单链抗体骨架1区在与抗原结合中的作用

[目的 ]探讨单链抗体可变区骨架 1区对抗体特异性的影响 .[方法 ]应用分子克隆技术 ,以分离自重症肌无力患者胸腺的抗原结合片段Fab 6 37为亲本 ,构建了完整序列的单链抗体ScFv 6 37以及在重链和轻链可变区骨架 1区N端各缺失 8个氨基酸的单链抗体ScFv6 37Δ8aa ,在大肠杆菌表达后 ,应用放射免疫测定法检查单链抗体与抗原 人乙酰胆碱受体的结合活性 .[结果 ]单链抗体ScFv 6 37Δ8aa不能与人乙酰胆碱受体结合 ,然而在同一试验中 ,单链抗体ScFv 6 37能高亲合性地与人乙酰胆碱受体结合 .[结论 ]单链抗体骨架 1区的结构可影响抗体与抗原表位的结合特异性 .

重组人CD11α单克隆抗体生物学活性测定方法的优化

用竞争性荧光免疫抑制细胞实验法对重组人CD11α单克隆抗体注射剂进行生物学活性测定,对LFA1转染的293细胞的培养、抗体包被时间及活性测定过程中样品的制备等条件进行了优化,建立了规范可行的操作方法。3批样品的生物学活性分别为:1.03×104U/mg蛋白,0.98×104U/mg蛋白及0.97×104U/mg蛋白,5次测定的RSD分别为4.554、5.039及1.443。

抗体偶联药物分析方法的概述及进展

单克隆抗体药物的靶点选择性非常高,但其药理活性普遍比较低。近年来抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC)的出现,正好弥补了单克隆抗体药物的缺点。ADC是一类通过化学偶联子将单克隆抗体和不同数目的小分子细胞毒素(效应分子)偶联起来的药物。这种新型的药物结合了单克隆抗体的高特异性和小分子毒素的高活性。ADC药物的分析工作非常困难和费时,主要归因于分析物的多样性及分析方法的复杂性。本文将对目前在ADC药物研究的不同方面如理化性质表征、药代动力学和药效学研究、以及免疫原性评价等所用的分析方法做出归纳和阐述,并讨论这些方法所面临的困难和挑战。

二步法预定位技术对荷人肝癌裸鼠模型的MR免疫成像研究

目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二步法预定位组8只,先静脉注射生物素化单克隆抗体600μg,24h后再给予钆喷替酸葡甲胺链霉亲和素(Gd DTPA streptavidin,Gd DTPA SA);HAb18单克隆抗体Gd DTPA组6只,经尾静脉注射Gd DTPA HAb18;Gd DTPA对照组6只,静脉注射Gd DTPA。对实验动物行MR扫描,测量SET1WI平扫及增强后10、30、60min及3、6、12、24、48h图像内肿瘤的信号强度,绘制信号强度时间曲线,并计算肿瘤强化率及对比度噪声比(contrast to noiseratio,CNR)。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。二步法预定位组内,肿瘤信号强度缓慢升高,增强后第6小时,肿瘤的强化率、CNR达到最大值,与其他两组相比较差异有统计学意义。48h后,肿瘤的强化仍肉眼可辨。单克隆抗体组内,肿瘤表现为缓慢轻度强化,增强后24h的强化率达13.5%,肿瘤信号强度、CNR与平扫比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Gd DTPA对照组内,肿瘤表现为快进快出特点的强化特点。结论二步法预定位技?