肺癌放射抗性细胞系构建及生物行为研究

目的：构建肺癌放射抗性细胞系，观察细胞在形态、凋亡、侵袭迁移能力和上皮间质转化的改变。方法采用小剂量等分割照射法、亚致死剂量照射法及梯度递增照射法筛选肺癌A549和H1299放射抗性细胞系，显微镜下观察细胞形态学改变，克隆形成实验检测放射敏感性，CCK？8法检测细胞受照后存活率；流式细胞仪检测凋亡率；Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力的变化；蛋白印迹法检测上皮间质转化标志蛋白表达。结果梯度递增照射法构建肺癌放射抗性细胞系可行性好，得到放射抗性细胞A549R和H1299R，形态学观察示放射抗性细胞向间质细胞形态转变。分别以A549和H1299细胞为对照，A549R和H1299R细胞D0、Dq、SF2增加（P＝0．017和0．033、0．001和0．000、0．000和0．008），α和α／β值减少（ P＝0．018和0．001、0．007和0．009）。 A549R和H1299R细胞在不同照射剂量下存活率均大于对照组（P值均＜0．05），受照后凋亡率降低（P＝0．02和0．01），侵袭率及迁徙率增高（ P＝0．000和0．001及0．001和0．002），E？钙黏蛋白表达下调和波形蛋白表达增高（ P＝0．00和0．01及P＝0．02和0．01）。结论成功构建肺癌放射抗性细胞系，其侵袭迁移能力增强，并且可能与上皮间质转化有关系。