9种药物的耐药率为16.22%~59.46%;对庆大霉素和多西环素两种药物的敏感性较高,分别为52.70%、74.32%。耐3种及以上抗生素的菌株占90.54%,耐9种及以上抗生素的菌株占56.75%,其中1个分离株对所有检测的抗生素均耐受。74株分离株中共检测到blaZ、linA、ermB、aacA-aphD、aac6-aph2、aph(3′)-a和tetM 7种耐药基因,其中氨基糖苷类耐药基因aacA-aphD检出率最高,为8.10%,其余耐药基因的检出率在2.70%~4.05%之间。说明新疆石河子地区奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌普遍耐药,且多重耐药现象较为严重,建议临床上根据药敏试验结果科学治疗奶牛乳房炎。

金黄色葡萄球菌异质性耐药研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是人类和动物感染的常见病原菌。近年来,金黄色葡萄球菌已经对多种抗菌药物出现耐药性,关于金黄色葡萄球菌异质性耐药的研究也被频繁报道。异质性耐药现象是指存在异质性细菌种群,其中一个亚群或几个亚群与主要种群相比表现出更高水平的抗菌药物耐药性。该定义反映出异质性耐药现象具有很多特点,包括克隆性、稳定性、不同亚群的耐药水平以及异质性耐药亚群的频率应在10^(-7)及以上。异质性耐药可看成是敏感表型向耐药表型转化的中间阶段,往往导致临床治疗的失败。本文对异质性耐药的定义、检测方法等进行了介绍,并综述了金黄色葡萄球菌对糖肽类、磺胺类、β-内酰胺类和其他抗菌药物异质性耐药的流行情况及异质性耐药机制的研究,旨在加强对金黄色葡萄球菌异质性耐药的认识,以期为学者了解金黄色葡萄球菌异质性耐药流行情况及机制提供参考。

我国牛源金黄色葡萄球菌耐药情况及防控研究进展

金黄色葡萄球菌是导致奶牛乳腺炎的常见病因之一,而使用抗生素是预防和治疗其感染的唯一有效方法。但是,在长期面对抗生素的选择压力下,金黄色葡萄球菌对多种药物产生了耐药性,也使动物成为耐药基因的储存库,对食品安全和人类健康构成威胁。通过分析国内牛源金黄色葡萄球菌相关研究发现:我国牛源金黄色葡萄球菌耐药率不断提高,多重耐药程度不断加重,尤其北方高纬度地区面临更为严峻的耐药形势;我国牛源金黄色葡萄球菌具有丰富的分子流行特征,其中ST9、ST97、ST398为优势分型且分布广泛,MRSA SCCmecⅫ、SCCmecⅢ和SCCmecⅣ3种分型近年来呈现扩散分布趋势;为解决金黄色葡萄球菌耐药问题,国内正在研究中药制剂、噬菌体、益生菌、抗菌肽等4种抗生素代替方法,这些制剂具有较好的开发前景。本文综述了我国牛源金黄色葡萄球菌的耐药情况以及防控技术研究进展,可为牛源金黄色葡萄球菌耐药防治提供参考。

一株分离于生鲜乳的金黄色葡萄球菌毒力与耐药性分析

为了解生鲜乳中金黄色葡萄球菌的特性,试验通过无菌采集新疆某规模化牛场混合新鲜乳样,采用常规分离方法结合PCR方法检测特异性nuc基因分离鉴定金黄色葡萄球菌,分析分离菌株对7类11种抗生素的耐药表型,采用PCR方法对金黄色葡萄球菌常见重要的8种毒力基因和6种耐药基因进行检测并分析其致病性。结果表明新鲜乳样中分离到一株金黄色葡萄球菌;该菌对青霉素、氨苄西林耐药,对卡那霉素、四环素4种抗生素处于中介,对庆大霉素、红霉素、头孢唑林等5种抗生素敏感;携带sec、sea、hla、tsst-1、pvl、clf A 6种毒力基因和qac A、msr A、erm C、mec A 4种耐药基因;能引起感染小鼠明显的组织病理变化并导致死亡。说明分离于生鲜乳中的金黄色葡萄球菌携带众多毒力基因和耐药基因,具有广泛的多重耐药性。

