免疫亲和柱-高效液相色谱法测定炒僵蚕中黄曲霉毒素

目的:采用免疫亲和柱-高效液相色谱法,对炒僵蚕饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的残留量进行分析,旨在为炒僵蚕饮片质量标准的完善及其市场监管提供依据。方法:样品经过高速匀浆处理,经免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定。采用YMC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(32∶18∶50)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,荧光检测器激发波长为360 nm,发射波长为450 nm,对7批炒僵蚕进行分析。结果:本研究采用的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)检测方法的线性关系、精密度、回收率良好,黄曲霉霉毒素G_(2)在多批样品检出,检出率为86%,有1批样品中黄曲霉霉毒素G_(1)含量较高,参照《中华人民共和国药典》(2020年版)黄曲霉毒素的限量标准,其黄曲霉毒素B_(2)、G_(1)和G_(2)总量超出限度规定。结论:本研究为首次采用免疫亲和柱-高效液相色谱法对炒僵蚕中黄曲霉素进行筛查,明确其存在安全风险,为炒僵蚕饮片中黄曲霉素的质控提供参考。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B_1、B_2

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1、B2 的方法。玉米样品经甲醇 -水(4∶1)提取 ,提取液通过FumoniTest免疫亲和柱净化 ,净化液经柱前衍生、SpherisorbC18色谱柱分离、荧光检测器检测、外标法定量。对添加不同含量的伏马毒素B1、B2 进行 5次重复实验 ,得B1的平均回收率为 82 .3%～88.7% ,B2 为 74.9%～ 81.6 %。B1的变异系数 (CV)为 4.9%～ 6 .3% ,B2 为 5 .8%～ 7.2 %。检测低限B1为0 .0 2 0mg/kg,B2 为 0 .0 40mg/kg。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中的玉米赤霉烯酮

研究了单克隆免疫亲和柱 高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法。样品通过乙腈 水 (体积比9∶1)提取 ,提取液用免疫亲和柱净化 ,WatersC18色谱柱分离 ,荧光检测器检测 ,外标法定量。对添加不同含量的玉米赤霉烯酮进行 6次重复实验 ,平均回收率为 87.8%～ 90 .9% ,变异系数 (CV)为 8.6 %～ 11.3% ,检测低限为0 .0 1mg/kg。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物

建立免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的方法。样品经免疫亲和柱净化与富集后,用高效液相色谱-紫外检测器检测。采用Cloversil-C18反相柱分离,流动相为乙腈-甲醇-水溶液,检测波长为265 nm。结果表明,牛奶中添加氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物的回收率在74%~101%,且相对标准偏差均小于7%。氯霉素的检出限为0.02 μg/L,玉米赤霉醇及其类似物的检出限分别为α-玉米赤霉醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉醇0.03 μg/L、α-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、玉米赤霉酮0.04 μg/L和玉米赤霉烯酮0.05 μg/L。该方法灵敏度高、重复性好,提高了检测速率,可满足牛奶样品中痕量氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物残留的测定。

免疫亲和柱-高效液相色谱法检测乳制品中氯霉素

建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法快速测定牛奶和奶粉中氯霉素残留物。样品用乙酸乙酯提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱-紫外法检测。结果表明,牛奶和奶粉添加氯霉素,回收率为79.6%~108.6%,变异系数小于10%;方法检测灵敏度0.1μg/L。该方法能够特异性的纯化牛奶和奶粉样品中的氯霉素,免疫亲和柱（IAC）净化是一种简单,快速,准确的方法。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定小麦中致呕毒素

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定小麦中致呕毒素的方法。样品通过水提取 ,提取液用免疫亲和柱净化 ,SpherisorbC18色谱柱分离 ,紫外检测器检测 ,外标法定量。对添加不同含量水平的致呕毒素 ,5次重复实验的平均回收率为 6 9.6 %～ 81.8%。变异系数 (CV)为 5 .7%～ 8.3%。检测低限为0 .0

免疫亲和柱-高效液相色谱荧光检测法测定饲料中的T-2毒素

建立了免疫亲和柱净化-柱前衍生化-高效液相色谱荧光检测器测定饲饲料中T-2毒素含量的方法。样品经甲醇-水(体积比80:20)提取,通过免疫亲和柱(IAC)净化,以1-蒽腈(1-anthroylnitrilc,1-AN)为衍生化试剂、4-二甲基氨基吡啶(DMAP)为催化利进行衍生,C1 8色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:T-2毒素的线性范围为10～200μg/L,加标回收率为76.9%～92.1%,相对标准偏差(RSD)小于6%。该方法可用于饲料中T-2毒素的测定。

