基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探究白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症损伤的影响

目的探讨白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠炎症损伤及TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响。方法实验分为对照组(Control)、模型组(Model)、白芍总苷组(TGP)、TLR4抑制剂组(TLR4 inhibitor)和TGP+TLR4激动剂组(TGP+TLR4 agonist),每组各10只。除Control组外,其余各组大鼠采用皮下注射甲状腺球蛋白与弗氏佐剂诱导AIT大鼠模型。给药6周后,苏木精-伊红(HE)染色观察甲状腺组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平;RT-qPCR和Western blot检测甲状腺组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达。结果与Control组相比,Model组大鼠甲状腺滤泡上皮明显受损,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平升高(P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。与Model组相比,TGP组、TLR4 inhibitor组大鼠甲状腺滤泡上皮损伤减轻,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平降低(P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与TGP组相比,TGP+TLR4 agonist组大鼠甲状腺滤泡上皮损伤加重,TPOAb、TgAb、TSH、T3、T4、TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-18水平升高(P<0.05或P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路mRNA和蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论TGP通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,改善甲状腺组织炎症损伤发挥甲状腺保护作用。

高良姜素调节CCL2/CCR2信号轴对自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症反应的影响

目的:探讨高良姜素调节趋化因子配体2(CCL2)/趋化因子受体2(CCR2)通路对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠炎症反应的影响。方法:84只大鼠随机分为对照组、模型组、高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组、高良姜素高剂量+大鼠CCL2重组蛋白(rCCL2)组,每组12只。除对照组外,其他组大鼠均构建AIT模型,造模成功后给药,1次/d,持续8周。ELISA检测大鼠血清中甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平及甲状腺组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平;HE染色检测大鼠甲状腺组织病理变化并对甲状腺组织进行炎症评分;qRT-PCR检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2 mRNA表达;Western blot检测大鼠甲状腺组织CCL2、CCR2蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠甲状腺组织病理损伤严重,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,高良姜素低剂量组、高良姜素中剂量组、高良姜素高剂量组、硒酵母片组大鼠甲状腺组织病理损伤减轻,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与高良姜素高剂量组比较,高良姜素高剂量+rCCL2组大鼠甲状腺组织病理损伤加剧,炎症评分、TGAb、TPOAb、FT4、FT3、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、CCL2、CCR2 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。结论:高良姜素可能通过抑制CCL2/CCR2信号通路抑制AIT大鼠炎症反应。

Periostin、Notch1、维生素D与自身免疫性甲状腺炎淋巴细胞浸润程度、Treg/Th17的相关性研究

目的探讨骨外膜素(Periostin)、Notch跨膜受体-1(Notch1)m RNA、维生素D(VitD)与自身免疫性甲状腺炎(AIT)淋巴细胞浸润程度、调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)的相关性。方法选取2021年7月至2023年12月郑州大学第一附属医院收治的92例AIT患者纳入AIT组,另选取同期50例无甲状腺疾病的健康人群纳入对照组。比较两组受检者的淋巴细胞浸润程度及抗体水平,采用Spearman、Pearson相关系数分析淋巴细胞浸润程度、Treg/Th17与甲状腺功能、抗体水平的相关性,比较两组受检者的Periostin、Notch1 m RNA、VitD及Treg/Th17,采用Pearson相关系数分析Periostin、Notch1 mRNA、VitD与淋巴细胞浸润程度及Treg/Th17的相关性。结果AIT组患者的CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)、TgAb、TPOAb、TRAb水平及甲亢/亚临床甲亢、甲减/亚临床甲减患者占比明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关系数分析结果显示,CD3^(+)(r=0.579、0.602、0.563)、CD3^(+)CD4^(+)(r=0.612、0.637、0.606)、CD~4+CD25^(+)CD127^(-)(r=0.655、0.643、0.687)与TgAb、TPOAb、TRAb呈正相关(P<0.05);AIT组患者的Periostin、Notch1 m RNA分别为(4.27±1.40)μg/L、1.73±0.56,明显高于对照组的(2.86±0.49)μg/L、1.02±0.14,VitD、Treg/Th17分别为(17.82±5.09)ng/mL、2.82±0.97,明显低于对照组的(22.30±3.76)ng/mL、12.36±2.03,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关系数分析结果显示,Periostin(r=0.792、0.811、0.737)、Notch1 mRNA(r=0.812、0.775、0.792)与CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25+CD127-呈正相关(P<0.05),VitD(r=-0.687、-0.753、-0.799)与之呈负相关(P<0.05),且Periostin(r=-0.823)、Notch1 m RNA(r=-0.772)与Treg/Th17呈负相关(P<0.05),VitD(r=0.745)与之呈正相关(P<0.05)。结论Periostin、Notch1 mRNA在AIT患者血清中表达上调,VitD表达下调,各指标与AIT淋巴细胞浸润程度及Treg/Th17均具有一定相关性,可为临床判断病情提供参考,并对后续临床治疗具有一定指导价值。

