免疫亲和柱-荧光分析法测定鲜乳和乳粉中的黄曲霉毒素M_1

采用免疫亲和柱 -荧光光度法快速测定了鲜牛乳及乳粉中黄曲霉毒素M1。试样经过离心、脱脂、过滤后 ,滤液经过键合有黄曲霉毒素M1特殊抗体的免疫亲和柱净化 ,此抗体对黄曲霉毒素M1具有专一的识别能力 ,黄曲霉毒素M1键合在分离柱中的抗体上。用甲醇 /水 (10 :90 )将免疫亲和柱上杂质除去 ,以甲醇 /水 (80 :2 0 )通过分离柱洗脱 ,加入溴溶液衍生 ,以提高测定灵敏度。衍生化后的洗脱液于荧光光度计中测定黄曲霉毒素M1,检测低限为 0 .0 1μg/kg ,在 0 .1- 1.0 μg/kg范围内 ,回收率为 89.6 % - 96 .1% ,变异系数为 0 .5 2 % - 5 .8% ,分析一个样品的时间小于 30min .,分析过程中不使用黄曲霉毒素M1标准物质。用FAPAS的参考标样证实了检测方法、分析仪器和操作人员得到的结果是准确可靠的。本方法具有准确、简单、快速、安全等优点 ,可以满足少量和批量样品的检测需要。

干式免疫荧光定量分析法检测降钙素原与血培养结果的关系研究

目的分析与讨论干式免疫荧光定量分析法检测血培养、降钙素原(PCT)的关系和价值。方法筛选2021年1月至2023年2月64例血流感染(BSI)患者为研究对象,均检验PCT水平及血培养,对血培养阴性和阳性结果患者PCT水平对比,同时分析阳性患者病原菌分布情况,对比不同病原菌感染患者PCT指标间的差异。结果64例患者经血培养检验,12例患者结果呈阳性,占18.75%,52例阴性,占81.25%;血培养结果为阳性患者PCT水平高于阴性者,差异有统计学意义(P<0.05),12例血培养阳性患者中,发现病原菌以革兰阴性菌占比最高,为50.00%(6/12),其次是革兰氏阳性菌33.33%(4/12)与真菌16.67%(2/12);不同病原菌患者PCT水平经对比差异有统计学意义(P<0.05),且革兰氏阴性菌患者PCT水平高于革兰氏阳性菌与真菌的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PCT对诊断血流具有重要意义,并且快速简单,并不能准确确定病原体,可联合使用PCT与血培养,血培养弥补了PCT中的不足,从而可作为诊断血流感染最有价值检测方法。

时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2

时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎血清标志物的分析方法性能验证

目的建立时间分辨荧光免疫检测法的方法学性能验证方案和试验方法。方法采用新波ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪和雅培AxSYM免疫发光分析仪测定乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)各项目,分析前者的检测精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间及抗干扰性能,分析两者检测结果间的相关性。结果 ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪检测HBV-M各项目的精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间均符合国际公认质量要求。血清中一定浓度的三酰甘油、总胆红素或血红蛋白对部分HBV-M项目产生不同程度的干扰。ANYTEST2000与AxSYM检测HBV-M各项目结果间差异无统计学意义(P>0.05),且具有良好的相关性。结论 ANYTEST2000分析仪测定HBV-M的主要分析性能验证结果与厂商规定的分析性能基本一致。本研究所建立的分析仪性能验证方案和方法有助于提高仪器的检测质量。

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

动物性食品中诺氟沙星残留的荧光免疫分析方法研究

利用杂交瘤技术制备了诺氟沙星的单克隆抗体,建立了以抗诺氯沙星单克隆抗体为基础的荧光免疫分析方法,工作曲线表明在10～500μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I=31.92 logC-5.0083,相关系数r=0.9965,对诺氟沙星最低检出限达6.09μg/L,抑制中浓度为52.88μg/L,且对其它结构类似喹诺酮类药物均有特异性识别。本法可应用于检测动物性食品中残留的微量诺氟沙星。

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用

时间分辨荧光免疫分析法在血液地高辛浓度分析中的应用吴笑春，高月（广州军区武汉总医院４３００７０）时间分辨荧光免疫分析（Ｔｉｍｅ—ＲｅｓｏｌｖｅｄＦｌｕｏｉｍ－ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＴＲＦＩＡ）是７０年代末［１］发展起来的一种新型超微量免疫分析技术，它克...

