免疫增强剂对鸡球虫免疫保护力的作用

选取免疫增强剂卡介苗 (BCG)与黄芪多糖 (APS)以比较不同用法、不同攻虫强度下其增强鸡球虫免疫保护力的效果。结果表明 :BCG和APS均具有明显的免疫促进作用 ,能更有效地抵抗 5万和 2 5万E .Tenella卵囊的攻击 ,但BCG效果优于APS ;BCG和APS大剂量或重复使用效果均不理想 ;BCG的最佳使用方法为 :以 0 0 2 5ml/只的剂量于球虫免疫前 7d使用 1次。

A型禽流感病毒不同拷贝数基质蛋白胞外区基因的原核表达及免疫保护力研究

为研究含禽流感病毒(AIV)不同拷贝数基质蛋白胞外功能区(M2e)亚单位疫苗在SPF鸡体中的免疫保护效力差异,根据已发表的高致病性AIV M2基因序列设计合成两对引物,利用PCR技术扩增单个M2e基因片段,以此为基础顺次串联得到不同拷贝数的M2e基因片段,并将其克隆到pMAL-C2x载体中,构建不同拷贝数的A型AIV M2e基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定。表达产物经纯化后免疫家兔、SPF鸡,制备抗M2e融合蛋白的多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光试验检测纯化的融合蛋白免疫原性,间接ELISA测定鸡血清抗体水平,表明MBP-3M2e融合蛋白的抗体水平较高,且MBP-3M2e亚单位疫苗产生最好的免疫保护力。

细粒棘球绦虫(中国大陆株)14-3-3重组蛋白的免疫保护力

目的探讨细粒棘球蚴Eg14-3-3重组蛋白的免疫保护性及其伴随的免疫反应。方法 ICR小鼠随机分为rEg14-3-3蛋白免疫组和PBS佐剂对照组,每隔2周背部皮下免疫1次,连续免疫3次。在第3次免疫后6周,用细粒棘球蚴活的原头蚴进行攻击感染,感染后24周杀鼠取脾,分离培养脾细胞,MTT检测淋巴细胞增殖率,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4水平,同时检获棘球蚴包囊数并计算减囊率,用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平。结果与佐剂对照组比较,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为84.47%,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a抗体水平高于对照组(P<0.05);IgE略低,但两组间差异无统计学意义;淋巴细胞增殖实验结果显示rEg14-3-3免疫组小鼠脾淋巴细胞特异抗原刺激后增殖显著,免疫组淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2分泌水平显著高于对照组,而IL-4、IL-10在两组间差异无统计学意义。结论 rEg14-3-3蛋白能诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,是潜在的疫苗候选抗原分子。

接种不同种类病原菌脂多糖对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力比较

用柱状嗜纤维菌 (C .columnaris)、嗜水气单胞菌 (A .hydrophila)和迟缓爱德华氏菌 (E .tarda)等 3种菌中提取的脂多糖 (LPS)作为免疫原 ,分别接种翘嘴鳜后 ,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价、血液中白细胞的吞噬活性和A .hydrophila活菌攻毒的方法 ,比较了接种 3种LPS对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力 (RPS)。结果表明 ,与对照组相比 ,受免鱼血清中均可产生较高的凝集及交叉凝集抗体效价 ,血液中白细胞的吞噬活性极显著地升高 ,而且具有较高的交叉RPS。推测LPS对翘嘴鳜既具有特异性免疫活性 。

复方中草药饲料添加剂对草鱼生长性能和免疫保护力的影响

随着水产集约化程度的不断发展，水产动物疾病逐步呈现多发性、复杂化、高危害的特点，养殖水环境的恶化也造成鱼类免疫力下降。为应对鱼类疾病蔓延趋势，大量杀菌消毒药物的泼洒和多种抗生素的使用，虽然对疾病起到了一定的控制作用，但长期大量使用化学合成药物和抗生素，不但会造成致病微生物产生抗药性而降低药效，

