一种简便快速的蛋白质免疫印渍法介绍

一种简便快速的蛋白质免疫印渍法介绍骆爱玲，王继伟，李佳格（中国科学院植物研究所，北京１０００４４）ＡＳＩＭＰＬＥＭＥＴＨＯＤＦＯＲＰＲＯＴＥＩＮＢＬＯＴＴＩＮＧＡＮＤＬＭＭＵＮＯＡＳＳＡＹＬｕｏＡｉ－ｌｉｎｇ；ＷａｎｇＪｉ－ｗｅｉ；Ｌｉｊｉａ－ｇｅ（...

免疫印渍法检测包虫病人抗体及其在临床和流行病学上应用的探讨

本文报告了用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印渍法(Western Blot,WB)检测包虫病人血清抗体以及在流行病学调查中同时使用两种血清学方法进行抗体检测的结果,WB 法主要是以肉眼观查38kDa抗原带(抗原5)来判定结果。此项试验结果表明,以38kDa 反应区带为诊断依据的免疫印渍法在敏感性和特异性上均低于 ELISA.对一个未知地区进行包虫病的流行病学调查时,使用 ELISA 方法比 WB 法更为合适,因此应当进一步探索提高 WB 诊断价值的途径.

应用免疫印渍法检测猪和鱼卵透明带抗原的免疫交叉反应性

为了研究猪和鱼卵透明带抗原的免疫交叉反应性，应用免疫印渍术对其抗原组分进行了检测．实验结果表明，鱼卵透明带抗原与已知具有精子受体活性的猪ＺＰ３抗原，甚至猪全ＺＰ抗原均没有交叉反应．提示鱼卵透明带不含有与猪和人等哺乳类的透明带免疫学相类似的抗原决定簇．

酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原

用猪囊尾蚴抗原免疫纯系家兔制备免疫兔血清，以酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人血清中循环抗原。４０例脑囊虫病人分别出现１～４条特异反应带，分子量为５３、２３、１９、１７．５ＫＤ；各带出现率分别为９０％、７５％、６７．５％和８７．５％。２０例单纯绦虫病患者和２０例正常人，除１例绦虫病人呈交叉反应（１９ＫＤ）外均为阴性。结果表明来源广、制备方便的免疫兔血清检测诊断脑囊虫病具有较高的特异性和敏感性。

用免疫印渍法对北海道人类泡球蚴病流行程度的评价

最近几年从多房棘球绦虫(E.m)地方性流行区的居民中采集了许多血清样品,用以监测人类泡球蚴病。1987和1988年,总共来集了154636份血清,然后主要根据

免疫印渍法检测寄生虫抗原的研究

寄生虫病的诊断包括病原学诊断和免疫学诊断,病原学诊断虽具有确诊疾病的优点,但容易漏诊.免疫学诊断包括皮内反应和血清学诊断,皮内反应特异性较低,只供初次筛选患者用;血清学诊断包括应用不同的反应方法检测特异性抗体或抗原.检测血清中抗体时,由于存在假阴性、假阳性或交叉反应等缺点,且治愈后患者也可出现抗体阳性反应,因而其诊断的可靠性受到影响.

免疫印渍技术用于斯氏并殖吸虫病抗原检测的研究

采用免疫印渍技术分析了斯氏并殖吸虫 30、60和 90d虫体抗原组份与斯氏、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫、血吸虫、囊虫、包虫病人和健康人血清反应情况。结果发现斯氏和卫氏并殖吸虫病人血清均可识别 9条抗原多肽 ,分子量分别为 1 7、2 7、2 9、35 5、37 5、60、72和 90kDa ,其中 35 5、37 5和 39kDa三条抗原带可 1 0 0 %同 2种并殖吸虫病人血清起反应 ,特异性达 1 0 0 %。 72和 90kDa抗原多肽可与其他寄生虫病人和正常人血清发生交叉反应。不同虫龄期的抗原在反应条带上无明显区别 ,但以 30d龄虫体抗原的显色更清晰。结果提示 35 5、37 5、和

