APE1通过免疫抑制性肿瘤微环境介导结肠炎相关结直肠癌的发生发展

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)在慢性肠道炎症向结肠炎相关性结直肠癌(colitis-associated colorectal cancer,CAC)转化过程中的调控机制。方法将C64S点突变纯合子(APE1^(C64S))和野生型(APE1^(WT))小鼠分别按随机数字表法分为实验组与对照组,实验组应用氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)及葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液构建CAC体内模型,采用免疫组化及多重免疫荧光分析各组小鼠结肠组织APE1表达及免疫细胞浸润情况。通过慢病毒转染构建APE1稳定敲低的小鼠结肠癌MC38细胞系,并对APE1^(WT)与APE1^(C64S)小鼠进行皮下荷瘤实验以确定肿瘤细胞来源的APE1导致免疫抑制性肿瘤微环境,采用免疫组化及多重免疫荧光分析荷瘤标本APE1、趋化因子(C-X-C基序)配体1[chemokine(C-X-C motif)ligand 1,CXCL1]表达及免疫细胞浸润情况。对来自陆军特色医学中心的1名28岁女性CAC患者的肿瘤标本采用免疫组化及多重免疫荧光分析肿瘤及邻近炎症组织中APE1、CXCL1的表达及免疫细胞浸润情况。结果与对照组及APE1^(WT)实验组相比,APE1^(C64S)实验组小鼠的疾病活动指数及肿瘤形成数量明显降低,多形核髓源抑制细胞(polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cells,PMN-MDSCs)浸润显著减少,CD4^(+)及CD8^(+)T细胞显著增多(P<0.05)。APE1^(WT)与APE1^(C64S)皮下荷瘤小鼠肿瘤生长及各免疫细胞差异无统计学意义;而使用敲低APE1的肿瘤细胞进行荷瘤实验,发现肿瘤生长明显抑制,PMN-MDSCs浸润减少,同时CD4^(+)及CD8^(+)T细胞显著增多(P<0.05)。在CAC患者肿瘤组织中APE1高表达、PMN-MDSCs浸润增加,CD8^(+)T细胞在肿瘤组织中较炎症组织浸润显著减少(P<0.05)。结论肿瘤细胞中APE1的氧化还原功能可促进PMN-MDSCs肿瘤浸润,同时减少T细胞的数量,从而形成免疫抑制性肿瘤微环境介导CAC的发生发展。

胰腺癌免疫抑制性肿瘤微环境研究综述

胰腺癌是一种高度恶性的肿瘤,早期诊断困难且缺乏有效的治疗方法,导致预后极差。胰腺癌肿瘤微环境包含肿瘤细胞、免疫细胞、基质细胞、细胞外基质以及多种可溶性分子;其中,细胞外成分包括基质成分和可溶性因子等,在肿瘤的发生、发展、侵袭和转移过程中发挥重要作用。胰腺癌微环境中具有显著的免疫细胞浸润,以免疫抑制为突出特征。肿瘤细胞一方面编辑免疫系统,使其无法被免疫系统识别;另一方面招募和激活各种免疫抑制性细胞如胰腺星状细胞、髓系来源抑制细胞、肿瘤相关巨噬细胞和调节性T细胞等,进而分泌免疫抑制性分子,影响抗肿瘤免疫细胞的功能,抑制宿主的抗肿瘤免疫反应,造成肿瘤的免疫逃逸,促进肿瘤的发展转移。该文讨论胰腺癌肿瘤微环境各种免疫抑制成分的作用机制,并总结胰腺癌免疫治疗的最新成果,以期为胰腺癌免疫抑制性肿瘤微环境的研究以及胰腺癌的免疫治疗提供新的思路。