内蒙古地区犊牛源金黄色葡萄球菌的耐药性分析及毒力基因检测

为了了解内蒙古地区犊牛源金黄色葡萄球菌的耐药表型、耐药基因及毒力基因的流行情况,试验对采集的104份犊牛病料(鼻拭子37份、口腔拭子13份、粪便样本54份)进行犊牛源金黄色葡萄球菌的分离纯化、生化鉴定及分子生物学鉴定,并对分离的犊牛源金黄色葡萄球菌菌株进行药敏试验、耐药基因及毒力基因检测。结果表明:通过对犊牛病料进行分离培养及生化鉴定,得到43株革兰氏阳性球菌,初步判定分离菌为犊牛源金黄色葡萄球菌,分离率为41.3%。43株分离株16S rDNA基因PCR扩增得到1 505 bp大小的目的条带,与预期结果相符。分离株对氨苄西林、头孢西丁、复方新诺明、卡那霉素等药物耐药,耐药率分别为100%、90.7%、81.4%、60.5%;对环丙沙星的耐药率最低,耐药率为9.3%。耐药基因中blaZ基因的检出率最高,为90.7%;norA与norB基因检出率相同,均为81.4%;ermA基因检出率为30.2%;ermB基因检出率为39.5%;emrC基因检出率为14.0%;Sul1基因检出率为53.5%;同时携带7种耐药基因的检出率为4.7%。毒力基因中hla基因的检出率最高,为58.1%;hlb基因检出率为27.9%;pvl基因检出率为18.6%;其余毒力基因未被检出。说明内蒙古地区犊牛源金黄色葡萄球菌耐药性比较严重,携带多重耐药基因,并携带hla、hlb、pvl毒力基因,建议临床上根据药敏试验结果科学合理地选择抗菌药物,有效做好疫病防控。

引起压疮感染的金黄色葡萄球菌生物膜形成情况及耐药性分析

目的 了解该院压疮感染患者标本中分离的金黄色葡萄球菌的人群分布、生物膜形成情况及耐药情况等流行病学特征,为临床提供重要依据。方法 2019年5月至2022年5月该院共收集到与压疮感染相关的金黄色葡萄球菌126株,采用Vitek MS质谱仪进行细菌鉴定,药敏试验采用纸片扩散法(K-B法),按美国临床实验室标准化协会2016-M100的标准进行药敏结果分析,用结晶紫染色法检测金黄色葡萄球菌生物膜并对生物膜形成能力进行判定,生物膜中分别加入葡萄糖和银离子粉末,观察其对生物膜形成的影响。结果 该院共收集到与压疮感染相关的金黄色葡萄球菌126株,各年龄段及各级压疮均有检出。形成生物膜的菌株占73.00%,其中Ⅳ期压疮分离的菌株形成生物膜的菌株比例(81.81%)高于其他分期(Ⅱ、Ⅲ期)分离的菌株(63.33%),差异有统计学意义(P<0.05);不同生物膜形成能力的菌株对青霉素G、四环素、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率较高,对替考拉宁、左氧氟沙星的耐药率较低,未检出对万古霉素耐药的革兰阳性菌,不同生物膜级别金黄色葡萄球菌的耐药性比较,差异无统计学意义(P>0.05);11.10 mmol/L葡萄糖可促进生物膜的形成,10.00μg/mL银离子抗菌凝胶对生物膜的形成有一定抑制作用。结论 导致Ⅳ期压疮感染的金黄色葡萄球菌生物膜形成的能力较强,生物膜的形成与压疮的分期进程有一定的关系;产生物膜的金黄色葡萄球菌的抗菌药物耐药性与生物膜的级别无明显关系;使用银离子和降低血糖水平对生物膜形成有一定的抑制作用。