酶免疫转移印渍法对斯氏并殖吸虫抗原的分析和应用研究

由于并殖吸虫抗原成分复杂,检测和分析特异的抗原成分,在并殖吸虫病的免疫诊断和抗原的分离纯化方面都具有重要意义。本文应用酶免疫转移印渍法(EITB)分析斯氏并殖吸虫成虫、幼虫抗原,并用于该病的诊断,取得了较满意的结果。

四株抗细粒棘球蚴囊液抗原单克隆抗体的免疫印渍分析

本文报告了应用免疫印渍法(Western Blot)分析2F1、2F10、2G4和 D5四株抗细粒棘球蚴囊液抗原的单克隆抗体的实验结果。用浓缩人肝细粒棘球蚴囊液经 SDS—PAGE 电泳分离后,转印硝酸纤维膜。用4株单克隆抗体识别的结果表明。2F1识别的抗原表位存在于分子量为38kDa,28kDa、20kDa 和14kDa 的多肽链上;2F10识别的抗原表位存在于38kDa、28kDa 的肽链上,38kDa 的反应带很淡,说明这一肽链上2F10抗原表位的密度很低;2G4仅识别位于38kDa 上的抗原表位;而 D5则识别的主要是28kDa、20kDa 和14kDa肽链上的抗原表位。这一结果说明这4株单克隆抗体是针对不同抗原表位的抗体,而2F1识别的抗原表位较广泛地存在于分子量范围较广的不同肽链上,应当是细粒棘球蚴囊液的主要抗原表位。实验结果还表明同一种抗原表位存在于被划分为抗原5和抗原 B 的不同肽链上。因而对至今公认的细粒棘球蚴囊液的主要抗原为抗原5和抗原 B 的概念提出了新的看法,这对于今后细粒棘球绦虫抗原的研究可能有重要意义。

几种检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子表达的方法学

目的 探讨建立适用于临床工作的检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的方法.方法 免疫组化法.RT-PCR、Western blot、Dot blot分析VEGF在乳腺导管癌组织的表达.结果 VEGF阳性细胞主要为肿瘤细胞,间质也着色.VEGF蛋白质分子量为46KD,含三种异构体.Dot bolt见于53%癌组织,VEGF表达水平高于癌旁组织.结论 Dot blot可作为临床工作中检测VEGF的初筛方法.

应用单克隆抗体免疫探针对我国多房棘球绦虫抗原分析的探索

应用细粒棘球绦虫单克隆抗体2F1对我国三个不同地区来源的多房棘球绦虫原头节抗原组分进行了免疫印渍分析.试验结果表明在三个多房棘球绦虫样本之间存在着明显的区别。细粒棘球绦虫单克隆抗体2F1所识别的抗原表位在三个多房棘球绦虫样本中分布于分子量不同的肽链上;在分子量相同的肽链上,表位的密度也不相同;其中宁夏样本出现的抗原抗体反应带较多,这说明我国三个不同地区的多房棘球绦虫在抗原性及抗原表位的分布上存在着差别.作者认为单克隆抗体免疫探针在棘球属绦虫抗原分类研究中有很高的应用价值.

ELIB检测脑囊虫病人循环抗原

采用猪囊尾蚴抗原免疫纯系家兔制备免疫兔血清,以酶联免疫印渍(ELIB)法检测40例脑囊虫病人血清中循环抗原。脑囊虫病人分别出现1条～4条 特异反应带,各带分子量分别为53.0、23.0、19.0、17.5 KD;各带出现率分别为90.0％、75.0％、67.5％和87.5％。20例单纯绦虫病患者和20例正常人,除1例绦虫病人呈交叉反应(19.0KD)外均为阴性。结果表明来源广、制备方便的免疫兔血清检测诊断脑囊虫病具有较高的特异性和敏感性。