黄芪甲苷Ⅳ干预低糖介导的肿瘤免疫抑制微环境作用及其机制研究

目的:探讨黄芪甲苷Ⅳ(astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)干预低糖介导的肿瘤免疫抑制微环境作用及其分子机制研究。方法:采用MTT实验检测As-Ⅳ在体外低糖微环境下对CD4+T细胞增殖率;采用ELISA实验和qPCR实验检测白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、CD40L和转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平;采用Western blot法检测CD4+T细胞葡萄糖转运蛋白(Glut-1)、糖酵解关键酶[糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)]、AKT/mTOR信号和AKT/GSK3β信号通路活性的表达;采用分子对接和加入AKT抑制剂实验进行验证;采用B16-PKM2-OE建立低糖肿瘤微环境动物模型进行验证。结果:MTT结果显示,As-Ⅳ能够促进低糖微环境下CD4+T细胞的增殖(P<0.05);ELISA实验和qPCR实验检测结果显示,As-Ⅳ可以提高肿瘤组织中IL-2、IFN-γ、CD40L水平,降低TGF-β1的水平(P<0.05);Western blot法检测结果显示,As-Ⅳ能够促进CD4+T细胞细胞膜表面Glut-1蛋白表达,同时呈浓度依赖性上调糖酵解关键酶表达,激活AKT/mTOR信号和AKT/GSK-3β信号;分子对接技术和加入AKT抑制剂实验结果提示As-Ⅳ激活AKT/mTOR信号和AKT/GSK-3β信号;动物实验结果显示As-Ⅳ通过激活低糖微环境下CD4+T细胞增殖与活化发挥抗肿瘤作用。结论:As-Ⅳ通过激活AKT/Glut信号促进低糖微环境下CD4+T细胞增殖与活化发挥抗肿瘤作用。

代谢“废物”乳酸在肿瘤微环境中的免疫抑制作用

近年来,肿瘤微环境(TME)备受科学家们的关注,它是由肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)、免疫细胞、血管、细胞外基质、周围支持组织及其所在的代谢环境等共同组成的复杂体系。免疫逃逸和代谢改变(葡萄糖有氧代谢转至无氧代谢产生乳酸)是此体系的两个基本特征。虽然过去一直认为乳酸是TME中的代谢废物,但现在人们普遍认为乳酸的增加和TME的酸化在肿瘤发生发展中发挥关键作用,包括免疫逃逸、组织侵袭/肿瘤转移、血管生成和肿瘤耐药等。因此,研究TME中乳酸代谢、免疫抑制、血管生成、肿瘤耐药等关键过程的调控机制,可为靶向TME的新治疗策略提供理论基础和实践依据。

肿瘤免疫抑制及炎性微环境的中医病机

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是一个复杂的动态网络,对于促进肿瘤恶性转化,支持肿瘤生长和侵袭,保护肿瘤免受宿主免疫的杀灭,发挥着十分重要的作用。肿瘤微环境以免疫抑制及炎性微环境为主要特征,两者协同促进肿瘤细胞增殖、浸润及转移等生物习性表达。通过肿瘤微环境现代医学机制认识,结合中医学正邪盛衰基本病机,认为肿瘤微环境是正邪斗争的场所,微环境动态变化是正邪斗争盛衰变化的结果,其中,肾精亏虚,精髓异化,是形成肿瘤免疫抑制微环境的始动因素;脾气亏虚,免疫功能低下,物质能量代谢失常,是形成肿瘤免疫抑制微环境的核心病机。肿瘤炎性微环境是机体气化及代谢失司,气滞、痰湿、瘀血、热毒等壅遏体内,与癌毒搏结于肿瘤部位所形成的局部邪实状态。深入探讨肿瘤免疫抑制及炎性微环境的中医病机,对于重塑肿瘤局部微环境及机体整体内环境,恢复阴阳平衡的内外稳定状态,防治肿瘤的复发及转移,具有重要的理论及实践指导意义。