免疫亲和柱-高效液相色谱紫外法检测牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1

建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱一紫外法检测牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M。的分析方法。该方法样品经离心处理、免疫亲和柱净化，即可应用液相色谱一紫外法检测。结果表明，不同加标水平下牛奶和奶粉添加黄曲霉毒素M，回收率分别为87．4％-108％、89．5%-103％，RSD分别为2．61％-7．83％和2．07％4．15％。方法检测灵敏度为0．1ng／mL牛奶、2．0ng／g奶粉。该方法能够特异性的检测样品中的黄曲霉毒素M，，不需荧光检测器就能达到较高的灵敏度，前处理简便，实用性强。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定啤酒中伏马毒素B_1、B_2

研究了单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定啤酒中伏马毒素B1 、B2的方法。啤酒样品经脱气后，通过FumoniTest免疫亲和柱净化,净化液经柱前衍生，Spherisorb C18色谱柱分离,荧光检测器检测，外标法定量。对添加不同含量水平的伏马毒素B1 、B2，5次重复实验的平均回收率为B1 86.1%～93.4%，B2 71.6%～82.0%。变异系数(CV)为B1 4.8%～7.2%，B2 6.3%～8.9% 。检测低限为B1 0.005mg/kg ,B2 0.01mg/kg。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定酱油中伏马毒素B_1、B_2

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定酱油中伏马毒素B1、B2 的方法。样品经离心和玻璃纤维滤纸过滤后 ,通过FumoniTest免疫亲和柱净化 ,净化液经柱前衍生 ,SpherisorbC18色谱柱分离 ,荧光检测器检测 ,外标法定量。对添加不同含量水平的伏马毒素B1、B2 ,5次重复实验的平均回收率为B184 .6 % - 89.2 % ,B2 6 0 .3% - 6 9.5%。变异系数 (CV)为B15.5%～ 7.8% ,B2 6 .2 %～ 9.3%。检测低限为B10 .0 1mg/kg ,B2 0 .0

辣椒粉中苏丹红Ⅰ的免疫亲和柱-高效液相色谱法检测

目的建立用免疫亲和柱分离净化、高效液相色谱法测定食品中苏丹红I的方法。方法将制备好的苏丹红Ⅰ单克隆抗体与经修饰的琼脂糖凝胶Sepharose-4FF偶联,制成苏丹红Ⅰ免疫亲和柱,样品经乙腈提取,并用PBS缓冲液稀释成20%乙腈-PBS溶液后,过实验室自制的苏丹红Ⅰ免疫亲和柱净化,建立IAC-HPLC法检测苏丹红Ⅰ含量。结果测得辣椒粉中SudanI的回收率为29.12%～90.32%,并随机抽检了市售的及自种的四种辣椒粉,检测结果均为阴性。结论成功制备了苏丹红Ⅰ免疫亲和柱,并建立了免疫亲和柱-HPLC法测定辣椒粉中的苏丹红I的方法。

酶联免疫吸附结合免疫亲和柱-高效液相色谱法检测大米中黄曲霉毒素B_1的研究

对大米中两种检测黄曲霉毒素B1方法的结合使用进行了研究,即采用酶联免疫吸附法对大米中黄曲霉毒素B1进行初筛,对可疑样品采用免疫亲和柱-高效液相色谱法进行验证。样品经甲醇水提取、免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、碘柱后衍生、荧光检测器测定。结果表明,黄曲霉毒素B1线性关系良好,相关系数为0.9999,检出限为0.50μg/kg,回收率为89.4%~95.2%,RSD值为1.88%~3.05%。两种方法的结合应用,适用于较大批量样品的检测。

免疫亲和柱-高效液相色谱在白酒赭曲霉毒素A检测中的应用

将免疫亲和柱-高效液相色谱-荧光检测器相结合,测定白酒中赭曲霉毒素A的含量。建立了测定白酒中赭曲霉毒素A的方法。该方法用2%NaHCO3和15%NaCl的水溶液对白酒中赭曲霉毒素A进行提取,然后通过OchraTest免疫亲和柱净化,采用Agilent-Cl8柱(4.6mm×300mm,5μm),流动相为乙腈-水-乙酸(体积比为50∶49∶1),流速0.80mL/min,激发波长335nm,发射波长465nm,柱温30℃,进样量20μL。结果表明,赭曲霉毒素A在1.0×10-9～10×10-9g/mL时,浓度与峰面积呈线性关系(r=0.9981),加标回收率为93.33%～97.40%,最低检出限为0.12×10-9g/mL,相对标准偏差分别为2.16%、3.13%和5.19%。

酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-高效液相色谱法在检测饲料中黄曲霉毒素B_(1)含量中的比对研究

