干式免疫荧光定量分析法检测降钙素原与血培养结果的关系研究

目的分析与讨论干式免疫荧光定量分析法检测血培养、降钙素原(PCT)的关系和价值。方法筛选2021年1月至2023年2月64例血流感染(BSI)患者为研究对象,均检验PCT水平及血培养,对血培养阴性和阳性结果患者PCT水平对比,同时分析阳性患者病原菌分布情况,对比不同病原菌感染患者PCT指标间的差异。结果64例患者经血培养检验,12例患者结果呈阳性,占18.75%,52例阴性,占81.25%;血培养结果为阳性患者PCT水平高于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05),12例血培养阳性患者中,发现病原菌以革兰阴性菌占比最高,为50.00%(6/12),其次是革兰氏阳性菌33.33%(4/12)与真菌16.67%(2/12);不同病原菌患者PCT水平经对比差异有统计学意义(P<0.05),且革兰氏阴性菌患者PCT水平高于革兰氏阳性菌与真菌的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCT对诊断血流具有重要意义,并且快速简单,并不能准确确定病原体,可联合使用PCT与血培养,血培养弥补了PCT中的不足,从而可作为诊断血流感染最有价值检测方法。

免疫亲和柱-荧光分析法测定鲜乳和乳粉中的黄曲霉毒素M_1

采用免疫亲和柱 -荧光光度法快速测定了鲜牛乳及乳粉中黄曲霉毒素M1。试样经过离心、脱脂、过滤后 ,滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的免疫亲和柱净化 ,此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力 ,黄曲霉毒素M1键合在分离柱中的抗体上。用甲醇 /水 (10 :90 )将免疫亲和柱上杂质除去 ,以甲醇 /水 (80 :2 0 )通过分离柱洗脱 ,加入溴溶液衍生 ,以提高测定灵敏度。衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1,检测低限为 0 .0 1μg/kg ,在 0 .1- 1.0 μg/kg范围内 ,回收率为 89.6 % - 96 .1% ,变异系数为 0 .5 2 % - 5 .8% ,分析一个样品的时间小于 30min .,分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质。用FAPAS的参考标样证实了检测方法、分析仪器和操作人员得到的结果是准确可靠的。本方法具有准确、简单、快速、安全等优点 ,可以满足少量和批量样品的检测需要。

氟喹诺酮类药物免疫分析方法的研究进展

氟喹诺酮类药物具有广谱高效的优点,现已广泛用于预防和治疗动物的各种感染性疾病。然而,氟喹诺酮类药物长期大量的滥用,在食品中的残留超标,导致体内耐药病原菌的产生,引起人类的耐药性问题。因此,建立快速灵敏的氟喹诺酮类药物检测方法具有重要意义。免疫分析法具有高灵敏和低成本的优势,故受到食品安全领域的广泛关注。因此,该文对氟喹诺酮类药物的抗体制备、各种免疫分析方法(包括酶联免疫吸附法、免疫层析法、荧光免疫分析法和免疫传感器)的原理、特点和应用进行总结,并对氟喹诺酮类药物免疫分析方法的发展趋势进行了展望。

对比胶体金免疫层析法与荧光偏振法诊断布鲁氏菌病准确性的Meta分析

目的应用诊断性试验Meta分析,定量评价胶体金免疫层析法(GICA)与荧光偏振法(FPA)诊断布鲁氏菌病的准确性。方法通过检索中文数据库(CNKI、万方、CBM)、英文数据库(PubMed、Embase、Cochrane),分别收集GICA和FPA诊断布鲁氏菌病的相关文献,检索截至2021年12月。按照纳入标准及排除标准筛选文献、提取数据,采用RevMan5.3对入选文献进行质量评价,应用Stata12.0与SAS9.4拟合双变量随机效应模型评价GICA与FPA诊断布鲁氏菌病准确性的结果。结果纳入符合标准的文献29篇,共22914个样本。诊断布鲁氏菌感染的合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、DOR值和AUC,GICA法分别为95%(95%CI:90%~97%)、96%(95%CI:93%~98%)、25.20(95%CI:13.34~47.58)、0.06(95%CI:0.03~0.10)、418.30(95%CI:170.98~1027.03)和0.99(95%CI:0.97~0.99),FPA法分别为96%(95%CI:94%~97%)、99%(95%CI:96%~100%)、72.29(95%CI:24.03~217.51)、0.04(95%CI:0.03~0.06)、1821.75(95%CI:516.42~6426.52)和0.99(95%CI:0.97~0.99),且两种方法合并DOR值的差异有统计学意义(P<0.001)。Deek’s漏斗图检验显示两种方法均无明显发表偏倚。结论在布鲁氏菌病的实验室检测中,GICA与FPA均有良好的诊断价值,FPA的综合诊断效能更高。

