新疆伊犁州新诊断HIV/AIDS免疫印迹试验条带与CD~+_4T淋巴细胞检测结果分析

目的 分析新疆伊犁州新诊断HIV/AIDS免疫印迹试验(WB)条带与CD~+_4T淋巴细胞计数(CD4细胞数)的关系,了解不同疾病进程的WB条带特征。方法 收集新疆伊犁州2018—2022年767例新确证的HIV/AIDS基本信息、WB条带情况和确证阳性3个月内首次CD4细胞数检测结果,并根据CD4细胞数将病例分为<200、200~499、≥500个/μL 3个组,分析组间条带差异。结果 767例新诊断HIV/AIDS的WB条带中,gp160、gp120、gp41检出率分别为100%、99.48%、86.96%;p66、p51、p31检出率分别为98.83%、97.52%、92.70%;p24和p17检出率分别为99.61%和91.13%,p55和p39检出率分别为4.56%和6.39%;p24和p17条带在CD4细胞数<200个/μL组的检出率低于200~499个/μL组和≥500个/μL组(P﹤0.05);8条带型最多,占72.36%,随着CD4细胞数的上升,7条及以下带型占比呈下降趋势(χ~2_(趋势)=4.28,P=0.04),也表示随着CD4细胞数的下降,条带数量减少。结论 人体感染HIV后,随着疾病进展,WB条带会出现一定程序的缺失。综合分析WB条带特征和CD4细胞水平,可准确评估患者疾病进程。

HIV-1免疫印迹试验不确定/阴性样本病毒载量检测结果分析

目的分析HIV-1核酸定量试验对HIV-1抗体不确定/阴性结果的诊断价值,为及时诊断HIV感染提供参考依据。方法收集贵州省2个市(州)2021年1月-5月HIV初筛抗体有反应性样本进行免疫印迹试验(WB),WB检测结果为HIV-1抗体不确定/阴性的样本进行VL试验,并对不确定样本随访追踪,随访追踪到WB结果依旧为不确定的样本再次进行VL检测,同时对TMT试剂WB结果呈阴性、VL>5000 copies/mL样本采用麦克莱金HIV抗体确诊检测试剂进行试验,将结果纳入统计分析。结果1440例初筛有反应性样本经WB诊断HIV-1抗体阳性1142例、阴性159例、不确定139例。男性WB抗体阳性确证率高于女性,25岁以下人群阳性确诊率低于其他年龄人群,阴性率显著高于年龄人群。139例不确定样本经VL检测后VL>5000 copies/mL有36例、VL<5000 copies/mL和未检出分别1例和102例,VL值范围为5×10^(5)~1×10^(8)copies/mL、VL>5000 copies/mL样本在50岁及以上男性占比较高。WB不确定样本p24是主要带型。159例WB阴性样本经VL检测有6例(3.8%)VL>5000 copies/mL、未检出153例(96.2%)。139例WB不确定样本追踪到22例,最终10例转阳,6例转阴,6例结合VL检测值综合判定为阴性,VL和WB二者诊断结果具有一致性。结论WB出现抗体不确定/阴性时应立即联合HIV-1核酸定量检测,避免WB检测技术窗口期造成漏诊。

蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析

目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占1.6%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)3例,占5%;HIV-1型确认试验阳性2例,占3.3%。结论蛋白免疫印迹法(WB)试验确定个体有无HIV感染以及HIV感染情况提供依据。

HIV-1感染者蛋白印迹带型特征与免疫功能相关性分析

目的通过对HIV-1感染者蛋白印迹带型(WB)和CD4^(+)T淋巴细胞(CD4细胞)计数结果的分析,探讨不同WB带型特征与感染者免疫状态的相关性,从而为临床诊疗提供依据。方法纳入271例HIV-1型感染者,应用流式细胞术和免疫印迹法分别检测感染者静脉血中CD4细胞计数以及WB带型,分析不同年龄、性别与免疫缺陷程度、WB带型的关系,以及不同免疫缺陷程度与WB带型的关系。结果不同年龄组间的免疫缺陷程度差异有统计学意义(χ^(2)=28.65,P<0.001),而单个抗体条带分布差异无统计学意义(均P>0.05)。不同性别间仅p55抗体条带的分布差异具有统计学意义(χ^(2)=4.51,P<0.05),而免疫缺陷程度差异无统计学意义(P>0.05)。在不同免疫状态下,WB带型中p31、p55、p17抗体条带的分布差异有统计学意义(χ^(2)值分别为7.87、19.44、7.95,均P<0.05),HIV-1抗体全条带、gag基因编码全带、p55+p31缺失、p55+p17缺失的检出率差异有统计学意义(χ^(2)值分别为4.75、16.23、8.51、8.00,均P<0.05)。结论感染者的免疫状态会影响WB带型特征,其中p17抗体与p55抗体条带同时丢失可能与HIV感染程度有关。WB带型分析对治疗艾滋病的疗效评价和免疫重建监测可能有一定的帮助。

