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HBsAb靶向干扰素和IL-12双表达质粒pVAX-HBVE的构建与应用
被引量:
2
1
作者
侯沙沙
高燕
+6 位作者
王宇
武帅
朱晓明
郭炳冉
徐元基
阎瑾琦
于继云
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期921-924,共4页
目的构建能同时表达HBsAb靶向干扰素(dsFvα)和人白细胞介素12(hIL-12)的新型基因治疗质粒pVAX-HBVE。方法将pEE14.1-dsFvα质粒双酶切获得dsFvα片段,克隆入经同样双酶切后的载体pVAX-IRES-hIL-12 IRES序列的上游,构建重组表达质粒命名...
目的构建能同时表达HBsAb靶向干扰素(dsFvα)和人白细胞介素12(hIL-12)的新型基因治疗质粒pVAX-HBVE。方法将pEE14.1-dsFvα质粒双酶切获得dsFvα片段,克隆入经同样双酶切后的载体pVAX-IRES-hIL-12 IRES序列的上游,构建重组表达质粒命名为pVAX-HBVE。将重组质粒瞬时转染HEK293T细胞,ELISA检测目的基因表达;提取重组质粒pVAXHBVE,注射到乙肝转基因小鼠腿部肌肉并采用电穿孔递送,定量PCR检测注射前后转入1.3拷贝HBV全基因组的BALB/c小鼠体内HBV基因拷贝数的变化。结果 pVAX-HBVE经酶切和测序分析与预期设计完全一致,显示重组质粒构建成功;ELISA检测显示dsFvα和IL-12基因在细胞上清中获得表达;注射重组质粒pVAX-HBVE 30μg仅1次即可使转基因小鼠体内的HBV基因拷贝数降低2个数量级。结论成功构建能够含有靶向干扰素(dsFvα)和hIL-12的双表达质粒,为慢性乙肝基因治疗提供新的策略。
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关键词
乙型病毒性肝炎
免疫基因治疗剂
HBsAb靶向性干扰素
IFN-Α
hIL-12
真核表达
下载PDF
职称材料
题名
HBsAb靶向干扰素和IL-12双表达质粒pVAX-HBVE的构建与应用
被引量:
2
1
作者
侯沙沙
高燕
王宇
武帅
朱晓明
郭炳冉
徐元基
阎瑾琦
于继云
机构
曲阜师范大学生命科学学院
军事医学科学院基础医学研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期921-924,共4页
基金
国家自然科学基金(31100655)
文摘
目的构建能同时表达HBsAb靶向干扰素(dsFvα)和人白细胞介素12(hIL-12)的新型基因治疗质粒pVAX-HBVE。方法将pEE14.1-dsFvα质粒双酶切获得dsFvα片段,克隆入经同样双酶切后的载体pVAX-IRES-hIL-12 IRES序列的上游,构建重组表达质粒命名为pVAX-HBVE。将重组质粒瞬时转染HEK293T细胞,ELISA检测目的基因表达;提取重组质粒pVAXHBVE,注射到乙肝转基因小鼠腿部肌肉并采用电穿孔递送,定量PCR检测注射前后转入1.3拷贝HBV全基因组的BALB/c小鼠体内HBV基因拷贝数的变化。结果 pVAX-HBVE经酶切和测序分析与预期设计完全一致,显示重组质粒构建成功;ELISA检测显示dsFvα和IL-12基因在细胞上清中获得表达;注射重组质粒pVAX-HBVE 30μg仅1次即可使转基因小鼠体内的HBV基因拷贝数降低2个数量级。结论成功构建能够含有靶向干扰素(dsFvα)和hIL-12的双表达质粒,为慢性乙肝基因治疗提供新的策略。
关键词
乙型病毒性肝炎
免疫基因治疗剂
HBsAb靶向性干扰素
IFN-Α
hIL-12
真核表达
Keywords
viral hepatitis B
immune gene therapeutic agent
dsFv
IFN-α
hIL-12
eukaryotic expression
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
R446.61 [医药卫生—诊断学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBsAb靶向干扰素和IL-12双表达质粒pVAX-HBVE的构建与应用
侯沙沙
高燕
王宇
武帅
朱晓明
郭炳冉
徐元基
阎瑾琦
于继云
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
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