YTHDF基因DNA甲基化与乙肝疫苗低/无免疫应答水平关系研究

目的:从表观遗传角度探究N6-甲基腺苷(m 6 A)修饰相关的YTHDF基因DNA甲基化与乙肝疫苗接种者免疫低/无免疫应答水平的关系。方法:收集263例汉族儿童为研究对象。对儿童的外周血进行乙肝血清标志物检测,将乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)浓度<100 mIU/ml者纳入病例组,将anti-HBs≥100 mIU/ml者纳入对照组。使用Methyl Target技术检测YTHDF基因位点的DNA甲基化水平,分析YTHDF基因81个位点CpG DNA甲基化水平与乙肝疫苗免疫应答水平的关系。结果:病例组纳入104例,对照组纳入159例,两组年龄和性别分布比较差异无统计学意义(均P>0.05)。病例组YTHDF1_1基因23位点、YTHDF1_2基因69位点与YTHDF1_2基因140位点甲基化水平均高于对照组(均P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析表明,YTHDF1_1基因23位点和YTHDF1_2基因140位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的危险因素,而YTHDF1_2基因69位点和YTHDF2_1基因28位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的保护因素(均P<0.05)。结论:YTHDF1_1基因23位点和YTHDF1_2基因140位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的危险因素,YTHDF1_2基因69位点和YTHDF2_1基因28位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的保护因素。

细胞因子基因多态性与广西侗族儿童乙肝疫苗免疫应答水平的关联

目的探究细胞因子基因多态性与广西侗族儿童乙肝疫苗(HepB)免疫应答水平的相关性。方法采用非匹配病例对照研究方法,招募2014年1月-2016年12月在广西三江侗族自治县人民医院就诊的279名89月龄侗族儿童为研究对象,将10 mIU/ml≤抗体浓度<100 mIU/ml设为病例组,≥1 000 mIU/ml设为对照组。采用MEIA、SNPscanTM(SNP)分型技术与PCR技术,分析15个细胞因子基因66个位点的基因型、等位基因与Hep B免疫应答水平的关系。结果病例组IFN-γ基因rs2069727位点CT基因型、C等位基因和IFN-γ基因rs2069705位点A等位基因低应答频率高于对照组,增加Hep B低应答风险[OR (95%CI):2.35 (1.035.39);2.24 (1.224.10);2.34 (1.294.26)];病例组TNF-α基因rs769178位点G等位基因和TNF-α基因的rs1041981位点A等位基因低应答频率低于对照组,降低Hep B低应答风险[OR (95%CI):0.29 (0.140.62);0.55 (0.320.96)]。结论 IFN-γ基因rs2069727位点CT基因型与C等位基因、rs2069705位点A等位基因可能是广西侗族儿童Hep B初次免疫低应答的危险因素,而TNF-α基因rs769178位点G等位基因和rs1041981位点A等位基因可能是Hep B免疫水平低应答的保护因素。

IFNG基因DNA甲基化与乙型肝炎疫苗免疫应答水平的关联

目的分析广西汉族儿童IFNG基因DNA甲基化与乙型肝炎(乙肝)疫苗(HepB)免疫应答水平的关联性。方法采用非匹配病例对照方法,招募广西3家医院就诊的263名已完成HepB免疫程序的8~9月龄汉族儿童作为研究对象,将乙肝表面抗体浓度(抗-HBs)<100 mIU/ml设为病例组,≥100 mIU/ml设为对照组。采用多重PCR技术、重亚硫酸盐测序、使用Illumina平台对IFNG基因目标区域及其CpG位点进行DNA甲基化高通量测序。采用非条件logistic回归模型分析IFNG基因18个位点胞嘧啶-磷酸-鸟苷酸 DNA甲基化情况与HepB免疫应答水平的关联。结果病例组(104名)和对照组(159名)抗-HBs[M(Q1,Q3)]分别为62.34(30.06,98.88)mIU/ml和1 089.10(710.35,1 233.45)mIU/ml。病例组IFNG_(1)基因44和93位点甲基化水平差异高于对照组(P<0.05),非条件logistic回归模型显示,IFNG_(1)基因44位点(OR=1.18,95%CI:1.03~1.35)和93位点(OR=1.21,95%CI:1.07~1.38)DNA甲基化水平与HepB应答水平具有相关性。结论 IFNG_(1)基因44和93位点DNA甲基化水平改变可能是影响广西汉族儿童HepB应答水平的相关因素。