143例HIV初筛阳性标本免疫印迹试验结果分析

目的 使用酶联免疫吸附法 (ELISA)、硒标免疫层析法 (Determine)及免疫印迹法 (WB)对 14 3例血清标本做初筛及确认试验。 方法 操作及结果判断按照《全国艾滋病检测技术规范》施行。 结果 14 3例初筛试验阳性经免疫印迹试验确认 14 1例HIV -1阳性 ,且条带出现百分率gp12 0 、p66为 10 0 % ,gp160 、gp41、p51、p3 4 、p55为 90 %以上 ,1例HIV -1合并 gp3 6出现。

肺孢子虫病实验与临床研究 Ⅱ．免疫印迹试验检测人血清肺孢子虫抗体

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析鼠源卡氏肺孢子虫包囊可溶性抗原呈现２０条以上多肽区带，主带分子量分别为＞１００、８５－９４、６７、５２和３４ｋＤａ。ＥＩＴＢ检测表明重庆地区健康人血清中存在识别１１０、１０５、８５、６７、５２和４６ｋＤａ的ＩｇＧ型抗体，抗体阳性率为５６．７％（５９／１０４）。其中８５ｋＤａ抗原能与抗人源肺孢子虫单克隆抗体２Ｇ２起反应。健康人血清抗８５ｋＤａ抗原的抗体阳性率为３７．５％（３９／１０４），但ＩｇＭ型抗体均为阴性。另外检测７例确诊的卡氏肺孢子虫病患者，４例血清ＩｇＧ型抗体阳性，其中３例抗８５ｋＤａＩｇＧ型抗体阳性。

重组免疫印迹试验对3种进口抗-HCV ELISA试剂组合应用的探讨

目的探讨3种进口抗-HCV ELISA试剂两两组合的应用价值。方法采用3种进口抗-HCV ELISA试剂同时筛查51例抗-HCV结果不一致的弱阳性标本,并用抗-HCV分段确证试剂进行确证。结果 51例抗-HCVELISA弱阳性标本,抗-HCV分段确证试剂阳性35例,可疑16例,16例可疑标本经NAT检测分析：HCV RNA阳性7例,确认为阳性;9例为阴性,判定为抗-HCV可疑。单一ELISA试剂假阴性率19.24%~72.41%,试剂组合后假阴性率4.76%~30.95%。结论选择抗-HCV检测试剂的最佳组合对保证输血安全意义重大。

抗-HIV1+2筛查试验阳性与免疫印迹试验对比结果的分析

目的对比分析艾滋病病毒(HIV 1+2)抗体筛查试验阳性结果与免疫印迹试验结果。方法对150份筛查复检为阳性标本的酶联免疫吸附试验(ELISA)与明胶颗粒凝集试验(PA)的结果,分别与同时检测的免疫印迹试验(WB)的结果进行比较,计算出ELISA、PA的符合率、敏感性和特异性,并依据ELISA的OD值变化探求与PA及WB结果的关系。结果ELISA、PA与WB的阳性符合率分别为89.93%和86.81%;ELISA的敏感性为100%,特异性为90.34%;PA的敏感性为100%,特异性为87.33%。凡经ELISA检测其S/CO值(平均18.63)远高于阳性对照S/CO值(平均6.677)的强阳性标本,与PA、WB的阳性符合率同为100%;经ELISA检测其S/CO值(平均0.8596)≤1或略大于1的标本,与PA、WB的阳性符合率分别为21.05%和0;经ELISA检测其S/CO值(平均2.648)>1、小于阳性对照S/CO值的标本,与PA、WB的阳性符合率分别为66.67%和0。结论筛查试验存在一定的假阳性结果,HIV抗体结果的报告必须以WB结果为准;ELISA、PA与WB确认结果不符的情况仅出现于确认为HIV-1抗体阴性及不确定的标本中。

2472例HIV抗体筛查(ELISA)与免疫印迹试验的对比研究

目的对比分析HIV抗体筛查（ELIA）与免疫印迹试验结果，探讨两种方法检测HIV抗体的差异性。方法参照2004年《全国艾滋病检测技术规范》的要求，对HIV抗体初筛检测呈阳性反应的标本采用免疫印迹试验进行确证。结果2472例H1V抗体复核标本中，两种ELISA都呈阳性反应的为2467例，与WB的阳性符合率为97．97％；ELISA1呈阳性反应且ELISA2呈阴性反应的为5例，与WB的阳性符合率为0％；S／CO值落在了1。5．9之间，阳性符合率为43．48％；S／CO值在6～9．9之间，确证试验阳性符合率为95．56％；S／CO值≥10，确证试验阳性符合率为99．64％；所有的确证标本中，gp160、gp120、gp41、p24的出现都在95％以上，同时也出现了36例gp36的标本。结论ELISA诊断试剂存在有一定的假阳性，随着S／CO值的增高，与确证试验的阳性符合率也将升高，但是高S／CO值的样品并不代表感染HIV，HIV抗体阳性的报告建议以确证试验的结果为准；WB确证方法在不确定标本中存在一定的缺陷。