免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能评价

目的评价免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能,为临床选用不同方法的检测试剂盒提供依据。方法选取2022年11月至2023年2月广西中医药大学第一附属医院110例患者的血清作为试验样本,以美国Critical Diagnostics公司的Presage ST2试剂为对照,验证巴迪泰(广西)生物科技有限公司的免疫荧光分析法ST2蛋白检测试剂。使用线性回归分析法分析两种方法的相关性,通过Kappa检验分析两种方法定性判断检测结果的一致性,采用Bland-Altman Plot分析两种方法定量检测结果的一致性。结果线性回归分析法拟合的一元线性回归方程为y=0.9878x+1.6977,相关系数r=0.9959;Kappa检验的Kappa系数=0.901;Bland-Altman Plot分析结果显示,Mean±1.96s范围内检测结果的占比为96.36%(106/110)。结论巴迪泰(广西)免疫荧光分析法的ST2试剂与酶联免疫吸附法的Presage ST2试剂检测ST2蛋白的相关性密切、一致性高,等效性良好,均可满足临床检验需求。

丙肝病毒抗体检测运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法的应用价值观察

研究分析时间分辨荧光分析法和酶联免疫法于丙肝病毒抗体检测中应用效果。方法 丙型肝炎行丙肝病毒抗体检测患者2022年1月至同年12月选取521例,运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法做丙肝病毒抗体检测,检测作用做比对分析。结果 时间分辨荧光分析法对于丙肝病毒抗体检出率与酶联免疫法丙肝病毒抗体检出率比对无差异(P>0.05),丙肝病毒抗体检出情况与金标准比对,时间分辨荧光分析法较酶联免疫法准确率、灵敏度较高,优于酶联免疫法(P<0.05)。结论 丙肝病毒抗体检测,时间分辨荧光分析法行检测,对于丙肝病毒抗体有较高,且检测精准度、灵敏度良好。

全自动免疫分析仪在检测SLE相关自身抗体中的应用价值

为了更好地指导临床对系统性红斑狼疮(SLE)的诊疗,本文分析研究使用全自动免疫分析仪检测两种主流方法学对抗核抗体(ANA)特定靶抗原/抗体的应用价值。随机从2022年7月~2023年7月该院收集的样本中选取272例作为研究对象,入组样本按要求分别采用磁条码免疫荧光发光法(DLCM)进行抗核抗体15项检测和化学发光法(CLIA)进行dsDNA检测,统计DLCM检测抗核抗体15项检的敏感性和特异性,CLIA检测SLE患者治疗前后抗dsDNA抗体浓度变化情况。通过研究结果发现全自动免疫分析仪一机两用,在ANA检测应用上具有检测结果快速精准,经济高效更具性价比,可在临床上广泛推广使用。

时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2

时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎血清标志物的分析方法性能验证

目的建立时间分辨荧光免疫检测法的方法学性能验证方案和试验方法。方法采用新波ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪和雅培AxSYM免疫发光分析仪测定乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)各项目,分析前者的检测精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间及抗干扰性能,分析两者检测结果间的相关性。结果 ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪检测HBV-M各项目的精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间均符合国际公认质量要求。血清中一定浓度的三酰甘油、总胆红素或血红蛋白对部分HBV-M项目产生不同程度的干扰。ANYTEST2000与AxSYM检测HBV-M各项目结果间差异无统计学意义(P>0.05),且具有良好的相关性。结论 ANYTEST2000分析仪测定HBV-M的主要分析性能验证结果与厂商规定的分析性能基本一致。本研究所建立的分析仪性能验证方案和方法有助于提高仪器的检测质量。

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

动物性食品中诺氟沙星残留的荧光免疫分析方法研究

利用杂交瘤技术制备了诺氟沙星的单克隆抗体,建立了以抗诺氯沙星单克隆抗体为基础的荧光免疫分析方法,工作曲线表明在10～500μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I=31.92 logC-5.0083,相关系数r=0.9965,对诺氟沙星最低检出限达6.09μg/L,抑制中浓度为52.88μg/L,且对其它结构类似喹诺酮类药物均有特异性识别。本法可应用于检测动物性食品中残留的微量诺氟沙星。

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用吴笑春，高月（广州军区武汉总医院４３００７０）时间分辨荧光免疫分析（Ｔｉｍｅ—ＲｅｓｏｌｖｅｄＦｌｕｏｉｍ－ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＴＲＦＩＡ）是７０年代末［１］发展起来的一种新型超微量免疫分析技术，它克...