自身免疫性甲状腺炎合并不孕症中医证候分布规律及临床特征研究

目的探讨自身免疫性甲状腺炎(AIT)合并不孕症患者的中医证候分布规律和临床特征。方法参照育龄期妇女AIT不孕症中医证候分布规律相关文献,制定《AIT合并不孕症患者中医证候调查表》。回顾性分析2019年6月-2020年12月在中国科学技术大学附属第一医院生殖中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的256例AIT合并不孕症患者,对其基本信息、中医证候、基础促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)等资料进行采集。利用频数分析、系统聚类分析方法,归纳AIT合并不孕症患者的中医证候分布规律。结果AIT患者常见的5个证候要素分别为气虚、肝郁、脾虚、肾虚和血瘀,多见复合证候。系统聚类分析得到的主要中医证候分别为气虚肝郁证(69例,26.9%)、脾肾两虚证(45例,17.6%)、脾气虚证(38例,14.8%)、气虚血瘀证(36例,14.1%)、肾虚肝郁证(32例,12.5%)和其他证(36例,14.1%)。基础TSH水平在气虚肝郁证、脾气虚证、气虚血瘀证中均高于其余各证候,差异有统计学意义(P<0.05)。不同证候患者TPO-Ab、TG-Ab滴度差异无统计学意义(P>0.05)。结论AIT合并不孕症患者主要中医证候为气虚肝郁证、脾肾两虚证、脾气虚证、气虚血瘀证、肾虚肝郁证、其他证,证候要素以气虚为主,病位涉及脾、肾、肝三脏,瘀血为主要的病理产物。针对有气虚表现的本病患者有必要关注其甲状腺功能。

刘铜华教授治疗自身免疫性甲状腺炎用药经验

自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)是一种自身免疫性疾病,包括桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)、弥漫性毒性甲状腺肿(Toxic diffuse goiter)等,以桥本甲状腺炎者居多。刘铜华教授认为情志内伤及先天禀赋不足是AIT发病的关键因素,肝郁气滞火热是本病的关键病机,在临床治疗中重视疏肝理气类和清热泻火解毒类药物的使用,重视“火”类病机,重视“虚实”辨证以及心理疏导,常以自拟的甲炎康泰方为底方,辨证加减论治。本文就刘铜华教授应用甲炎康泰方化裁治疗AIT的临床经验和体会进行论述,以期指导AIT的中医治疗。

丁彩飞辨治多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎经验

[目的]总结浙江省名中医丁彩飞教授治疗多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎的经验。[方法]通过门诊跟师,系统收集丁教授治疗多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎的医案,总结分析丁教授治疗多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎的病因病机、辨治思路、用药特色,并附一验案佐证。[结果]丁教授提出,“痰”邪是多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎的病机关键,重视“肝、脾、肾”三脏的功能恢复,疾病可分为脾虚肝郁、痰瘀互结、肝肾亏虚三类证型,治疗上提倡“健脾化痰,疏肝理气,补肾活血”,配合中医外治、情绪调摄等,以获良效。所选验案,丁教授辨为痰瘀互结、脾虚湿盛证,治以健脾化湿、活血化瘀,以五苓散化裁治疗,取得较好疗效,促甲状腺素恢复正常水平,月经按时来潮。[结论]丁教授根据多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎的病理特点和临床特征,贯通中西,内服外治,以获得调经种子,改善内分泌代谢状态的治疗效果,为中西医结合治疗多囊卵巢综合征合并自身免疫性甲状腺炎提供了参考。

