上海交通大学基础医学院、上海市免疫学研究所邹强团队等揭示乳酸介导CTLA-4的RNA剪接以维持Treg细胞免疫抑制功能的机制

2024年2月27日,上海交通大学基础医学院、上海市免疫学研究所邹强研究团队等在Immunity杂志在线发表了题为Lactate modulates RNA splicing to promote CTLA-4 expression in tumor-infiltrating regulatory T cells的研究论文。该研究发现代谢产物乳酸通过促进肿瘤浸润Treg细胞中CTLA-4的RNA剪接及其表达从而维持Treg细胞免疫抑制功能的作用机制,阐述了乳酸-Foxp3-USP39-CTLA-4信号轴介导肿瘤浸润Treg细胞高表达CTLA-4的分子机制,为肿瘤免疫治疗提供了新方向。

利用Luciferase修饰的T细胞检测间充质干细胞免疫抑制功能方法的建立与评价

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞。广泛存在于骨髓、脐带、胎盘、脂肪等组织中,具有向炎症部位募集、多向分化、自我更新以及释放可溶性生物因子和分泌多种旁分泌因子的特点,这些特性使得MSCs能够在组织内修复受损细胞、减轻炎症反应、调节免疫的过程中发挥着重要作用^([1]),目前应用于改善急性呼吸窘迫综合征(ARDS)^([2-3])、移植物抗宿主病(GVHD)^([4])等。

雷那度胺对骨髓间充质干细胞生物学特性及免疫抑制功能的影响

目的探讨雷那度胺对骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学功能和免疫抑制功能的影响。方法将雷那度胺(10μmol/L)加入MSCs中培养,收集细胞检测雷那度胺处理前后MSCs的增殖能力、免疫表型及其对T细胞增殖抑制作用的变化。CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测MSCs的增殖周期、免疫表型及其对CD3+T细胞的增殖抑制能力。结果雷那度胺干预不影响MSCs的生长速度、增殖周期和免疫抑制功能;与干预前比较,雷那度胺干预后的MSCs免疫标记有所不同:CD29、CD73的平均荧光强度增高,CD44的平均荧光强度减弱。结论雷那度胺在体外实验中能够影响MSCs表面分子的表达,这可能有助于其在不影响MSCs的生长、增殖和免疫抑制功能的情况下,有效发挥抗肿瘤作用。

地塞米松损害间充质干细胞的免疫抑制功能

本研究探讨地塞米松用于脐带源间充质干细胞(MSC)体外扩增过程中对MSC免疫抑制功能的影响。采用BrdU方法检测地塞米松对MSC培养增殖的影响;MSC经过14 d低浓度地塞米松的培养刺激后,用流式细胞术检测其表面标记物;与外周血单个核细胞共培养后,检测外周血单个核细胞的激活增殖情况。结果表明,经过14 d低浓度地塞米松(10 nmol/L)的培养刺激,在MSC特征性细胞表型上实验组和对照组没有明显的差异;但是,在相同的MSC数情况下,经过地塞米松培养的MSC抑制淋巴细胞活化的程度与对照组相比显著地降低。地塞米松预处理的MSC经过干扰素-γ培养12 h后,MSC的免疫调节能力得到一定程度的恢复。结论:地塞米松损害MSC的免疫抑制功能,干扰素-γ能一定程度对抗或逆转地塞米松对MSC免疫抑制功能的损害。因此,在研究MSC的免疫调节能力时,培养液中应该注意或者尽量不使用地塞米松,以避免地塞米松对免疫相关研究结果的影响。

王青青、来利华、丁克峰合作成果揭示乳酸化调控RNA m^(6)A修饰促进肿瘤浸润髓系细胞的免疫抑制功能

2022年3月22日,浙江大学基础医学院/良渚实验室王青青教授团队、来利华副教授团队与浙江大学医学院附属第二医院丁克峰教授团队合作在《分子·细胞》(Molecular Cell)发表研究论文“Lactylation-driven METTL3-mediated RNA m^(6)A modification promotes immunosuppression of tumor-infiltrating myeloid cells”(DOI:10.1016/j.molcel.2022.02.033),揭示肿瘤微环境积累的乳酸以蛋白乳酸化修饰的形式,调控RNA甲基转移酶METTL3介导的肿瘤浸润髓系细胞(TIM)的N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A)修饰,促进TIM的免疫抑制功能,介导肿瘤免疫逃逸。

