凝集素在研究复发性肝癌细胞克隆来源中的可能价值

用ABC法对16例二次切除的肝细胞癌(HCC)组织中凝集素受体进行了测定,并观察了裸鼠体内传代2年多的人HCC组织中凝集素受体的变化,同时对这些肝癌病人的肿瘤部位、复发时间、肿瘤的某些生物学特性进行了统计学分析。结果表明:裸鼠体内传代的人HCC组织中凝集素受体变化很小。一些二次切除的HCC之间凝集素受体差别较少,而另一些则差别较多。这种二次切除的肝癌组织间凝集素受体的差别与肿瘤的部位、复发时间和某些生物学特性有明显的关系。提示:与原发肝癌相比,凝集素受体差别较多的复发性肝癌可能来自于不同的肿瘤细胞克隆;凝集素在探讨复发性肝癌细胞克隆来源中有潜在的应用价值。

复发性肝细胞癌的细胞克隆来源及其与复发时间的关系

目的了解复发性肝细胞癌的细胞克隆来源及其与复发时间的关系。方法采用ＰＣＲ方法测定ｐ５３基因突变，并结合Ｐ５３蛋白及病理类型作为判断细胞克隆来源的指标。结果单中心性复发癌和多中心性复发癌的平均复发时间分别为（６５±３．２５）个月和（３３．８±１７．８）个月（Ｐ＜０．０１）。术后２年内多为单中心性复发，而术后２年后均为多中心性复发（Ｐ＜０．０１）。结论多中心性复发癌的复发时间明显长于单中心胜复发癌；对多中心性复发，应采用积极的方法达到再次根治性的治疗。

淋巴瘤样丘疹病皮损中表皮及真皮内不同表型肿瘤细胞克隆来源相关性的探讨

目的通过对8例淋巴瘤样丘疹病(LyP)A型和C型患者表皮内的MF样细胞和真皮内的R-S样细胞DNA水平的对比性研究,探讨二者克隆来源的相关性。方法对8例LyP(A型4例、C型4例)的病理组织行免疫表型检测、应用激光捕获显微切割技术(LCM)结合PCR技术对表皮内的MF样细胞和真皮内的R-S样细胞进行T细胞受体(TCR)γ基因重排的对比研究。随机选取1例检测为阳性的PCR产物送测序,进行序列比对。结果8例中有6例(75%)检测到TCRγ基因克隆性重排。LyP A型及C型检出率分别为50%(2/4)、100%(4/4)。LyP表皮内MF样细胞及真皮内R-S样细胞TCRγ基因重排检出率分别为75%(6/8)、75%(6/8)。随机选取的1例MF样细胞和R-S样细胞均有阳性条带的产物的同源性比对分析显示二者同源性达106/108(98%)。结论LyP表皮内MF样细胞和真皮内R-S样细胞很可能来自同一克隆。

全克隆在肿瘤干细胞研究中的应用和局限性

全克隆指细胞在体外通过克隆培养法形成的一种紧密规则的克隆。具体方法是使单细胞悬液重新繁衍成新的细胞群体，其中紧密、规则、具备连续传代能力的是全克隆。研究已证实全克隆来源于干细胞．而近年来的肿瘤干细胞（TSC）研究发现肿瘤组织中存在小部分细胞在克隆培养中形成全克隆，其具有自我增殖、分化的能力，并具有很强的成瘤性．

Transwell 3-D联合共培养促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化的研究

目的 探讨Transwell 3-D联合共培养促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化的可能性.方法 利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原进行鉴定.利用Transwell小室联合共培养肝细胞诱导其向肝样细胞分化,观察诱导后细胞形态的变化,利用细胞免疫荧光检测甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）和细胞角蛋白-18（CK-18）在诱导后细胞中的表达,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝细胞相关基因的表达.结果 利用克隆杯分离出的人羊水克隆样细胞来源干细胞CD44和CD90表达阳性,CD10、CD14、CD34、CD45和人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR）表达阴性.诱导2～4周后,肝样细胞出现,检测证实这些细胞表达AFP、ALB、CK-18、GATA结合蛋白-4（GATA4）、肝细胞核因子（HNF）-1α和细胞色素20A（CYP20A）等肝细胞相关标志和基因.结论 Transwell 3-D联合共培养可以促使人羊水克隆样细胞来源干细胞向肝样细胞分化.

人羊水克隆样细胞来源干细胞用于侧脑室损伤动物模型细胞治疗的研究

目的 探讨人羊水克隆样细胞来源干细胞用于侧脑室损伤大鼠模型细胞治疗的可能性.方法 羊水标本来自怀孕16~22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得.利用克隆杯,从人孕中期羊水标本中分离获得人羊水克隆样细胞来源干细胞,培养扩增.制作脑室损伤大鼠模型,设立正常对照组、实验对照组、实验组、空白对照组.第3代人羊水克隆样细胞来源干细胞注入脑室损伤模型大鼠脑室内,选取合适的时间点对模型鼠的生长发育指标（体重、脑重、张耳时间、长毛时间）、感觉运动功能（足测试、姿势反射、肢体位置）进行观察测试.并运用SNK法对各组结果均数进行两两比较,判断有无差异.利用Western blot技术检测模型鼠脑组织内人相关Nestin 的表达.结果 各组模型鼠体重、脑重无明显差异,实验组、实验对照组和空白对照组鼠崽之间长毛时间无明显差异,但此3组跟正常对照组差异有统计学意义.实验对照组和空白对照组运动功能测试各项指标与正常对照组和实验组差异均有统计学意义,实验组各项指标与正常对照组接近.Western blot检测表明,hAFCSCs移植5d后,就可以检测出人相关蛋白的表达.结论 人羊水克隆样细胞来源干细胞移植入侧脑室损伤模型鼠体内可以改善模型鼠的生长发育和感觉运动功能.