基于“脾为之卫”探讨肠道菌群对自身免疫性甲状腺炎的作用机制

“脾为之卫”指脾具有保护身体,抵御邪气的功能。“脾失之卫”则致气滞痰凝血瘀凝结于颈前而发为自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT),其发病机制与肠道菌群存在联系。“脾失之卫”则肠道菌群紊乱,脾运化和保护的功能受损。肠道菌群紊乱可能影响自身免疫性甲状腺炎的治疗和预后。肠道菌群可能是治疗AIT的主要作用靶点,以恢复肠道菌群为重点治疗AIT,为临床治疗提供新思路。

维生素D2联合甲巯咪唑治疗自身免疫性甲状腺炎的效果及对干扰素-γ、白细胞介素-17、转换生长因子-β水平的影响

目的分析维生素D2与甲巯咪唑联合治疗对自身免疫性甲状腺炎患者的临床治疗效果及血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17(IL-17)、转换生长因子-β(TGF-β)水平的影响,为提升该疾病的临床治疗效果提供参考依据。方法按随机数字表法将2022年1月至2023年1月宁夏医科大学总医院收治的60例自身免疫性甲状腺炎患者分为对照组(30例)和试验组(30例)。给予对照组患者甲巯咪唑治疗,试验组患者在对照组的基础上加用维生素D2注射液进行治疗。两组患者均治疗3个月。比较两组患者临床疗效,治疗前后血清IFN-γ、IL-17、TGF-β水平及甲状腺功能、免疫功能指标的变化情况。结果治疗后,试验组患者的总有效率高于对照组;两组患者治疗后血清IL-17、IFN-γ指标较治疗前均降低,且试验组各项指标更低,血清TGF-β指标均上升,且试验组更高;治疗后两组患者抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)及CD8^(+)百分比均降低,且试验组较对照组更低,CD4^(+)百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值均升高,且试验组较对照组更高(均P<0.05)。结论甲巯咪唑联合维生素D2治疗自身免疫性甲状腺炎不仅能改善患者血清因子,抑制炎症反应、提高免疫力,而且能够有效改善其甲状腺功能,临床治疗效果较为显著。

基于“阳化气,阴成形”理论探析自身免疫性甲状腺炎中医病机与治疗思路

自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)是进行性自身免疫性疾病,是最常见的自身免疫性甲状腺疾病,中医学称之为瘿病。重点阐述“阳化气,阴成形”理论内涵,“阳化气,阴成形”是气化的两个过程,有形与无形之间的相互转换,概括了人体阳气和阴精的主要功能。探析AIT中医病机,阳化气不足、阴成形太过为基本病机,脾虚血瘀痰凝气滞为主要病机,阳化气不足为其发病之基,阴成形太过为其病变之标,阴阳失和,浊毒内结为其病变之果,“阴平阳秘,精神乃治,阴阳离决,精气乃绝”,临证治疗应以阴阳为本,从脾论治,以虚则补之,滞则行之,痰则散之,瘀则化之为原则,温阳化气,散结消阴,健脾益气以温阳,辨证祛邪以消阴,解毒散结以防变,同时还应顾护胃气。

中药成分治疗自身免疫性甲状腺炎相关信号通路研究进展

自身免疫性甲状腺炎(AIT)是常见的自身免疫性疾病之一,组织损伤以T淋巴细胞浸润导致甲状腺细胞凋亡和甲状腺功能减退为主,T淋巴细胞通常经细胞间相互作用或通过炎症细胞因子间接表达。而细胞的自噬过度活化和相关信号通路的异常调节常参与此过程,激发炎症级联反应。近年研究发现中药成分可以调控相关信号通路,抑制炎症因子的表达,发挥多靶点、多通路间的相互协同作用。该文通过查阅相关文献,介绍NLRP3-ACSCaspase-1、TLR4/NF-κB、Notch、PI3K/AKT/mTOR相关信号通路的作用机制,以及黄酮类、酚类、萜类、皂苷类等多种中药成分在上述通路中抑制炎症反应的作用,为AIT的治疗提供新思路与新靶点,以减少AIT及其并发症的发病率。