为了探讨酶联免疫吸附法检测饲料中黄曲霉毒素B_(1)含量的可行性,试验采用酶联免疫吸附法(ELISA法)比对免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC法),对饲料中黄曲霉毒素B_(1)含量进行了检测,对检测结果的准确度、精密度和样品加标回收率进行了分析。ELISA法线性方程相关系数为0.9952,相对标准偏差(RSD)为1.6%~8.1%,平均加标回收率为105.6%~111.8%。结果表明,ELISA法的准确性、重现性、稳定性好;且ELISA法检测结果与IAC-HPLC法检测结果的相对标准偏差(RSD)为5.4%~19.2%,两种方法的检测结果的偏差可以接受,表明ELISA法能满足检测需求。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定葡萄干、烤杏仁、椰子粉、花生仁中黄曲霉毒素

本文建立了免疫亲和柱一高效液相色谱法测定葡萄干、烤杏仁、椰子粉、花生仁中黄曲霉毒素的方法，其标准品回归曲线相关性系数在0．9997—0．9999，回收率为77．6～124．2％，平行测定结果的相对标准偏差为0．94％，黄曲霉毒素总量的检出限为0．24μg／kg，最低定量限为0．8μg／kg，完全满足现行国家标准的检测要求1μg／kg。

免疫亲和柱-高效液相色谱法检测红曲米中的桔霉素

制备抗桔霉素(citrinin,CIT)单克隆抗体免疫亲和柱(IAC),建立了检测红曲米中CIT的免疫亲和柱-高效液相色谱检测方法。采用甲醇-水提取红曲米样品,将提取液用PBS稀释后过免疫亲和柱,甲醇洗脱后以高效液相色谱法检测,激发波长为331 nm,发射波长为500nm,流动相采用乙腈-磷酸溶液(体积比为45:55,pH2.0)。每根抗CIT单克隆抗体免疫亲和柱使用0.5 mL溴化氰活化的4FF琼脂糖凝胶,0.5mg桔霉素单克隆抗体,柱容量为0.35μg。红曲米样品添加CIT标品0.1～0.6 mg/kg,平均回收率为74.2%～87.14%,相对标准偏差为2.85%～13.12%。最低检出限为0.1mg/kg(S/N=3)。

单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定牛乳中黄曲霉毒素M_1

研究了单克隆免疫亲和柱 -高效液相色谱法测定牛乳中黄曲霉毒素M1的方法。样品通过离心脱脂 ,脱脂乳用免疫亲和柱净化 ,SpherisorMC18色谱柱分离 ,荧光检测器检测 ,外标法定量。对添加不同含量水平的黄曲霉毒素M15次重复实验的平均回收率为 80 .4 %～ 88.7%。变异系数(CV)为 7.7%～ 8.9%。检测低限为 0 .0 5μg/kg。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定谷物及其制品中玉米赤霉烯酮的含量

目的建立免疫亲和柱-高效液相色谱法分析检测谷物及其制品中玉米赤霉烯酮的方法。方法样品经乙腈-去离子水(84:16,V:V)提取,玉米赤霉烯酮免疫亲和柱富集净化,甲醇洗脱后,经C18反相色谱柱分离,以乙腈-水-甲醇(46:46:8,V:V:V)为流动相,使用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量。结果玉米赤霉烯酮在1~100μg/L线性范围内线性关系良好,相关系数0.9999,检出限0.8μg/kg,仪器重复测定的相对标准偏差0.19%,样品平行性测定相对标准偏差在0.10%~1.89%。检测成都市内综合农贸市场和超市内谷物及其制品中玉米赤霉烯酮的含量为1.34~43.1μg/kg,检出率为52.2%。结论该方法具有灵敏度高、重现性好、准确度高等特点,可应用于实际市场中谷物及其制品的痕量调查。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定食品中玉米赤霉烯酮的含量

本文建立了食品中玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-高效液相色谱法定量检测方法。结果表明,玉米赤霉烯酮在5.00~50.00 ng/mL线性关系良好,相关系数为0.999 91,样品回收率为83.9%~95.9%,相对标准偏差为0.2%~8.7%。该方法准确性度高,精密度好,可用于食品中玉米赤霉烯酮含量的检测。

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定饼干中赭曲霉毒素A的含量

建立了免疫亲和柱-高效液相色谱测定饼干中赭曲霉毒素A的分析方法。样品经80%甲醇水溶液提取,提取液经免疫亲和柱净化,采用C18色谱柱,以乙腈-水-冰乙酸为流动相,用高效液相色谱仪对饼干中赭曲霉毒素A的含量进行了测定。赭曲霉毒素A在0.5~20.0 ng/mL范围内呈良好的线性关系,线性相关系数大于0.9991,方法的定量限为1.0μg/kg。样品的加标回收率为80.33%~97.20%,测定结果的相对标准偏差均小于7.22%(n=6)。该方法具有快速,定量准确,线性相关性理想,可适用于饼干中赭曲霉毒素A的测定。