单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定酱油中伏马毒素B_1、B_2

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定酱油中伏马毒素B1、B2 的方法。样品经离心和玻璃纤维滤纸过滤后 ,通过FumoniTest免疫亲和柱净化 ,净化液经柱前衍生 ,SpherisorbC18色谱柱分离 ,荧光检测器检测 ,外标法定量。对添加不同含量水平的伏马毒素B1、B2 ,5次重复实验的平均回收率为B184 .6 % - 89.2 % ,B2 6 0 .3% - 6 9.5%。变异系数 (CV)为B15.5%～ 7.8% ,B2 6 .2 %～ 9.3%。检测低限为B10 .0 1mg/kg ,B2 0 .0

黄曲霉毒素 B_1免疫亲和柱的制备研究

作者将自制的抗黄曲霉毒素 B_1(AFB_1)抗体偶联到被溴化氰活化的琼脂糖珠4B 上,制成分离、纯化、富集小分子毒物 AFB_1的免疫亲和柱。该柱能定量地将10％甲醇-2％二甲基甲酰胺溶液中的 AFB_1截留,而50％的甲醇又能定量地将截留在柱上的 AFB_1洗脱,所得的洗脱液可直接用于荧光测定。当AFB_1(?)36ng 时,荧光强度与 AFB_1的量之间呈线性关系。重复进行3次截留和洗脱,对亲和柱的活性无明显影响,说明该亲和柱至少可重复使用3次。

合成三肽囊素阳性噬菌体模拟七肽的免疫活性初步研究

为探讨三肽囊素(Bursin)模拟七肽的免疫活性及其与Brusin的相关性,本研究根据Bursin阳性噬菌体展示七肽库中筛选得到的氨基酸序列(MTTNLQQ)人工合成该七肽。以ELISA和竞争ELISA检验合成七肽与Bursin在体外的免疫学反应的相关性;比较不同剂量的合成七肽(设定Bursin作为对照)对鸡新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗(La Sota株)在鸡体诱导的特异性免疫应答的影响。结果显示合成七肽与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)能够特异性结合并且该结合作用可被Bursin阻断;动物试验的结果表明,低剂量(0.09mg)的合成七肽对疫苗诱导的体液免疫应答的增强作用与Bursin相当,而且高剂量(0.3mg)的合成七肽对细胞免疫应答具有一定的增强作用。因此,认为七肽序列MTTNLQQ具有与Bursin类似的免疫活性。