不同剂量地塞米松联合甲巯咪唑对自身免疫性甲状腺炎患者的影响

目的:探究不同剂量地塞米松与甲巯咪唑对自身免疫性甲状腺炎患者的影响。方法:选择2019年2月—2022年2月通城县人民医院收治的70例自身免疫性甲状腺炎患者作为研究对象,利用随机数表法将患者分为对照组和研究组,各35例。两组均给予甲巯咪唑治疗,在此基础上,对照组给予大剂量地塞米松治疗,研究组给予小剂量地塞米松治疗。比较两组疗效、炎症因子、甲状腺功能相关抗体水平、免疫功能及药物不良反应发生率。结果:两组临床总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组炎症因子水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);而两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组T淋巴细胞亚群水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均高于治疗前,CD8^(+)低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);但两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组甲状腺功能相关抗体水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组甲状腺功能相关抗体水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);但两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组不良反应总发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小剂量地塞米松联合甲巯咪唑可以有效地减轻自身免疫性甲状腺炎患者的炎症因子水平和甲状腺功能相关抗体水平,调节患者的免疫功能,且安全性更高。

补中益气颗粒对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠小肠肠黏膜超微结构的影响

目的通过观察补中益气颗粒对实验性自身免疫性甲状腺炎(Experimental autoimmune thyroiditis,EAT)模型大鼠小肠肠黏膜超微结构的影响,探讨其改善桥本氏甲状腺炎的作用机制。方法36只Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为4组,分别为空白组、模型组、补中益气组、硒酵母组4组。除空白组外,其余组大鼠采用高碘喂养法,联合猪免疫球蛋白和弗氏佐剂混合免疫注射法建立EAT大鼠模型。造模后,补中益气组和硒酵母组大鼠分别灌胃补中益气颗粒和硒酵母片。56 d后检测各组大鼠甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(Thyro⁃globulin antibody,TGAb)、血清连蛋白(Zonulin)含量,分离大鼠甲状腺与小肠,在光镜(Light microscope,LM)下观察空白组与模型组甲状腺组织病理变化、各组大鼠小肠组织病理变化,在透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)下观察大鼠小肠肠黏膜上皮细胞(Intestinal mucosal epithelial cells,IPC)超微结构变化。结果与空白组比较,模型组血清TPOAb、TGAb、Zonulin含量明显上调(P<0.05)。与模型组比较,补中益气组、硒酵母组血清TPOAb、TGAb、Zonulin含量明显下降(P<0.05)。与空白组比较,LM下模型组大鼠甲状腺组织中有大量淋巴细胞浸润,甲状腺滤泡萎缩、消失,上皮细胞嗜酸性变,小叶间隔增宽,间质纤维化,提示造模成功。EAT大鼠肠绒毛结构紊乱,上皮细胞脱落,固有层裸露,杯状细胞减少,炎性细胞浸润,TEM下IPC微绒毛变短而厚,细胞间隙扩大,紧密连接受损,线粒体肿胀、嵴断裂、基质变淡,细胞器超微结构明显受损。与模型组比较,补中益气组肠绒毛、细胞间紧密连接、细胞器结构受损减轻。结论补中益气汤可以减轻EAT大鼠小肠肠黏膜超微结构损害。