浙大团队揭示乳酸化调控RNA m6A修饰促进肿瘤浸润髓系细胞的免疫抑制功能

北京时间2022年3月22日,浙江大学医学院免疫学研究所王青青教授、来利华副教授与浙大医学院附属二院丁克峰教授团队合作在《分子细胞》(Molecular Cell)在线发表论文——“Lactylation-driven METTL3-mediated RNA m6A modification promotes immunosuppression of tumor-infiltrating myeloid cells”。该研究揭示,肿瘤微环境中积累的乳酸,以蛋白乳酸化修饰(lactylation)的形式调控RNA甲基转移酶METTL3介导的肿瘤浸润髓系细胞(tumor-infiltrating myeloid cells,TIMs)的N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰,促进TIMs的免疫抑制功能,介导肿瘤的免疫逃逸。作者首先利用结肠癌患者的组织样本分析发现,METTL3在TIMs中的表达上调,与不良预后相关。与Mettl3fl/fl (WT)小鼠比较,髓系缺失METTL3 (LysM-cre;M ettl3fl/fl,KO)的小鼠肿瘤生长明显受抑,用METTL3特异性小分子抑制剂STM2457处理髓系细胞,会削弱其促进肿瘤的能力。RNA-seq分析提示JAK-STAT可能是METLL3调控的下游通路,TIMs的JAK-STAT通路活化在其促肿瘤活性中具有枢纽性作用。随后利用m6A甲基化免疫共沉淀测序分析,证实TIMs中Jak1的mRNA上m6A修饰增加,以m6A-YTHDF1依赖形式提高其在多聚核糖体的翻译效率。JAK1促进转录因子STAT3的磷酸化,启动STAT3下游免疫抑制效应分子IL-6,IL-10,iNOS等表达。

日本血吸虫热休克蛋白60通过诱导CD4^+CD25^+Treg细胞表达IL-10和TGF-β增强其免疫抑制功能

目的探讨日本血吸虫热休克蛋白60(Sj HSP60)增强小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)免疫抑制功能的可能机制。方法采用体外研究探索Sj HSP60对Treg细胞功能的影响,通过体外细胞增殖实验检测Sj HSP60促进Treg细胞免疫抑制功能增强的途径,利用流式细胞术检测Treg细胞表达IL-10和TGF-β的水平以及Treg细胞Foxp3和CTLA-4表达水平。结果体外实验证实,Sj HSP60可增强Treg细胞的免疫抑制功能(t=6.466,P=0.006);体外细胞增殖实验表明,Sj HSP60刺激后的Treg细胞可通过分泌可溶性细胞因子IL-10(t=7.363,P=0.002)和TGF-β(t=11.262,P=0)发挥免疫抑制功能;流式细胞术检测显示,Sj HSP60刺激后的Treg细胞IL-10(t=12.367,P=0)、TGF-β(t=8.431,P=0.001)、Foxp3(比例:t=5.225,P=0.006;平均荧光强度:t=8.319,P=0.001)和CTLA-4(比例:t=3.518,P=0.024;平均荧光强度:t=4.164,P=0.014)表达水平显著增加。结论 Sj HSP60可通过促进Treg细胞表达IL-10和TGF-β增强其免疫抑制功能,并可能与Sj HSP60诱导Treg细胞表达Foxp3和CTLA-4有关。

FTY720在同种肝细胞移植大鼠中的免疫抑制作用

FTY720是一种新合成的免疫抑制剂．由冬虫夏草提取物中的ISP-1经结构修饰而成，具有突出的免疫抑制功能。本实验旨在评价FTY720在大鼠肝细胞移植治疗大鼠肝功能衰竭时的免疫抑制作用及对预后的影响。

髓源性抑制细胞对肿瘤的免疫抑制及靶向免疫治疗研究进展

髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是一群未成熟的高度异质性细胞群,具有强大的免疫抑制功能,因此被认为是促进肿瘤发生发展的主要因素之一。在小鼠和人类中的研究表明,MDSCs在大多数肿瘤环境中积聚,通过抑制抗肿瘤免疫应答,进而促进肿瘤的发生发展。了解MDSCs的生物学特性及其在肿瘤微环境中的调控作用,对靶向MDSCs的免疫治疗至关重要。本文综述肿瘤微环境中MDSCs的免疫抑制功能以及目前基于MDSCs的免疫治疗策略,旨为临床提供更全面的靶向MDSCs免疫治疗的理论基础。