乙酰胆碱受体抗体斑点免疫印迹法的建立与评价

目的重症肌无力(MG)是神经肌肉接头的自身免疫性疾病。乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)作用于乙酰胆碱受体(AChR),通过一系列不同的致病机制导致组织结构改变,AChR密度或功能降低,神经肌肉传递减少,导致严重肌无力。本文初步建立斑点免疫印迹法(DIB)检测AChR-Ab,并对该方法的分析性能及对MG的诊断价值进行评价。方法通过方阵滴定法选择DIB法检测AChR-Ab的最佳实验条件,并用该法检测2018年至2020年来我院就诊的MG患者102例,其他自身免疫病患者108例,并选择100例同期在我院体检的健康人作为研究对象。其中MG患者设为MG组,其他自身免疫病患者为疾病对照组,健康人为正常对照组。同时用ELISA法测定3组的AChR-Ab水平,比较不同方法的分析性能、相关性及诊断价值。结果对测得的结果进行一致性Kappa检验,结果显示DIB法与ELISA法之间高度一致(Kappa值>0.75)。同时经过配对卡方检验,两组差异无统计学意义(P=1.00)。DIB法灵敏度、特异性均低于ELISA法。结论本研究初步建立AChR-Ab检测的DIB法,该方法需进一步优化改进。

抗CCP抗体斑点免疫印迹试验测定方法的建立与初步应用

目的建立检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的斑点免疫印迹试验,探讨其在类风湿关节炎(RA)疾病诊断中的价值。方法通过方阵滴定法选择斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体的最佳实验条件,并用该法检测RA、其他疾病及健康人血清,同时与自行建立的ELISA法及欧蒙试剂抗CCP抗体检测结果作对比分析。结果斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体对RA的诊断敏感性为52%,特异性为94%,并具有较好的方法学稳定性和特异性。在48例被诊断为RA患者中有25例抗CCP抗体阳性,显著高于其他疾病组和正常对照组(P<0.01)。对比研究结果表明,该法与基于RSA-CCP固相模式建立的ELISA法具有高度的相关性(χ2=131.712)和一致性(Kappa=0.771,P<0.001),与欧蒙试剂检测结果亦具有高度的相关性(χ2=24.147)和很好的一致性(Kappa=0.714,P<0.001)。结论成功建立了抗CCP抗体检测的斑点免疫印迹试验,实验结果稳定,特异,可靠,值得进一步推广和研究。

蛋白免疫印迹法试验结果与HIV感染关系的探讨

目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染状况。方法对50份抗-HIV初筛阳性血清使用WB法进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性45例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占2%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)2例,占4%;HIV-1型确认试验阴性2例,占4%。结论WB法试验为确定个体有无HIV感染以及HIV感染状况提供依据。

HIV抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果对比分析

目的对比分析H IV抗体筛查试验阳性结果与免疫印迹试验(WB)结果,探求H IV抗体筛查阳性样本ELISA的S/CO值与确认实验结果的关系。方法对952份筛查阳性样本的ELISA结果与WB确认结果进行比较,计算ELISA的敏感性、特异性,并依据ELISA检测S/CO值变化探求与WB结果的关系。结果ELISA与WB的阳性符合率为93.39%,ELISA检测H IV抗体的敏感性为99.53%,特异性为96.49%;确认为阳性标本的S/CO平均值为18.38,gp160、gp120、gp41、p66、p51、p31、p24条带出现的百分率都在93%以上,其中gp160出现的百分率为100%;确认阴性与不确定标本S/CO平均值分别为3.03与2.22,经统计学分析,两组之间无显著性差异。结论筛查试验存在假阳性结果,H IV抗体结果的报告必须以确认结果为准。高S/CO值(≥6.0)预示H IV抗体阳性的可能性较大,而S/CO值较低时H IV抗体阴性及不确定的可能性较大。WB确认方法在区分阴性与不确定标本中存在不足。