血清透明质酸时间分辨荧光免疫分析法的反应条件优化及其临床应用

目的优化血清透明质酸（HA）时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）的反应条件,并探讨其临床应用价值。方法采用TRFIA检测血清中HA的含量,确定参与HA-TRFIA的各反应成分的浓度。结果最佳反应条件为包被浓度10 mg/L、HA结合蛋白（HABP）1∶500稀释、铕标记HA（Eu^3＋-BSA-HA）1∶200稀释。敏感性为5.17μg/L,批内变异系数（CV）为2.21%-3.78%,批间CV为3.73%-5.40%,平均回收率为100.4%。该法HA测定值与放射免疫测定值显著相关,且与临床结果一致。结论本研究建立的血清HA-TRFIA是一种灵敏准确的分析方法,适合临床应用。

人血清中庆大霉素浓度的荧光偏振免疫分析法

本文通过制备荧光素标记庆大霉素和抗庆大霉素兔血清，建立了人血清中庆大霉素的荧光偏振免疫分析技术。方法的灵敏度0．3mg/L,批内、批间误差CV均小于6％，平均回收率104％，合用其它抗生素不干扰测定结果，与微生物法及放射免疫法比较相关系数γ分别为0．9687和0．9544。荧光偏振免疫法的建立，为临床测定床大霉素浓度提供了一种快速、精确和灵敏的新方法。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本,利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例;采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前(0h)和溶血后0.5、2、18h的胰岛素浓度;通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);随着溶血时间的延长,胰岛素浓度呈明显下降趋势,0.5、2、18h检测结果与0h检测结果相比,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显,但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响;标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。

化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。

甲状腺过氧化物酶抗体间接时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用

目的建立甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体间接时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）。方法用TPO抗原包板,用铕（Eu^3＋）标记兔抗人IgG做标记物,建立检测人血清TPO抗体的间接TRFIA。结果TPO抗体-TRFIA的敏感性为1.0 IU/mL;线性范围达1 000 IU/mL;批内变异系数（CV）为3.1%-3.6%,批间CV为3.3%-3.6%;平均回收率为98.89%;与电化学发光分析法（ECLIA）比对,相关系数达0.983 2;与临床诊断高度相关。结论本研究建立的TPO抗体-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测方法,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

环境激素类物质2，4-二氯苯酚荧光免疫分析方法的建立

以2，4-二氯苯酚（DCP）与牛血清白蛋白的偶联物DCP—BSA为人工抗原，免疫新西兰大白兔，获得特异性的抗体。建立并优化了荧光免疫检测方法，工作曲线表明DCP在1～100μg／L范围内呈良好的线性关系，回归方程为：IF=21．301gρ＋29．13，相关系数r=0，9915，DCP检出限为0.41μg／L，抑制中质量浓度为9．18μg／L，且对其它结构类似酚类化合物均有特异性识别。本法可应用于检测环境中微量的2，4-二氯苯酚。

荧光偏振免疫分析法监测丙戊酸血药浓度的结果分析

丙戊酸钠（sodium valproate，VPA）是治疗癫痫的一线药物，具有疗效高，安全性好，对患者认知功能影响少等药效特点。但是，VPA的药动学和药效学个体差异很大，剂量难以掌握，给药剂量和血药浓度相关性不稳定，而毒性反应与血药浓度相关^[1]。

荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定人血浆茶碱浓度

目的比较荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定茶碱血药浓度的结果,以指导临床合理用药。方法用荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法平行测定18例老年慢性阻塞性肺疾病患者的茶碱血药浓度。结果两种方法之间有良好的线性关系,比较线性回归方程为Y=0.830 5X+0.875 7,相关系数r=0.991 3;144例次茶碱血药浓度测定结果表明,荧光偏振免疫分析法比化学发光酶免疫法测得值低,平均低(1.81±0.62)mg.L-1(P<0.05),18例患者茶碱药时数据经计算机拟合,均呈单室开放模型,两法所得药动学参数均差异无显著性。结论两法均准确、灵敏、稳定,且均具特异性,但从经济学角度考虑,化学发光酶免疫法更适用于茶碱的临床血药浓度监测。