日本血吸虫源多肽SJMHE1通过调节脾脏IFN-γ和IL-10的分泌抑制小鼠自身免疫性甲状腺炎

目的:探讨日本血吸虫源多肽SJMHE1对小鼠自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的干预作用及其分子机制。方法:将15只6~8周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、AIT模型组和AIT+SJMHE1组,每组5只。对照组小鼠未经任何处理;采用高碘水喂食和皮下多点注射猪甲状腺球蛋白法构建AIT小鼠模型(AIT模型组),并施加SJMHE1干预(AIT+SJMHE1组)。造模28 d后,苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠甲状腺病理变化;化学发光法检测血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平;实时荧光定量PCR检测各组小鼠甲状腺及脾脏组织中IFN-γ和IL-10 mRNA的表达水平;ELISA检测血清中IFN-γ和IL-10含量。另选取未经任何处理的10只雌性C57BL/6小鼠,随机分为实验组和对照组,每组5只;实验组小鼠皮下输注FITC标记的SJMHE1(FITC-SJMHE1),对照组注射等量PBS,用流式细胞技术检测FITC-SJMHE1在甲状腺及脾脏组织中的分布。结果:SJMHE1可减轻AIT小鼠甲状腺组织炎症细胞浸润及滤泡结构破坏,且显著降低血清TgAb水平(P<0.01);此外,SJMHE1显著降低AIT小鼠甲状腺组织和脾脏组织中IFN-γmRNA的表达,而上调IL-10 mRNA的相对表达量(P均<0.05);且血清中IFN-γ和IL-10含量的改变趋势与mRNA一致(P<0.01和P<0.05)。流式细胞技术结果显示FITC-SJMHE1分布于小鼠脾脏组织。结论:SJMHE1可显著抑制AIT小鼠甲状腺炎症反应,其机制可能与其对脾脏IFN-γ和IL-10的调节有关。

Notch1信号通路通过调控Th17细胞参与实验性自身免疫性甲状腺炎的发生和发展

目的探讨Notch1信号通路是否通过调控辅助性T细胞17(Th17)参与实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的发生和发展。方法将24只小鼠随机平均分为NC组、EAT-A组(给予猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射)、EAT-B组(猪甲状腺免疫球蛋白多点皮下注射前给予γ分泌酶抑制剂腹腔注射)。HE染色观察甲状腺内淋巴细胞浸润程度;流式细胞术检测小鼠脾脏单核细胞(SMC)悬液中Th17细胞比例;ELISA法检测血清甲状腺球蛋白(TgAb)滴度和SMC培养上清白细胞介素-17A(IL-17A)浓度;实时PCR分析脾细胞中Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达水平;Western blotting检测脾脏组织中IL-17A蛋白表达水平。结果EAT-A组和EAT-B组小鼠甲状腺中有不同程度淋巴细胞浸润,与NC组相比血清TgAb滴度显著升高(P<0.01)。EAT-A组和EAT-B组小鼠Notch1、Hes1、RORγt和IL-17A mRNA表达,以及SMC中Th17细胞比例、IL-17A浓度、IL-17A蛋白表达水平均高于NC组(均P<0.01)。EAT-B组上述指标显著低于EAT-A组(均P<0.01)。EAT-A组小鼠SMC中Th17细胞比例与血清TgAb滴度、脾脏Notch1 mRNA及IL-17A蛋白表达水平均呈正相关。结论EAT小鼠中Notch1信号通路的表达上调,阻断此信号通路后小鼠甲状腺炎症程度减轻,同时伴有Th17细胞比例明显降低,提示Notch1信号通路可能通过调控Th17细胞参与EAT的发生和发展。

补中益气汤对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠免疫失衡的调节及作用机制研究

目的基于TGF-β/Smad信号通路探讨补中益气汤调节实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠模型免疫失衡的作用。方法雌性SD大鼠40只,随机选取10只为空白组,其余大鼠使用高碘饮水联合弗氏佐剂与猪甲状腺球蛋白(pTG)免疫注射建立EAT大鼠模型,成模后随机分为模型组、硒酵母组、补中益气组3组,每组10只,连续灌胃2个月。检测大鼠血清抗甲状腺抗体,观察甲状腺组织病理切片,并通过流式细胞术检测脾脏Th17、Treg比例,RT-PCR和Western blot检测TGF-β/Smad信号通路的相关基因和蛋白表达。结果与空白组比较,模型组甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平升高(P<0.05),光镜下模型组甲状腺组织部分滤泡破坏,可见大量淋巴细胞浸润,说明造模成功。且与空白组比较,模型组Smad2、Smad3、Foxp3 mRNA低表达(P<0.05),Foxp3蛋白低表达(P<0.05),同时Th17%升高(P<0.05)。干预后,与模型组比较,硒酵母组与补中益气组TPOAb与TGAb水平下降(P<0.05),且2组甲状腺组织病理损伤均有不同程度改善。与模型组比较,补中益气组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA高表达,且Smad4蛋白、Foxp3蛋白高表达,Treg%升高(P<0.05)。与硒酵母组比较,补中益气组TGF-β1、Smad2、Smad3、Foxp3 mRNA和Smad4蛋白亦呈现高表达状态,Treg%升高(P<0.05)。与模型组比较,硒酵母组和补中益气组Th17%差异无统计学意义(P>0.05)。结论补中益气汤能够显著改善EAT大鼠的自身免疫性甲状腺炎,其作用机制可能与调节TGF-β/Smad通路,增加Foxp3表达,进而调节Th17/Treg失衡有关。