两种不同初筛酶联免疫吸附试验试剂联合检测以替代艾滋病病毒抗体蛋白印迹试验确认检测的对比分析

目的 为评价两种不同初筛酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂联合检测艾滋病病毒 (HIV)抗体的可靠性 ,以替代艾滋病病毒 (HIV)蛋白印迹 (Westernblotting ,WB)确认法。 方法 79份初检为HIV抗体阳性的吸毒人员血清 ,重新统一用两种抗体初筛ELISA试剂 (Vironostika○RHIVUni FormⅡ plus 0和UBIHIV 1 / 2EIA)进行复测 ,之后随机选择前 51份样品进一步做WB确认 ,并做对比分析。 结果 51份血清中 ,有 49份样品 2次初筛复测时至少有 1次复测的结果显示为S/CO≥ 6 ,它们的WB确认结果均为HIV抗体阳性 ;其余的 2份样品 2次初筛复测时 ,其S/CO均 <6 ,但其中 1份 (样品“0 5”)的WB结果为HIV抗体阴性 ,1份 (样品“584”)为HIV抗体阳性。确认为HIV抗体阴性的样品“0 5” ,在整个初筛的 3次检测中曾 2次出现过S/CO >1 ;确认为HIV抗体阳性的样品“584” ,虽然 3次初筛检测中S/CO值均 >1 ,但因本试验中 2次复测得到的S/CO都 <6 ,因而其确认结果亦显示出较少抗原带 ,即只有p2 4和Gp1 60。 结论 两种不同原理的ELISA试剂 (最好为进口试剂 )联合检测HIV抗体可替代WB确认法 ,以监测具有一定HIV流行率的风险人群 (如哨点监测人群 )的HIV/艾滋病疫情。报告为HIV抗体阳性的临界判断指标采用 2次初筛S/CO≥ 6应是可靠的 ;

核酸检测时代再议免疫印迹试验在HIV感染诊断中的意义

免疫印迹试验(WB)在我国人类免疫缺陷病毒(HIV)感染诊断体系中仍占据重要地位,但其灵敏度和特异性都有局限,“不确定”结果偏多,影响诊断效率。HIV RNA检测结果判断更为客观,且更灵敏地诊断早期感染和部分终末期艾滋病,对暴露前或暴露后预防(PrEP/PEP)失败导致的感染也有一定诊断价值,高敏、定量HIV RNA检测也是启动抗逆转录病毒治疗(ART)和监测疗效的主要手段。当今在核酸检测设施和人员配备趋于完善的地区,应考虑以核酸检测技术逐步取代WB,全面用于HIV感染的诊断和治疗监测。

免疫印迹试验在诊断儿童幽门螺旋杆菌感染中的应用评价

目的:评价免疫印迹试验(WesternBlotting)在诊断不同年龄组及不同病理表现儿童幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中的应用价值。方法:对450例有消化道症状的患儿,进行胃镜检查并取病变处胃黏膜组织行病理学检查,以及13C尿素呼气试验(13Cureabreathtest,13CUBT)、血清免疫印迹试验及胃液HPDNAPCR检查。结果:在4岁～6岁和6岁～12岁组患儿中,13CUBTHP检出率明显高于免疫印迹试验(P<0.01);在12岁～18岁组患儿中,13CUBTHP检出率与免疫印迹试验比较差异无显著性(P>0.05)。细胞毒性基因相关蛋白(Cytotoxinassociatedgeneprotein)阳性的HP感染在溃疡病组明显高于慢性胃炎组和正常组(P<0.05),慢性胃炎组CagA(Cytotoxinassociatedgeneprotein,CagA)阳性HP显著高与正常组(P<0.05)。结论:在12岁以上的少年患儿中,免疫印迹试验可作为快速诊断HP感染的可靠手段,并且能判断出是否为产毒菌株感染。在12岁以下的儿童中,免疫印迹试验最好与13CUBT联合使用。

139例HIV抗体筛查标本的免疫印迹试验结果分析

目的使用酶联免疫吸附法(ELISA)、硒标免疫层析法(Determine)及免疫印迹法(WB)对139例血清标本进行筛查及确认。方法操作及结果判断按照《全国艾滋病检测技术规范》实施。结果139例筛查阳性标本经免疫印迹试验确认138例HIV-1阳性,gp160、gp120、gp41、p66、p51条带出现为95%以上。结论初筛结果有假阳性须经确认试验才能得出准确结果。

山东省2003年艾滋病病毒抗体免疫印迹试验结果分析

[目的 ]确认山东省各地初筛HIV抗体阳性血清 ,并进行带型分析。 [方法 ] 2 0 0 3年对山东省各地检测后上送的HIV抗体初筛阳性标本 ,用PA、ELISA试验复核 ,阳性者用WB试验进行确认 ,并进行基因分型。 [结果 ] 2 62份血清中 ,PA和ELISA复核 15 2份为HIV抗体阳性 (占 5 8 0 1% ) ,其中 12 5份确认为HIV 1抗体阳性 ;条带出现百分率gp160、p2 4为 10 0 % ,gp12 0、gp41、p66、p5 1和 p3 1在 96%以上 ,p17、p5 5分别为 86 4%和 85 6%。[结论