4株布鲁氏菌弱毒株对小鼠毒力及免疫保护力的评价

为检测国内外已有的布鲁氏菌疫苗株S19、M5、S2和RB51的胞内存活力、毒力、免疫保护力以及抗体消长水平,将上述4种疫苗株,分别以100:1的MOI侵染小鼠巨噬细胞,结果发现RB51的胞内存活力最强;以1×10~6 CFU/只免疫昆明小白鼠,测定各疫苗株在小鼠脾脏中的定居力,结果发现M5的定居力最强;待疫苗株在小鼠体内被清除后,以1×10~5 CFU/只腹腔接种2308毒株,进行攻毒试验,检测各疫苗株的保护力,结果发现M5的保护效果最好;免疫后连续10周采集血清,用ELISA检测血清中的Ig G滴度、IFN-γ的表达水平及抗体消长水平,结果发现S2、M5组的Ig G水平高于其他组,而各组间的IFN-γ水平差异不显著(P>0.05);分别用虎红平板凝集试验(RBPT)和标准试管凝集试验(SAT)检测血清凝集状况,结果发现S2、S19组的抗体持续时间较长;剖检各疫苗株对小鼠脾脏、肝脏、肾脏等组织引起的病理学变化,结果发现M5引起的病变程度最强。

问号状钩端螺旋体OmpL_(39)的表达和免疫保护力检定的研究

本文报道了纯化的强毒O17钩体39kd疏水外膜蛋白（OmpL39）在问号状钩体中的表达和对豚鼠的免疫力进行正规检定的研究。结果表明，OmpL39编码基因在问号状钩体中均有表达，但表达的量有所不同，强毒株明显多于弱毒株，同时，其抗原性也有较大差异。参照卫生部《中国生物制品规程》制造和检定钩体疫苗规程，对36只豚鼠进行三批随机对照试验。结果表明，OmpL39在豚既体内能产生高效价的阳性抗体，免疫力判定合格。经统计学处理：OmpL39组与生理盐水阴性对照组的免疫力有显著差异（P＜0．05），OmpL39组与阳性对照死菌苗组的免疫保护户相当，无显著差异（P＞0.05），OmpL39显示出极强的完全性免疫保护作用。本研究表明，赖型钩体O17株外膜免疫保护性抗原的分离，纯化有了新的进展，研究OmpL39编码基因和高效表达OmpL39研制新型口服OmpL39靶向控释基因疫苗已是较现实的目标。

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)“早熟株”对雏鸡免疫保护力的影响

实验采用人工培育的不同剂量柔嫩艾美耳球虫( E.tenella) “早熟株”接种雏鸡,测定出雏鸡血钠、血钾、血钙、血糖、血红蛋白的变化。结果表明,不同剂量的“早熟株”对所测定的雏鸡生理生化指标均有影响,其中2-0 ×104/ 只指标基本与对照组相同,对雏鸡有较好的保护作用,该剂量可作为未来弱毒苗的参考剂量。

鸡毒支原体F株弱毒疫苗接种剂量与免疫保护力的关系

将在试管培养基中连传 36代的鸡毒支原体 F株的新鲜培养物和在 - 2 5℃保存了 1 8d的湿疫苗分别作 1 0倍系列稀释 ,然后取不同活菌浓度的疫苗分别以 0 .0 33ml/只点眼接种 33日龄和 46日龄无鸡毒支原体和滑液支原体感染的北京白鸡 ,各种日龄的鸡各留一组不接种作为阴性对照。在免疫接种后的 36d和 72 d分别采血分离血清作抗体检测和用强毒攻击 ,两周后将鸡剖杀观察气囊病变 ,结果表明 :当疫苗中活菌数达到 1 0 5ccu/ ml时 ,其接种鸡便可产生一定的免疫保护力 ;当达到1 0 6ccu/ ml时 ,其接种鸡便可产生良好的免疫保护力。