肿瘤微环境中免疫抑制性细胞和细胞因子在抗肿瘤免疫反应中的作用研究进展

肿瘤免疫抑制性微环境主要由肿瘤细胞产生的免疫抑制分子、免疫抑制性细胞和免疫抑制性细胞因子构成。其中免疫抑制性细胞主要包括肿瘤相关巨噬细胞、调节性T细胞(Tregs)、骨髓来源的抑制性细胞(MDSCs)、癌相关成纤维细胞(CAFs)等。巨噬细胞可通过PI3Kγ信号通路、SIRPα/CD47、G蛋白偶联受体(G-proteincoupled receptor,GPCR)家族成员Lgr4等途径发挥免疫抑制作用。Tregs可通过接触依赖和释放IL-10、IL-4及分泌型TGF-β等抑制性细胞因子抑制肿瘤细胞的增殖和活化; Tregs可与靶细胞相应受体结合,抑制T细胞相关的重要细胞因的产生及迁移与增殖; Tregs也可通过下调抗原呈递细胞(APC)的功能或竞争APC上的共刺激分子来抑制效应T细胞。MDSCs可通过激活IMC上调表达、下调TCR相关ζ链,抑制T细胞的活化、分泌趋化因子、炎性因子等募集Tregs,促进肿瘤免疫逃逸。CAFs是肿瘤微环境中最重要的细胞成分,主要通过释放蛋白水解酶、生长因子和细胞因子来调节肿瘤微环境,并影响肿瘤细胞生物学行为。免疫抑制性细胞因子主要包括IL-10、TGFβ、IL-17、外泌体及PD-1/PD-L1等免疫检查点分子等。IL-10可通过降低树突状细胞和巨噬细胞等APCs表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86表达、介导STAT3的磷酸化、干扰IFN-γ诱导的单核细胞活化表达等途径,抑制APC的功能。TGF-β是诱导巨噬细胞趋向M2型极化的重要因子,可促进IL-10表达。IL-17属于促炎细胞因子,在肿瘤发生发展具有双重作用。肿瘤细胞分泌的外泌体通过诱导免疫抑制性细胞Tregs和MDSCs的分化及增殖来间接诱导免疫抑制,抑制CD3ζ链mRNA表达从而抑制T细胞活化。

乌梅丸对乳腺癌小鼠肺转移微环境免疫抑制性细胞因子的影响

目的 观察乌梅丸对乳腺癌小鼠肺转移微环境免疫抑制性细胞因子表达的影响。方法 选择8只Balb/c雌性小鼠作为正常组;另选择16只Balb/c雌性小鼠,采用4T1乳腺癌细胞于小鼠第2对乳腺脂肪垫内注射方法构建乳腺癌模型,将造模成功的16只小鼠随机分为乌梅丸组和模型组,每组8只。乌梅丸组给予乌梅丸16.44 g/kg灌胃,正常组和模型组给予等量灭菌饮用水灌胃,均干预1个月。干预完成后处死各组小鼠,分离肺组织,采用免疫荧光组织化学法观察肺组织中环氧化酶2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况,分别采用RT-qPCR和Western blot法检测肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF mRNA和蛋白表达情况。结果 模型组肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF呈强阳性表达,乌梅丸组COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF的荧光强度低于模型组。模型组肺组织中COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF mRNA和蛋白相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05),乌梅丸组COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF mRNA和蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05)。结论 乌梅丸可能通过下调免疫抑制性细胞因子COX-2、IL-6、TGF-β、VEGF的表达而抑制乳腺癌肺转移。

早期肺癌肿瘤微环境宿主免疫功能研究及与疾病进展的关联性

目的:研究早期肺癌肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)宿主免疫功能及与病情进展的关联性。方法:回顾性分析2020年2月至2023年4月驻马店市中心医院216例早期肺癌患者的癌组织和癌旁组织免疫细胞的表达。根据患者是否复发分为复发组(41例)、未复发组(175例),比较两组基线资料、免疫细胞表达,分析免疫细胞表达对肺癌复发的影响及预测价值。结果:癌组织CD56^(+)自然杀伤(natural killer,NK)阳性率低于癌旁组织,CD68^(+)肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)和CD163^(+)TAM高浸润率及CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞比例高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);复发组肿瘤最大直径、有微乳头结构患者占比、CD68^(+)TAM和CD163^(+)TAM高浸润率及CD8^(+)T细胞比例高于未复发组,CD56^(+)NK阳性率低于未复发组,差异具有统计学意义(P<0.05);校正后显示CD56^(+)NK阳性、CD68^(+)TAM高浸润、CD163^(+)TAM高浸润、CD8^(+)T细胞比例是早期肺癌复发的独立相关影响因素,差异具有统计学意义(P<0.05);CD56^(+)NK阳性+CD68^(+)TAM高浸润+CD163^(+)TAM高浸润+CD8^(+)T细胞比例预测早期肺癌复发的AUC为0.949,高于单独的免疫指标,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:早期肺癌患者TME宿主免疫功能与病情进展有关,CD56^(+)NK阳性、CD68^(+)TAM高浸润、CD163^(+)TAM高浸润、CD8^(+)T细胞比例联合有助于提高早期肺癌复发预测效能。

