克鲁氏假丝酵母在高渗环境中海藻糖和胞内甘油积累的研究

The trehalose and intracellular glycerol contents of osmotolerant yeast \%Candida krusei\% cells rapidly increased in response to the medium containing NaCl.Addition of NaCl at early exponential phase or steady phase increased trehalose content only,but the content of extracellular glycerol increased gradually.Development of resistance was accompanied by accumulation of trehalose and was apparently unrelated to intracellular glycerol content which was always low under these conditions.There seems to be an overlap function between trehalose and glycerol in \%Candida krusei\% cells in response to the osmotic conditions.

温度调节对克鲁氏假丝酵母海藻糖代谢的影响

研究了恒温条件和热冲击条件对克鲁氏假丝酵母海藻糖代谢的影响。结果表明,将指数生长期的克鲁氏假丝酵母细胞置于恒定的45℃和25℃,均不利于细胞生长及海藻糖的合成,而适宜的热冲击能够迅速促进细胞海藻糖的合成。在正常的生长状态下,处于指数生长期的克鲁氏假丝酵母细胞内只积累少量的海藻糖,但此时当细胞受到外界热冲击时海藻糖会大量积累。在热冲击结束后,海藻糖的含量又会恢复至对照水平。周期性热冲击实验表明,随着指数生长期的延续,这种应激性反应逐渐减弱,在3个冲击周期结束时细胞内海藻糖的含量分别是对照的3·9,3及1·6倍。热冲击的温度和持续时间对细胞生长和海藻糖的积累都有影响,过高的温度及过长时间的热冲击均会使细胞生长受到抑制。最佳的热冲击温度为45℃,最佳热冲击持续时间为1h。

克鲁氏假丝酵母胞内甘油与海藻糖的分析及其积累研究

探讨了微波提取及HPLC测定分析克鲁氏假丝酵母胞内甘油及海藻糖的方法。结果表明最佳的破碎条件为400 W微波破碎3个循环、每个循环为每次微波破碎1 m in、间隔30 s。最佳提取条件为1 mL发酵液离心所得细胞用1 mL蒸馏水提取1 h。HPLC能够快速简洁地同时分析胞内甘油和海藻糖。对克鲁氏假丝酵母胞内甘油与海藻糖积累规律研究发现,在细胞指数生长期3~24 h内海藻糖的含量都处于较低的水平,在指数生长末期及减速期24~30 h海藻糖开始在细胞内大量积累,进入稳定期后海藻糖积累速度减慢,随后海藻糖含量渐呈下降趋势。胞内甘油在整个细胞生长过程中均处于较低水平,在72 h后逐渐下降。这为耐高渗酵母的抗逆研究提供了有益的参考。