猪链球菌2型胞外因子短片段的原核表达及其免疫保护力

以江苏分离株HA9801基因组DNA为模板,扩增猪链球菌2型(SS2)胞外因子ef基因的1423～2203bp片段,并将其亚克隆至表达载体pGEX-4T-1上,构建了重组质粒pGEX-4T-1-ef。将鉴定阳性的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG诱导8h,表达的融合蛋白rGST-sEF大小为56ku,以包涵体形式存在。Western-blotting显示,rGST-sEF能与全菌兔抗血清发生特异性反应。用自制rGST-sEF亚单位疫苗免疫新西兰兔,以最小致死量HA9801攻击,保护率为60%。结果表明,表达的融合蛋白rGST-sEF具有良好的免疫原性和免疫反应性。

卡氏肺孢子菌DNA疫苗pVAX-p55-v3免疫保护力的研究

肺孢子菌肺炎（Pneumocystis pneumonia,PC）是各种先天或后天免疫机能低下者常见的并发症和主要的死亡原因之一.复方磺胺甲（噁）唑作为目前预防和治疗PCP的主要药物,由于其毒副作用及耐药性问题受到了一定程度限制.因此,寻找更为安全及有效的防治措施成为目前研究PCP的一个焦点.

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡免疫保护力试验观察

用 3批AE (AvianEncephalomyelitis)油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡 ,免疫后定期采集种蛋进行孵化。当孵至 6日龄时取部分鸡胚 ,卵黄囊途径接种AEVVR株 ,进行AE鸡胚易感性试验。剩余鸡胚孵化至出雏后 ,分别于 1 ,7,1 4 ,2 1日龄肌肉注射AEVVR株攻毒。攻毒后观察不同日龄子代雏鸡AE的保护能力。结果疫苗免疫后 2～ 3个月的种鸡所产种蛋胚对AEV保护率达 1 0 0 % ,而同期所产种蛋孵出的子代雏鸡 ,在出雏后 3周内对AEVVR株攻毒的保护率亦达 1 0 0 %。免疫后 6～ 7个月种鸡所产种蛋胚对AEVVR保护率达 75 %～ 80 % ,而同期所产种蛋孵出的子代雏鸡 ,在出雏后 3周内对AEVVR株攻毒的保护率达 70 %～ 90 %。试验结果表明 。

艾灸对钩端螺旋体OmpL39免疫保护力的促进作用

选用 39KDa的钩端螺旋体外膜蛋白 (OmpL39)免疫豚鼠并施予艾灸 ,研究艾灸对OmpL39免疫保护力的影响。结果表明 :灸加OmpL39与单用OmpL39都有合格的免疫力 ,但前者的特异性抗体效价比后者高 ,提示艾灸通过扶助正气对OmpL39的免疫保护力有促进作用。

MD疫苗免疫增强剂对MDV感染雏鸡免疫保护力的影响

本试验对鸡疱疹病毒苗(HVT)免疫的1日龄雏鸡和1日龄HVT+马立克氏病(MD)疫苗免疫增强剂免疫雏鸡分别在5日龄和10日龄攻击MD强毒后的免疫保护情况进行了对比观察,结果表明,MD疫苗免疫增强剂可明显提高HVT的免疫效果,使雏鸡提前获得免疫保护,从而降低MD的死亡率和病变阳性率。

日本血吸虫候选疫苗免疫保护力研究进展

血吸虫病是危害严重的寄生虫病之一,其疫苗的研究是血吸虫病防治的一项工作重点也是一大难题。本文综述了日本血吸虫疫苗侯选分子筛选、模拟表位疫苗和多价疫苗的研究现状,并对血吸虫疫苗的深入研究进行了分析。