金黄色葡萄球菌毒力和耐药基因分布与耐药相关性分析

目的 明确临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)中毒力和耐药基因的分布及其与临床常用抗菌药物耐药性的关系。方法收集2016年1月至2022年2月非重复分离自分泌物、血液临床标本中的158株SA,采用Vitek2 Compact或Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏分析。PCR筛查SA毒力基因(hla、nuc、coa、pvl、sea、seb、eta、etb、tst)和耐药基因(mecA、mecC、aac(A)-aph(D)、aph(3’)-IIIa),并分析其与临床常用抗菌药物耐药性之间的关系。结果 临床科室中检出SA较多的是普通骨科(67/158,42.4%)和普通外科(29/158,18.4%)。158株SA均携带hla和nuc。59株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中毒力基因seb检出率高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA),而MSSA中毒力基因coa检出率高于MRSA(P<0.05)。coa+菌株对苯唑青霉素的耐药率低于coa-菌株,环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲恶唑的耐药率高于coa-菌株;pvl+菌株对红霉素、克林霉素的耐药率高于pvl-的菌株;sea+菌株对环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率高于sea-菌株;seb+菌株对苯唑青霉素的耐药率高于seb-的菌株(P<0.05)。aph(3’)-IIIa+菌株对苯唑青霉素、红霉素、克林霉素、四环素的耐药率高于aph(3’)-IIIa-菌株;aac(A)-aph(D)+菌株对环丙沙星、红霉素、利福平、庆大霉素、左氧氟沙星、克林霉素、四环素、复方磺胺甲恶唑的耐药率高于aac(A)-aph(D)-菌株(P<0.05)。结论 临床分离金黄色葡萄球菌中MRSA检出率较高,毒力基因及氨基糖苷类耐药基因携带与细菌的耐药性相关,临床应合理用药并加强监测,以减缓和控制耐药金黄色葡萄球菌尤其是MRSA的播散。

小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因表达的影响综述

本文综述小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因表达的影响及其抗菌活性等。小檗碱俗称黄连素,是从中药黄连中分离的一种季铵生物碱,是黄连抗菌的主要有效成分。研究表明,小檗碱具有丰富的抗菌活性,可对多药耐药(MDR)菌、真菌、非MDR菌等起到抗耐药作用;通过与抗生素联用或单独应用降低MRSA生物被膜、外排泵等耐药机制关键基因的表达以降低耐药性。同时本文还对小檗碱治疗MRSA耐药性的研究进行展望,期望为其他学者提供思考依据,使小檗碱早日成为新型治疗MRSA感染的药物。

金黄色葡萄球菌耐药机制及治疗药物

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起局部化脓和心内膜炎等多种感染的重要人兽共患革兰阳性病原菌。其传播速度快,致病力强,且耐药性日益严重,给全球公共卫生安全和动物养殖业造成了巨大威胁。这对深入了解金黄色葡萄球菌耐药机制以及药物新靶点的开发提出了迫切需求。因此,本文对当前临床使用的抗生素的作用机制和耐药机理进行了综述,并特别关注了相关领域的最新研究进展,以期望为临床防治细菌耐药和新药研制提供新的视角和参考。

儿童皮肤感染金黄色葡萄球菌临床分布、耐药性及皮损特点分析

目的:探讨儿童皮肤软组织感染分离获得的金黄色葡萄球菌的临床分布特征、耐药性和皮损特点。方法:回顾性分析杭州市儿童医院皮肤软组织感染患儿创面分离的299株金黄色葡萄球菌,通过苯唑西林(MIC≥4 mg/L)筛选出耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)或甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA),对临床分布、耐药性及皮损特点进行归纳。结果:共分离出299株金黄色葡萄球菌,其中脓疱疮121株(40.5%)、皮肤疖痈53株(17.7%)、特应性皮炎26株(8.7%)、湿疹皮炎24株(8.0%),其他均在5%以下。确定为MRSA共76株(25.4%),其中脓疱疮占36.8%;其次是特应性皮炎和皮肤疖痈分别占11.8%和23.7%。在26例特应性皮炎伴皮肤感染患儿中,MRSA和MSSA之间的皮损形态规则和皮损形态不规则比例,差异有统计学意义(P<0.05)。在299株金黄色葡萄球菌中,MRSA有76株,占25.4%;MRSA对青霉素G耐药率为100%,氯洁霉素耐药率74.5%,红霉素耐药率68.4%,复方新诺明耐药率31.6%,四环素耐药率18.4%,对其余抗菌药物耐药率在5%以下。对喹奴普汀/达福普汀、万古霉素、利福平、利奈唑烷、庆大霉素及替加环素全部敏感。结论:儿童皮肤软组织感染中金黄色葡萄球菌中MRSA检出率较高,最常见疾病为脓疱疮、皮肤疖痈和特应性皮炎,其中特应性皮炎中表现为形态规则、界限清楚的皮损更提示MRSA感染,应及早进行分泌物培养,根据结果早期积极治疗,防止导致系统感染。