23-羟基白桦酸通过抑制髓源性抑制细胞对小鼠结肠癌生长的影响

目的探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)通过干预髓源性抑制细胞(MDSCs)抑制小鼠结肠癌生长的作用机制。方法体内实验,建立小鼠结肠癌CT-26皮下移植瘤模型,阳性对照组5-FU腹腔注射3 d(2次),实验组23-HBA尾静脉每日注射,连续给药18 d。末次给药后处死小鼠,检测小鼠体质量、移植瘤质量及体积、脏器指数、血常规的变化,流式细胞术检测肿瘤组织MDSCs、CD8^(+)T细胞比例,RT-qPCR法检测肿瘤组织MDSCs细胞免疫抑制功能相关细胞因子精氨酸酶1(Arg1)、一氧化氮合酶(iNOS),以及CD8^(+)T细胞杀伤功能相关细胞因子颗粒酶B(GZMB)、穿孔素1(PRF1)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA的表达。体外实验,CCK8法检测骨髓(BM)细胞、MDSCs细胞存活率,确定23-HBA的安全作用浓度;采用40 ng/mL粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和40 ng/mL白细胞介素-6(IL-6)诱导BM向MDSCs分化,同时加入不同浓度23-HBA(0、10.5、21、42μmoL/L)干预4 d,流式细胞术检测MDSCs细胞比例变化;BM体外诱导生成MDSCs后,将其分为对照组和23-HBA低、中、高剂量组(10.5、21、42μmoL/L),干预24 h,RT-qPCR法检测MDSCs细胞Arg1、iNOS mRNA表达;Western blot法检测MDSC细胞Arg1、iNOS蛋白表达。结果体内实验显示,与模型组比较,23-HBA干预后,小鼠移植瘤体积及质量均降低(P<0.05,P<0.01);肿瘤组织MDSCs细胞比例降低(P<0.05),CD8^(+)T细胞比例升高(P<0.05,P<0.01),Arg1 mRNA表达降低(P<0.05),GZMB、IFN-γmRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。体外实验显示,23-HBA剂量在10.5、21、42μmoL/L时,对BM、MDSCs细胞存活率没有显著影响(P>0.05);23-HBA高剂量可抑制BM向MDSCs分化(P<0.01);23-HBA呈剂量依赖性减少MDSCs细胞Arg1、iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01),下调Arg1、iNOS蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论23-HBA可通过干预MDSCs分化下调肿瘤内MDSCs细胞比例,减弱MDSCs细胞的免疫抑制功能,从而恢复CD8^(+)T细胞抗肿瘤活性,发挥抗结肠癌作用。

上海交通大学公共卫生学院王慧、李晓光团队发现肿瘤细胞与免疫细胞营养竞争诱导肝癌细胞免疫逃逸的机制和干预靶点

2024年7月2日,上海交通大学公共卫生学院王慧教授和李晓光研究员团队在国际消化系统著名期刊Gut在线发表题目为“Glutamine metabolic competition drives immunosuppressive reprogramming of intratumour GPR109A^(+) myeloid cells to promote liver cancer progression”的研究论文。该研究利用肝癌队列样本和动物模型发现肝癌肿瘤微环境内存在一群特殊的GPR109A^(+)髓系细胞亚群,该细胞亚群具有较强的免疫抑制功能,并与肝癌的不良预后密切相关。进一步研究发现,肿瘤微环境中肝癌细胞和髓系细胞之间存在营养竞争:肝癌细胞通过掠夺谷氨酰胺,驱动髓系细胞发生营养应激和代谢重编程,进而诱导GPR109A^(+)免疫抑制性髓系细胞介导的免疫逃逸和治疗抵抗。

髓源抑制性细胞的功能及其逆转策略

髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)是在骨髓中产生的一群具有高度异质性的免疫抑制细胞,在肿瘤等病理状态下大量聚集,是促进肿瘤进展、降低患者对传统治疗反应性的关键因素。近年来,免疫检查点阻断剂和基因工程T细胞过继回输治疗延长了许多晚期恶性肿瘤患者的生存期,但上述免疫疗法在肺癌、结直肠癌等实体瘤中有效率仅为15%~40%,这与实体瘤免疫抑制微环境密切相关。MDSC在肿瘤微环境中聚集,通过抑制T细胞或NK细胞增殖及功能减弱宿主抗肿瘤免疫反应,是患者对免疫治疗耐受的关键机制。因此,明确MDSC聚集及功能特征是探索提高免疫治疗效果的重要研究方向。本文将系统阐述MDSC的产生、聚集及其免疫抑制功能的调控机制,概述目前靶向MDSC治疗的最新研究进展。