鸡毒害艾美耳球虫表面抗原基因(EnSAG)的克隆表达及其免疫保护力

为了研究鸡毒害艾美耳球虫表面抗原基因(EnSAG)的功能,以毒害艾美耳球虫(扬州株)第二代裂殖子的总RNA为模板,RT-PCR扩增其EnSAG,连接至pGEM-T-Easy载体,鉴定后构建pET28a(+)-EnSAG表达载体,转化至大肠杆菌BL21,鉴定后进行诱导表达和纯化。用纯化重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗EnSAG蛋白的多克隆抗体。利用多克隆抗体,用Western blot技术检测子孢子和第二代裂殖子中的天然EnSAG蛋白。用重组蛋白按高剂量(200μg/羽)、中剂量(100μg/羽)和低剂量(50μg/羽)免疫雏鸡,同时设置未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组为对照,以成活率、平均增重、相对增重率、卵囊减少率、病变记分和抗球虫指数(ACI)为指标,评价重组蛋白的免疫保护力。结果显示:该基因全长768 bp,编码255个氨基酸,分子质量24.63 ku;重组蛋白大小约为30 ku,以包涵体形式为多,能被组氨酸单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫阳性血清特异性识别;在第二代裂殖子中检测到天然EnSAG蛋白,其分子质量大约为27 ku。各试验组的成活率均为100%;免疫组的平均增重增加,病变记分显著降低(P<0.05);低剂量组相对增重率最高(86.19%);高剂量组卵囊减少率(61.54%)和ACI值(160.03)最高。本研究结果为进一步探析EnSAG蛋白的功能以及鸡球虫病亚单位疫苗研制奠定了基础。

表达SARS-CoV-2 S蛋白基因重组腺病毒疫苗对小鼠和雪貂的免疫保护力评价

2019新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(新冠病毒,SARS-CoV-2)引起的人的急性呼吸道传染病。其在全球范围内暴发对公共卫生安全构成了巨大的威胁,并对全球经济和社会活动造成了极大的影响。研制安全有效的疫苗以应对在全球范围内日益严峻的疫情显得尤为紧迫。根据WHO统计,目前全球在研的新冠疫苗至少有100多种,包括病毒载体疫苗、mRNA和DNA核酸疫苗、亚单位疫苗、纳米颗粒疫苗、减毒活疫苗及全病毒灭活疫苗等类型。对非人类灵长类动物的试验表明,其中部分疫苗,包括灭活疫苗、黑猩猩腺病毒载体疫苗及DNA核酸疫苗等能够显著抑制病毒在肺部组织的复制并阻止病毒性肺炎的发生。肺部组织是新冠病毒的主要致病器官,而上呼吸道组织感染与新冠病毒的侵入、被感染宿主对外排毒以及因此引起的病毒传播能力息息相关。如何通过疫苗免疫阻止新冠病毒在上呼吸道组织中的感染和复制依然是这些疫苗遇到的一个难题。

MD疫苗免疫增强剂对MDV感染雏鸡免疫保护力的影响

本实验对1日龄雏鸡分别用鸡疱疹病毒苗I(HVT)和HVT+马立克氏病(MD)疫苗免疫增强剂进行免疫,然后分别存5日龄和10日龄进行MD强毒攻击,对比观察结果表明,MD疫苗免疫增强剂可显著提高HVT的免疫效果,使雏鸡提前获得免疫保护,从而降低MD的死亡率和病变阳性率。

从黏膜免疫上探讨评价母猪病毒性腹泻疫苗的免疫保护力的方法

本文通过查阅黏膜免疫SIgA的形成过程以及针对妊娠母体血清IgA和初乳SIgA水平检测相关方面文献,表明妊娠母体血清IgA与初乳SIgA呈明显的正相关.认为可以摸索总结妊娠母猪血清IgA与初乳SIgA检测数值及新生仔猪保护力之间的规律性,最终只需监测母猪血清IgA的水平,就能很好地回答母猪免疫是否到位的问题.