白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠的免疫调节作用

目的探讨白芍总苷对自身免疫性甲状腺炎大鼠SOCS1及JAK/STAT信号通路的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组、模型组、西药组和白芍总苷低、中、高剂量组,建立自身免疫性甲状腺炎模型,药物治疗8周,取大鼠血清及甲状腺组织,镜下观察各组大鼠甲状腺病理改变,ELISA法检测大鼠血清TGAb、TPOAb水平,Western blot及RT-qPCR法检测大鼠甲状腺组织SOCS1及JAK1、JAK2、STAT3、STAT5蛋白和mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清TGAb、TPOAb水平升高(P<0.05),甲状腺组织SOCS1蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),JAK1、JAK2、STAT3、STAT5蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,西药组和白芍总苷各剂量组大鼠血清TGAb、TPOAb水平降低(P<0.05),甲状腺组织SOCS1蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),JAK1、JAK2、STAT3、STAT5蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)。结论白芍总苷可调节自身免疫性甲状腺炎大鼠SOCS1表达,调控JAK/STAT信号通路,减轻大鼠炎症反应,降低大鼠血清TGAb、TPOAb水平,发挥免疫调节作用。

连翘提取物对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺损伤的影响

目的:探讨连翘提取物(FSE)对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)的影响及其可能的作用机制。方法:将90只SD大鼠分为对照组、模型组、FSE 25 mg/kg组、FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组和硒酵母片组(Selenious组,300μg/kg),除对照组外,其余各组大鼠均采取皮下注射含猪甲状腺球蛋白的不完全弗氏佐剂制备EAT模型,末次注射完成后FSE25 mg/kg组、FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组分别给予25、50、100 mg/kg FSE灌胃,Selenious组灌胃300μg/kg硒酵母片,模型组和对照组灌胃等体积生理盐水,连续灌胃2周。HE染色观察甲状腺病理学变化,放射免疫法测定甲状腺功能血清学指标,qRT-PCR检测甲状腺组织炎症相关因子的mRNA水平,ELISA检测血清氧化应激指标,Western blot检测NLRP3/Caspase-1通路蛋白表达情况。结果:对照组甲状腺泡呈椭圆形或圆形,甲状腺组织无淋巴浸润现象,模型组甲状腺泡萎缩、损伤,且伴有上皮增生和间质淋巴浸润现象,FSE(50、100 mg/kg)组、Selenious组甲状腺泡损伤、生皮质增生和炎症细胞浸润改善明显。模型组血清TgAb、TPOAb、TSH、T3、T4、蛋白质羰基、8-OHdG和MDA水平均明显高于对照组(P<0.05),甲状腺组织IL-17、IFN-γmRNA水平和NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1/Pro-Caspase-1及cleaved-IL-1β/Pro-IL-1β蛋白表达均高于对照组(P<0.05),而甲状腺组织中IL-4和IL-10 mRNA水平均低于对照组(P<0.05)。FSE 50 mg/kg组、FSE 100 mg/kg组和Selenious组血清TgAb、TPOAb、TSH、T3、T4、蛋白质羰基、8-OHdG及MDA水平均明显低于模型组(P<0.05),甲状腺组织中IL-17、IFN-γmRNA水平和NLRP3、ASC、cleavedCaspase-1/Pro-Caspase-1及cleaved-IL-1β/Pro-IL-1β蛋白表达均低于模型组(P<0.05),而甲状腺组织中IL-4和IL-10 mRNA水平均高于模型组(P<0.05)。结论:FSE可改善EAT大鼠甲状腺损伤,可能与调节NLRP3炎症小体和免疫失调有关。