血清透明质酸时间分辨荧光免疫分析法的反应条件优化及其临床应用

目的优化血清透明质酸（HA）时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）的反应条件,并探讨其临床应用价值。方法采用TRFIA检测血清中HA的含量,确定参与HA-TRFIA的各反应成分的浓度。结果最佳反应条件为包被浓度10 mg/L、HA结合蛋白（HABP）1∶500稀释、铕标记HA（Eu^3＋-BSA-HA）1∶200稀释。敏感性为5.17μg/L,批内变异系数（CV）为2.21%-3.78%,批间CV为3.73%-5.40%,平均回收率为100.4%。该法HA测定值与放射免疫测定值显著相关,且与临床结果一致。结论本研究建立的血清HA-TRFIA是一种灵敏准确的分析方法,适合临床应用。

人血清中庆大霉素浓度的荧光偏振免疫分析法

本文通过制备荧光素标记庆大霉素和抗庆大霉素兔血清，建立了人血清中庆大霉素的荧光偏振免疫分析技术。方法的灵敏度0．3mg/L,批内、批间误差CV均小于6％，平均回收率104％，合用其它抗生素不干扰测定结果，与微生物法及放射免疫法比较相关系数γ分别为0．9687和0．9544。荧光偏振免疫法的建立，为临床测定床大霉素浓度提供了一种快速、精确和灵敏的新方法。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本,利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例;采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前(0h)和溶血后0.5、2、18h的胰岛素浓度;通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);随着溶血时间的延长,胰岛素浓度呈明显下降趋势,0.5、2、18h检测结果与0h检测结果相比,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显,但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响;标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。

化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。

甲状腺过氧化物酶抗体间接时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用

目的建立甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体间接时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）。方法用TPO抗原包板,用铕（Eu^3＋）标记兔抗人IgG做标记物,建立检测人血清TPO抗体的间接TRFIA。结果TPO抗体-TRFIA的敏感性为1.0 IU/mL;线性范围达1 000 IU/mL;批内变异系数（CV）为3.1%-3.6%,批间CV为3.3%-3.6%;平均回收率为98.89%;与电化学发光分析法（ECLIA）比对,相关系数达0.983 2;与临床诊断高度相关。结论本研究建立的TPO抗体-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测方法,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

环境激素类物质2，4-二氯苯酚荧光免疫分析方法的建立

以2，4-二氯苯酚（DCP）与牛血清白蛋白的偶联物DCP—BSA为人工抗原，免疫新西兰大白兔，获得特异性的抗体。建立并优化了荧光免疫检测方法，工作曲线表明DCP在1～100μg／L范围内呈良好的线性关系，回归方程为：IF=21．301gρ＋29．13，相关系数r=0，9915，DCP检出限为0.41μg／L，抑制中质量浓度为9．18μg／L，且对其它结构类似酚类化合物均有特异性识别。本法可应用于检测环境中微量的2，4-二氯苯酚。

荧光偏振免疫分析法监测丙戊酸血药浓度的结果分析

丙戊酸钠（sodium valproate，VPA）是治疗癫痫的一线药物，具有疗效高，安全性好，对患者认知功能影响少等药效特点。但是，VPA的药动学和药效学个体差异很大，剂量难以掌握，给药剂量和血药浓度相关性不稳定，而毒性反应与血药浓度相关^[1]。

荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定人血浆茶碱浓度

目的比较荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定茶碱血药浓度的结果,以指导临床合理用药。方法用荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法平行测定18例老年慢性阻塞性肺疾病患者的茶碱血药浓度。结果两种方法之间有良好的线性关系,比较线性回归方程为Y=0.830 5X+0.875 7,相关系数r=0.991 3;144例次茶碱血药浓度测定结果表明,荧光偏振免疫分析法比化学发光酶免疫法测得值低,平均低(1.81±0.62)mg.L-1(P<0.05),18例患者茶碱药时数据经计算机拟合,均呈单室开放模型,两法所得药动学参数均差异无显著性。结论两法均准确、灵敏、稳定,且均具特异性,但从经济学角度考虑,化学发光酶免疫法更适用于茶碱的临床血药浓度监测。