FTO基因DNA甲基化与乙肝疫苗免疫低/无应答水平的关系

目的通过探讨m6A去甲基化酶FTO基因DNA甲基化与乙肝疫苗免疫低/无应答水平的关联性,为预测个体乙肝疫苗的应答水平、研发新型HepB疫苗提供科学的依据。方法采用非匹配病例对照的研究方法,招募于2014-2016年间至广西南宁市三所三级甲等医院就诊的8~9月龄263例儿童(已完成乙肝免疫接种程序)作为研究对象,根据乙肝表面抗体(HBsAb)水平将抗-HBs浓度<100 mIU/mL作为观察组,抗-HBs浓度≥100 mIU/mL作为对照组。采用Methyl Target技术检测FTO基因位点的DNA甲基化水平,分析FTO基因28个位点CpG岛DNA甲基化水平与乙肝疫苗免疫应答水平的关系。结果FTO基因各基因位点的DNA甲基化水平都比较低;观察组和对照组的DNA甲基化水平在FTO_1基因222位点、FTO_2基因72位点的差异具有统计学意义;观察组FTO_1基因222位点的DNA甲基化水平高于对照组(Z=-2.38,P=0.009)。观察组FTO_2基因72位点的DNA甲基化水平高于对照组(Z=-1.71,P=0.044)。结论提示人体中FTO基因存在发生甲基化的可能,乙肝疫苗接种者低/无免疫应答水平可能受FTO_1基因222位点、FTO_2基因72位点的影响。

WTAP基因DNA甲基化与广西汉族儿童乙肝疫苗低/无应答水平的关联性

目的探讨WTAP基因DNA甲基化与广西汉族儿童乙肝疫苗(HepB)应答水平的关联性,以期了解其他可能影响乙肝疫苗应答水平的遗传因素,为新型HepB的研发提供新的科学依据。方法选取在2016年1月至12月间至广西3家医院就诊的8~9月龄且全程接种HepB的263名汉族儿童作为研究对象。对研究对象进行乙肝两对半检测,根据排除和纳入标准筛选符合要求的研究对象纳入本次研究。根据乙肝表面抗体浓度(抗-HBs)将研究对象分成无应答(<10 mIU/mL)、低应答(10 mIU/mL≤抗-HBs<100 mIU/mL)、正常应答(100 mIU/mL≤抗-HBs<1000 mIU/mL)和高应答(≥1000 mIU/mL)组,使用非匹配病例对照研究的方法,将抗-HBs<100 mIU/mL作为无/低应答组,≥100 mIU/mL作为正常/高应答组。采用Panel多重PCR技术、重亚硫酸盐转化技术和通过illumina平台进行高通量测序技术,分析研究WTAP基因38个CpG位点DNA甲基化与HepB免疫应答水平的关系。结果经Mann-Whitney U检验比较无/低应答组和正常/高应答组WTAP基因的DNA甲基化水平后发现,无/低应答组WTAP_2基因43位点DNA甲基化水平低于正常/高应答组DNA甲基化水平(P<0.05)。非条件Logistics回归分析结果显示,WTAP_2基因的43位点DNA甲基化水平和HepB应答水平存在关联性(OR=0.73,95%CI:0.538~0.995),43位点DNA低甲基化水平降低了HepB低/无应答的风险。结论WTAP_2基因的43位点的DNA低甲基化水平可能是广西汉族儿童HepB免疫低/无应答水平的保护因素,可为提高HepB低/无应答人群提高疫苗应答水平提供理论性参考依据。

儿童IL6、IL12A/B、IL13基因DNA甲基化与乙型肝炎疫苗低应答水平的关联性

目的本研究旨在探讨广西壮族自治区汉族儿童白细胞介素6(interleukin 6, IL6)、白细胞介素12A/B(interleukin 12A/B, IL 12A/B)、白细胞介素13(interleukin 13, IL13)基因胞嘧啶-磷酸-鸟苷酸(cytosine-phosphoric-guanylic, CpG)位点DNA甲基化与乙型肝炎疫苗(hepatitis B vaccine, HepB)免疫应答水平的相关性。方法运用非匹配病例对照方法,把来自广西壮族自治区3家医院263名8~9月龄并已接种HepB的汉族儿童作为研究对象,按抗-HBs水平将<100 mIU/ml儿童作为病例组,≥100 mIU/ml儿童作为对照组。采用多重PCR技术、重亚硫酸盐测序和高通量测序等技术,分析研究IL6、IL12A/B和IL13基因85个位点DNA甲基化情况与HepB免疫应答水平的关系。结果病例组IL6基因117位点、IL12B基因103位点和IL13;基因167位点甲基化水平均高于对照组,IL12A基因85位点病例组甲基化水平低于对照组(均有P<0.05);非条件Logistic回归分析模型分析显示IL6基因117位点和IL13;基因167位点增加了HepB低应答的风险(OR=1.07, 95%CI:1.02~1.13;OR=1.04, 95%CI:1.00~1.07)。结论提示IL6基因117位点和IL13;基因167位点DNA甲基化修饰可能是广西壮族自治区汉族儿童HepB免疫反应低应答的危险因素。