基于Akt/mTOR通路观察补中益气颗粒对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的保护作用

目的:基于蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶向基因(mTOR)信号通路研究补中益气颗粒对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠的保护作用机制。方法:取30只SPF级SD雌性大鼠采用猪甲状腺球蛋白(pTg)和完全弗氏佐剂(CFA)混合免疫注射联合高碘喂养法制备EAT大鼠模型,并随机分为模型组、低剂量组(低剂量补中益气颗粒组)和高剂量组(高剂量补中益气颗粒组),另取10只大鼠相同部位注射等体积PBS溶液及普通动物饮用水喂养作为空白组。低剂量组和高剂量组分别按0.80、0.94g/kg的剂量灌胃补中益气汤,其余两组给予等体积的双蒸水,造模结束后,以血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和促甲状腺激素(TSH)水平进行模型评价。药物治疗结束当天,酶联免疫吸附检测(ELISA)法检测大鼠血清甲状腺功能指标和抗体水平;观察甲状腺组织病理形态和滤泡上皮细胞的自噬情况;免疫组化观察甲状腺组织中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达水平;Western blot检测Akt/mTOR通路蛋白表达。结果:造模组大鼠造模完成后的血清TPOAb、TGAb、TSH水平明显高于空白组(P<0.05),提示造模成功。模型组大鼠治疗后的血清TPOAb、TGAb、TSH、FT3、FT4、T3、T4水平、甲状腺组织IFN-γ、Caspase-3、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平、IFN-γ/IL-4值较空白组明显增加,甲状腺滤泡上皮细胞自噬小体数量明显减少(P<0.05);与模型组比较,低剂量组和高剂量组大鼠血清TPOAb、TGAb、TSH、FT3、FT4、T3、T4水平、甲状腺组织IFN-γ、Caspase-3、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平、IFN-γ/IL-4值明显下降,甲状腺滤泡上皮细胞自噬小体数量明显增加(P<0.05);四组大鼠甲状腺组织中IL-4、Akt、mTOR表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补中益气颗粒对EAT大鼠起到保护作用,可改善其甲状腺功能和自身抗体水平,恢复甲状腺组织病理形态,降低甲状腺组织中IFN-γ/IL-4值和Caspase-3表达水平,其机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路的活化有关。

高天舒从“脾藏意”论治自身免疫性甲状腺炎相关认知功能障碍

总结高天舒教授基于《黄帝内经》“脾藏意”理论,以脾为切入点,从脾论治自身免疫性甲状腺炎伴认知功能障碍的临床经验。提出脾虚痰瘀为自身免疫性甲状腺炎相关疾病的根本病机,治疗当以健脾化痰活血化瘀为主。临床应用自拟方“健脾化痰活血方”加减治疗疾病且取得了较好疗效,在缓解临床症状、降低抗体、减轻认知功能障碍等方面都独有特色,为自身免疫性甲状腺炎伴认知功能障碍的中医临床防治提供了新的指导思想。

自身免疫性甲状腺炎的六经辨证分布规律研究

目的探究自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)患者的六经辨证分布规律。方法采用回顾性研究,记录150例AIT患者临床信息,并将其填入《AIT六经症状采集表》中,进行六经辨证分型处理,利用SPSS26.0软件进行统计分析,获得AIT的六经辨证分布规律。结果①共得出10种六经病证分型,其中单经6种,二经合病4种,以少阳经、太阴经、阳明经为主,分布占57.3%、10.0%、7.3%。②AIT不同甲功类型与六经病证分布有统计学意义(P<0.01),AIT甲亢期以阳明经为主,占50%,AIT甲功正常期以少阳经为主,占83.5%,AIT甲减期以太阴经为主,占30.3%。③AIT患者年龄与六经病证分布无统计学意义(P>0.05)。④AIT患者病程与六经病证分布有统计学意义(P<0.01),病程<3年者以少阳经为主,占69.1%;病程3-6年者以太阴经为主,占30.3%;病程6-10年者以太阴经为主,占28.6%。结论AIT六经病证分布特点受甲功类型、病程等诸多因素影响,对于AIT甲亢期患者可从阳明经论治、AIT甲功正常期可从少阳经论治、AIT甲减期可从太阴经论治,突出AIT六经辨证治疗的必要性,为临床诊治提供客观的理论依据。