脂血标本对时间分辨荧光免疫分析法测定游离雌三醇水平的影响

目的探讨脂血标本对时间分辨荧光免疫分析法检测游离雌三醇水平的影响。方法收集男性呈正常和乳糜样外观的不同水平脂血标本,与不同水平的游离雌三醇定值血清混匀,制成混合血清,用时间分辨荧光分析法测定其游离雌三醇水平以评价不同乳糜样和正常外观脂血标本对游离雌三醇水平的影响。结果对于乳糜样外观标本,轻度脂血可使游离雌三醇水平增高,中度及高度脂血则使游离雌三醇水平降低,且对游离雌三醇水平的影响十分接近。外观正常的中度脂血对游离雌三醇水平无显著干扰。结论乳糜样外观脂血对时间分辨荧光分析法测定游离雌三醇存在不同的影响,进而影响唐氏筛查的准确度。

全自动时间分辨荧光免疫分析系统EASYCUTA分析方法性能验证

目的建立时间分辨荧光免疫的方法学性能验证方案和实验方法。方法参考CNAS-CL02:《医学实验室质量和能力认可准则》(ISO 15189:2012)对医学实验室检测系统性能评价的相关要求,结合实际工作需求,设计实验验证方案,并对全自动时间分辨荧光检测仪EASYCUTA测定乙肝五项,TP-Ab,HCV-Ab,HIV-Ab的精密度、正确度、线性分析测量范围、可检测极限、参考区间、分析灵敏度,抗干扰能力,交叉污染,方法学对比等进行验证和评价,并将检测结果与厂商(苏州新波公司)提供的性能指标进行比较。结果 EASYCUTA全自动时间分辨荧光检测系统检测HBV-M,TP,HCV,HIV项目的精密度、正确度、分析测量范围、可报告范围、参考区间、分析灵敏度、抗干扰能力、交叉污染,等均符合国际公认质量要求。方法学比对中,乙肝五项与Rochee601的阴阳性符合率>95%、K值评级为"优"。术前四项(HBsAg、TP、HCV、HIV)与Abbott i2000的阴阳性符合率>95%、K值评级为"优"。方法学对比合格。结论 EASYCUTA全自动时间分辨荧光检测仪测定乙肝五项,TP-Ab,HCV-Ab,HIV-Ab的主要分析性能验证结果与厂商说明书提供的分析性能一致,能够满足临床要求。本研究对规范医学实验室建设以及提供仪器检测质量具有重要的意义。

时间分辨荧光免疫分析仪的临床实验方法和评价方案

时间分辨荧光免疫分析技术是一种利用稀土离子及其螯合物作为示踪剂的灵敏度高、线性范围宽、应用范围广的非放射性标记免疫分析技术。研制了一种性能稳定的时间分辨荧光免疫分析仪,为了进一步将这一先进超微量物质检验技术推广于临床应用,根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制订的临床评价方案,选择放射免疫分析法、化学发光免疫分析法以及PerkinElmerLifeSciences公司的AutoDELFIA-1235全自动时间分辨荧光免疫分析仪作为比较方法,提出了三套检验时间分辨荧光免疫分析仪性能的临床实验方法和评价方案。并利用其中的一套方案进行了实验,结果表明这些方案可操作性强,结果可信,经济适用,可作为同类医疗检验仪器进行临床实验的参考。

HBeAg-时间分辨荧光免疫分析法的初步临床应用

本文探讨HBeAg时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)的临床应用价值。采用铕离子标记,建立双抗体夹心的HBeAgTRFIA,并对224例乙肝患者和30名正常人血清进行检测。结果表明,HBeAgTRFIA法的灵敏度为0.006NCU/mL,乙肝患者血清HBeAg检出率为41.1%,显著高于ELISA法(P<0.05),与MEIA法相比较无显著差异(P>0.05)。HBeAgTRFIA法是一种灵敏度高、特异性强和重复性好的检测技术,对提高临床检测水平、指导临床治疗、监测方面有实用价值。

抗弓形虫IgM抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步应用

目的采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）建立高灵敏的抗弓形虫（TOX）IgM抗体的检测方法。方法采用二抗间接法建立抗TOX IgM抗体的TRFIA。结果方法的批内和批间变异系数（CV）分别为1.9%和3.8%,敏感性为0.4 U/mL,可测范围为0.4-200 U/mL,20%、50%和80%的有效剂量（ED20、ED50和ED80）分别为36.3、88.2和147.8 U/mL。检测健康体检人员的血清,标本的测定值为（5.3±2.3）U/mL,建议阳性阈值为10 U/mL。结论抗TOX IgM抗体的TRFIA敏感性高、稳定性好,在优生优育及器官移植上具有很好的应用前景。