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胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析
被引量:
4
1
作者
曹茂林
张珏
+2 位作者
汤承
CUI Yaya
吴伯骥
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期161-165,共5页
从感染软腐病的胡萝b组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝b亚种( Erwinia carotovora subsp, carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P^32标记的hrpN基因作探针...
从感染软腐病的胡萝b组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝b亚种( Erwinia carotovora subsp, carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P^32标记的hrpN基因作探针,通过菌落原位杂交技术从该文库中筛选到1.5~2.0 kb的hrpN-like阳性克隆,进一步将该片段亚克隆到pBluescript—II SK(+)载体中,进行核苷酸序列测定.结果表明,hrpN-like基因(即hrpNCSSY002基因)的开放阅读框(ORF)为1071bp,其核苷酸序列已在Genbank注册,登录号为bankit AY999002.hrpN-like基因的编码产物Harpin—like蛋白(即HarpinCSSY002蛋白)由356个氨基酸残基组成,分子量为36.64×10^3,等电点pI5.9.将hrpN—like基因构建到表达质粒pET-28a(+)的17强启动子下,并转化到大肠杆菌工程菌JM109(DE3)细胞中,经WTG(异丙基硫代-β-D半乳糖苷)诱导获得Harpin-like蛋白的高效表达,并通过接种烟草叶片的过敏反应检测Harpin—like蛋白的生物学活性.
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关键词
胡萝卜软腐欧文氏菌
过敏反应
克隆和亚克隆
hrpN基因
HARPIN蛋白
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职称材料
题名
胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析
被引量:
4
1
作者
曹茂林
张珏
汤承
CUI Yaya
吴伯骥
机构
中国科学院成都生物研究所
西南民族大学生命科学与技术学院
Department of Plant Pathology
出处
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期161-165,共5页
文摘
从感染软腐病的胡萝b组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝b亚种( Erwinia carotovora subsp, carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P^32标记的hrpN基因作探针,通过菌落原位杂交技术从该文库中筛选到1.5~2.0 kb的hrpN-like阳性克隆,进一步将该片段亚克隆到pBluescript—II SK(+)载体中,进行核苷酸序列测定.结果表明,hrpN-like基因(即hrpNCSSY002基因)的开放阅读框(ORF)为1071bp,其核苷酸序列已在Genbank注册,登录号为bankit AY999002.hrpN-like基因的编码产物Harpin—like蛋白(即HarpinCSSY002蛋白)由356个氨基酸残基组成,分子量为36.64×10^3,等电点pI5.9.将hrpN—like基因构建到表达质粒pET-28a(+)的17强启动子下,并转化到大肠杆菌工程菌JM109(DE3)细胞中,经WTG(异丙基硫代-β-D半乳糖苷)诱导获得Harpin-like蛋白的高效表达,并通过接种烟草叶片的过敏反应检测Harpin—like蛋白的生物学活性.
关键词
胡萝卜软腐欧文氏菌
过敏反应
克隆和亚克隆
hrpN基因
HARPIN蛋白
Keywords
Erwinia carotovora subsp, carotovora
hypersensitive response (HR)
clone and subclone
hrpN
harpin
分类号
S436.31 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析
曹茂林
张珏
汤承
CUI Yaya
吴伯骥
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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