奶牛源多重耐药金黄色葡萄球菌耐药机制研究

本研究分析一株奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus) Q1的耐药机制,为防控金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎提供数据基础。试验采用菌株分离鉴定、药敏试验及全基因组测序方法对其耐药机制进行预测。结果表明:Q1对大环内酯类药物(MA)、林可酰胺类药物(LA)、酰胺醇类药物(AMs)、四环素类药物(TCs)、磺胺类药物(SAs)均具有耐药性;对青霉素类药物(PCs)、氨基糖苷类药物(AGs)具有中介耐药性,且携带有ermB、ermC、msrA、mphC、lnuA、fexA、tetK、AAC(6')-IeAPH(2')-Ia、CarB-6 9种耐药基因。说明,分离所得奶牛源S.aureus Q1具有多重耐药性,推测其耐药机制为外排泵、抗生素靶点改变及抗生素失活机制共同作用,可为S.aureus引起的奶牛乳房炎提供防治依据。

扬州地区克林霉素耐药金黄色葡萄球菌遗传进化特征

目的揭示扬州地区2016—2020年克林霉素耐药金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药表型、耐药基因及分子特征。方法设立哨点医院,收集5年内临床分离经鉴定包括克林霉素固有耐药和诱导耐药的金黄色葡萄球菌,检测对临床常用抗生素的耐药情况。通过SNP分析及MLST分型的方法对菌株进行分子分型,同时检测mecA、erm等耐药基因的携带率。结果研究共收集到71株克林霉素耐药的金黄色葡萄球菌,其中42株(59.15%)为固有耐药,29株(40.85%)为诱导性耐药;其中44株(61.97%)为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。71株中发现了18个ST型,其中ST59菌株的mecA和ermB检出率均高于其他ST型;成簇菌株中,CC59均为固有耐药。结论扬州地区临床分离的金黄色葡萄球菌耐药情况严峻,克林霉素耐药的CC59克隆群携带有较多耐药基因,并且均为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。研究为临床选择合适的药物与开展克林霉素耐药株流行趋势研究提供可靠数据。

金黄色葡萄球菌对万古霉素的耐药性及耐药基因检测分析

目的探讨金黄色葡萄球菌(SA)对万古霉素的耐药性及耐药基因分布情况。方法收集平顶山市第一人民医院2020年4月至2022年3月临床送检样本分离的288株SA菌株,采用Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定和药敏系统以及纸片扩散法进行菌落鉴定与药敏试验;采用聚合酶链反应检测pbp4、mgrA、agr、vraS、vraR、icaA、icaR基因表达。结果288株SA菌株中筛选出25株万古霉素异质性耐药金黄色葡萄球菌(hVISA)菌株,hVISA阳性率为8.68%,未检测到万古霉素中介耐药金黄色葡萄球菌(VISA)菌株和万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)菌株;万古霉素敏感金黄色葡萄球菌(VSSA)菌株万古霉素最小抑菌浓度(MIC)主要分布在0.50 mg/L和0.75 mg/L,占比为41.83%和28.90%;hVISA菌株万古霉素MIC主要分布在1.50 mg/L和2.00 mg/L,占比为56.00%和28.00%;VSSA菌株pbp4、agr、icaR的相对表达量均低于hVISA菌株(P<0.05),而mgrA、vraS、vraR、icaA的相对表达量均高于hVISA菌株(P<0.05)。结论本次调查hVISA两年总流行率为8.68%。与VSSA菌株比较,hVISA菌株pbp4、agr、icaR、mgrA、vraS、vraR、icaA基因表达存在差异,可能与万古霉素的耐药性有关。