羊膜间充质干细胞抑制NK细胞的细胞毒活性和单核细胞的功能

目的探讨人类羊膜来源间充质干细胞(human amnion-derived mesenchymal stem cells,HAMs)的免疫抑制功能。方法利用NK细胞可以靶向杀死K562细胞的原理,HAMs和NK细胞共培养后,收集NK细胞并用其作用K562细胞,通过流式细胞技术(FACS)检测K562细胞的死亡率,进而评估NK细胞毒活性变化及HAMs对NK细胞毒活性的影响,探讨HAMs的免疫抑制功能;利用单核细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-6的特性,HAMs和单核细胞共培养后,通过FACS检测单核细胞对TNF-α和IL-6表达率的变化,进而评估HAMs对单核细胞分泌功能的抑制能力,探讨HAMs的免疫抑制功能。结果 HAMs抑制NK细胞的细胞毒活性和单核细胞的因子分泌功能。结论 HAMs具有免疫抑制功能。

TLRs介导调控Treg细胞功能的研究进展

Toll样受体（toll like receptors，TLRs）属模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR），是重要的天然免疫分子．被视为联系固有免疫和适应性免疫的重要桥梁。Treg细胞（regulatoryT cells，Tregs）是一群具有抑制功能的T细胞亚群，能够抑制效应性T细胞的增殖、激活以及B细胞产生免疫球蛋白等。近来有研究表明Ⅲ．Treg细胞上TLRs的激活可增强或削弱Treg细胞的免疫抑制功能．TLRs对Treg细胞功能的调节作用可能对感染、肿瘤免疫监视、移植排斥等过程产生影响。因此，了解Treg细胞和TLRs间的联系，可能有助于发现新的治疗靶目标和治疗方法。

骨髓来源的抑制性细胞与器官移植研究进展

器官移植是治疗各脏器终末期疾病的有效手段,但免疫排斥反应仍是移植物和受体长期存活的主要障碍[1-3]。移植患者长期接受免疫抑制剂治疗会降低系统免疫功能,使患者易发生严重的感染和恶性肿瘤[4]。骨髓来源的抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)是一组来源于骨髓的异质性细胞,由未成熟的髓样细胞发育而来。作为免疫抑制细胞,MDSC发挥重要的免疫调节作用[5]。MDSC可通过多种途径介导免疫抑制功能,如精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)等[6]。近年来研究发现,MDSC可通过调节免疫反应参与移植器官的排斥反应或诱导免疫耐受形成。本文总结了MDSC在常见器官移植研究中的作用,为防治移植排斥反应提供新策略。

用1，25（OH）_2O_3预防NOD小鼠的自身免疫性糖尿病

用１，２５（ＯＨ）_２Ｏ_３预防ＮＯＤ小鼠的自身免疫性糖尿病［ＭａｔｈｉｅｕＣ，ｅｔａｌ．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，１９９４，３７：５５２．］１，２５（ＯＨ）２Ｏ３经体内、体外研究均显示其通过阻止效应的Ｔ细胞、刺激了免疫抑制功能而具有免疫调节作用，但有...

树突状细胞在诱导调节性T细胞中的作用

树突状细胞（Dendriticells，DCs）是一种专职的抗原提呈细胞，体内含量少。提呈作用超强。DCs能激活初始T细胞诱导机体的有效免疫应答，并决定免疫应答的方向，同时DCs在维持免疫耐受方面也具有重作用。调节性T细胞（RegulatoryTcells，Tregs）具有免疫抑制功能，是诱导非自身及外来抗原产生外周耐受的关键调节性细胞，

IL-17^＋Foxp3^＋T细胞的研究进展

调节性T细胞是一类表达CD4^＋、CD25^＋及转录因子Foxp3的T细胞亚群,其免疫抑制功能对免疫稳态的动态调节必不可少。Th17细胞是一种新的CD4^＋T细胞亚群,优先分泌IL-17（即IL-17A）,还能分泌IL-17F、IL-21、IL-22、IL-26等细胞因子,Th17细胞及其效应细胞因子在宿主抵御真菌和细胞外细菌方面发挥重要作用。