南充某三甲医院血培养分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床特征及危险因素分析

目的了解血培养分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的患者临床特征,探究血培养分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的危险因素。方法收集2017—2022年血培养分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的住院患者的临床病史资料和实验室数据,分析血培养分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的独立危险因素。结果2017—2022年血培养标本共分离金黄色葡萄球菌181株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌49株,总检出率27.07%,各年检出率变化无明显趋势。分离率科室构成比前三位为肾内科(20.41%)、骨科(10.20%)、儿科(10.20%)。患者以老年、男性为主,其感染部位以血流感染(83.67%)和肺部感染(48.98%)为主。49株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对青霉素(100%)、红霉素(87.76%)和克林霉素(73.47%)耐药率较高;132株对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌仅对青霉素(91.67%)耐药率较高。使用头孢菌素过往史和年龄为血培养分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的独立危险因素。结论血培养分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对多种临床常用抗菌药物耐药,使用头孢菌素过往史和年龄的因素在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染中起着重要作用,临床应注意相关危险因素,合理防治。

重症医学科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因型和同源性分析

目的:了解贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者金黄色葡萄球菌耐药变迁情况,掌握耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主要耐药基因和耐消毒剂基因,并对部分菌株作同源性分析。方法:回顾性分析贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者2018~2021年金黄色葡萄球菌耐药情况变迁情况,以相关性分析(pearson)统计学方法探讨细菌耐药性与抗菌药物用药频度(defined daily dose system,DDDs)二者的关系。以四年间重症医学科下呼吸道感染患者送检标本分离获得的40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为研究对象,采用仪器法对试验菌株作鉴定及药敏,通过PCR技术作耐药基因(mecA、SCCmec、femB)和耐消毒剂基因(qacA/B)检测。应用多位点序列分型(MLST)法分析40株试验菌的同源性。结果:金黄色葡萄球菌每年的平均耐药率显示青霉素耐药率一直高于92%以上。四环素、克林霉素、复方新诺明耐药率在2019年有所下降后却又再次持续升高。红霉素、苯唑西林、左氧氟沙星、奎奴普丁/达福普丁的耐药率呈现逐年增长趋势。未发现对利奈唑胺、万古霉素和替加环素的耐药菌株。相关性分析提示青霉素耐药率与苯唑西林DDDs存在明显正相关(r=0.99,P<0.05),苯唑西林耐药率与红霉素DDDs存在明显负相关等,其他抗菌药物耐药率与各药物DDDs相关性无统计学意义。基因检测发现40株耐MRSA中mecA检出率为97.5%,SCCmec和femB基因未检出,qacA/B基因检出率为15%。MLST分型结果显示共分为7个序列型,其中以ST59型占比最高,为优势型别,占比42.5%,其次为ST45型,占25%,ST239型、ST28型、ST188型、ST1型和ST630型分别占12.5%、7.5%和5%、5%、2.5%。结论:重症医学科下呼吸道感染金黄色葡萄球菌耐药率逐年增加,可选择的抗生素有限。细菌耐药性的产生与药物使用频率有一定关系,携带mecA和qacA/B基因是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产生耐药的主要原因。MLST结果表明ICU病房存在科内克隆菌株。

上海嘉定区某医院2018—2022年环境中金黄色葡萄球菌的分布及其耐药性

目的 了解上海市嘉定区某医院环境中金黄色葡萄球菌(SA)的污染状况及耐药性,探讨环境菌株中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出情况及耐药性特点。方法 采集该医院环境标本并分离鉴定SA,采用肉汤稀释法对分离的SA进行15种常见抗菌药物耐药性检测,并检测菌株mecA基因。结果 936份医院环境标本中,60份标本检出SA,检出率为6.41%,SA中MRSA的检出率为25.00%。综合重症监护病房(ICU)、呼吸内科SA的检出率分别为7.35%、5.94%,MRSA的检出率分别为3.51%、0.64%。医院环境中鼠标键盘SA的检出率最高(17.14%),其次是患者的病号服、枕头被褥和床头柜(均为16.67%)。环境标本中肥皂(盒)、洗手(消毒)瓶的MRSA检出率最高,分别为7.69%、6.25%。医院环境标本中的SA对达托霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、利福平、复方磺胺甲口恶唑、替考拉宁、万古霉素7种抗菌药物均敏感,MRSA对其余8种抗菌药物的耐药率均高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。结论 该医院综合ICU环境检出的SA中MRSA的占比高于呼吸内科,环境标本中高MRSA检出率和高SA检出率的标本不一致,MRSA的耐药率高于MSSA,需加强医院,特别是ICU中SA及MRSA的消毒与控制,避免SA耐药性升高。

氯氰碘柳胺对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其生物膜的抗菌活性

目的:金黄色葡萄球菌(以下简称“金葡菌”)的耐药性已成为感染性疾病治疗中的难题,研究针对多重耐药金葡菌及其生物膜的抗菌药物具有重要的临床价值。本研究将药物重新利用,探讨抗寄生虫药物氯氰碘柳胺对耐甲氧西林金葡菌及其生物膜的抗菌活性。方法:通过微量肉汤稀释实验和纸片扩散实验检测金葡菌对氯氰碘柳胺的敏感性。采用时间-抑菌/杀菌曲线结合平板稀释菌落计数检测氯氰碘柳胺的抑菌效率和杀菌活性;扫描电镜联合荧光探针SYTOX Green和DiSC3(5)研究氯氰碘柳胺对金葡菌的杀菌机制;亚抑菌浓度的氯氰碘柳胺连续作用检测其对金葡菌耐药的影响;96孔板结合结晶紫染色法检测氯氰碘柳胺的抗生物膜活性;CCK-8试剂盒检测氯氰碘柳胺的细胞毒性。结果:氯氰碘柳胺对甲氧西林敏感和耐药金葡菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)均为0.125~1.000μg/mL。纸片扩散实验发现80μg的氯氰碘柳胺即可出现抑菌圈,且随着药量增加抑菌圈直径明显增大。亚抑菌浓度(0.031μg/mL)的氯氰碘柳胺可显著抑制金葡菌的增殖,使细菌浊度从0.26±0.00减少到0.11±0.01(t=16.06,P<0.001),且随着氯氰碘柳胺浓度的升高,其抑菌活性越强。0.25×MIC的氯氰碘柳胺可抑制金葡菌增殖12 h,1×MIC的氯氰碘柳胺可抑制金葡菌增殖长达24 h以上,且活菌数量随着药物浓度升高而减少。机制研究结果表明氯氰碘柳胺可有效破坏金葡菌细胞膜的完整性,使SYTOX Green和DiSC3(5)的荧光强度明显升高。即使经过亚抑菌浓度氯氰碘柳胺的25 d连续作用,仍未产生耐药性。0.062 5μg/mL的氯氰碘柳胺即可显著抑制金葡菌生物膜的形成,使其形成量从1.29±0.16减少到0.62±0.04(t=11.62,P<0.001),且呈现明显的剂量依赖性。2μg/mL的氯氰碘柳胺还可显著清除已形成的生物膜,使生物膜量从1.62±0.34减少到0.51±0.39(t=4.84,P<0.01)。此外,氯氰碘柳胺的细胞毒性极低,其对肝癌细胞HepG2和正常肝脏细胞LO2的半数抑制浓度均大于64μg/mL。结论:氯氰碘柳胺对金葡菌及其生物膜具有强抗菌活性且对人体细胞毒性低,有望为金葡菌相关感染提供新的治疗策略。

社区与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及耐药性比较

目的比较社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的分子分型、毒力基因及耐药基因。方法选取2019年1月至2020年12月绍兴市人民医院收治的34例门诊及住院患者,共分离获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)34株,其中CA-MRSA 7株(占20.6%),HA-MRSA 27株(占79.4%)。采用头孢西丁纸片扩散法进行药敏试验,全基因组测序法进行分子分型[包括葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)分型、葡萄球菌A蛋白(spa)分型、多位点基因序列类型(MLST)分型]、毒力基因及耐药基因检测。结果CA-MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、利福平、磷霉素、四环素均敏感,对复方新诺明的敏感率为85.7%;HA-MRSA对庆大霉素、利福平、复方新诺明、四环素的敏感率均在80%以上。两种不同来源菌株对各种常用抗菌药物敏感率以及SCCmec、spa、MLST分型比例比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。CA-MRSA的lukF-PV、lukS-PV检出率均明显高于HA-MRSA菌株(均P<0.05),sea检出率明显低于CA-MRSA菌株(P<0.05)。HA-MRSA的环丙沙星耐药基因gyrA检出率明显高于CA-MRSA菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。CA-MRSA同时携带1~6种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱;HA-MRSA同时携带1~9种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素、阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-克林霉素-红霉素和庆大霉素-阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-四环素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱。结论本院CA-MRSA分离率较高,其携带毒力基因lukF-PV、lukS-PV的比例高于HA-MRSA。