缺氧诱导的上皮间质转化通过诱导肝细胞癌免疫抑制微环境促进肿瘤转移

【据《Cancer Res》2016年2月报道】题：缺氧诱导的上皮间质转化通过诱导肝细胞癌免疫抑制微环境促进肿瘤转移（作者Ye LY等）门静脉癌栓是肝细胞癌（HCC）发生转移的重要危险因素之一,与患者预后密切相关。门静脉癌栓的存在经常伴有肿瘤微环境的缺氧,进而加速肿瘤转移,但目前其发生机制仍不清楚。最近的证据表明,缺氧诱导因子-（-1）α诱导上皮间质转化进而促进肿瘤细胞转移。来自浙江大学医学院的Ye等做了相关研究,探讨是否缺氧诱导的上皮间质转化可影响肿瘤微环境中的免疫细胞,进而促进肿瘤免疫抑制。

CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞调控肿瘤免疫抑制微环境的研究进展

目的 CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞(Treg)是肿瘤免疫抑制微环境的主要组成部分,其在肿瘤的免疫抑制微环境中分泌IL-10、IL-35、TGF-β1和FGL2等细胞因子发挥免疫抑制作用。Treg细胞抑制CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞和NK细胞,进而抑制特异性抗肿瘤免疫反应使肿瘤细胞更容易逃避免疫监视。进一步研究Treg细胞在肿瘤免疫中的作用机制,对深入了解恶性肿瘤的发病机制及免疫治疗具有重要的理论意义。此外,Treg细胞及其分泌的细胞因子在肿瘤治疗和预后评估等方面也具有广阔的临床应用前景。

外泌体在肿瘤微环境中的免疫抑制作用

外泌体(exosome)作为一种纳米级囊泡,在细胞间的信息传递中起着重要作用。越来越多的研究表明,肿瘤细胞来源外泌体(tumor-derived exosomes,TEXs)携带有与亲代肿瘤细胞相似的免疫抑制性分子,介导了肿瘤细胞与NK细胞、树突状细胞、髓源性抑制细胞、巨噬细胞、效应性T细胞、调节性T细胞和调节性B细胞的通讯,从而抑制肿瘤微环境中的抗肿瘤免疫应答。此外,近年来研究发现免疫细胞来源的外泌体在免疫抑制性肿瘤微环境的形成过程中也起一定作用。现针对外泌体的生物学特征及其在免疫抑制性肿瘤微环境形成过程中的作用进行综述。

扶正类中药调节肿瘤免疫抑制微环境的研究现状

肿瘤的免疫治疗成为新一代的肿瘤治疗方法的大背景下,肿瘤免疫微环境发挥着重要作用。肿瘤微环境因其尤为复杂的成分,成为肿瘤细胞赖以生存和发展的环境。机体正常的免疫微环境可以在免疫监视的作用下有效抑制肿瘤的生长,但肿瘤免疫微环境由于其酸性、缺氧环境以及代谢产物堆积导致免疫细胞的免疫抑制或耐受表型,形成肿瘤免疫抑制微环境,干扰免疫系统正常的监视、效应功能。中医药可以通过多个方面作用于全身免疫系统有效缓解免疫抑制状态,其中扶正类中药可以对机体起到补气助阳滋阴养血的作用,从而在肿瘤微环境中改善机体免疫水平以及细胞状态,促进免疫细胞活性的作用。目前重塑肿瘤免疫抑制微环境(immunosuppressive tumor microenvironment,ITM)逐渐成为肿瘤免疫治疗的新方向。

stat3信号促进肿瘤免疫抑制微环境形成的研究进展

肿瘤微环境指肿瘤在其发生发展过程中所处的内环境,由肿瘤细胞、间质细胞、微血管、微淋巴管、众多细胞因子及少量浸润细胞等共同构成。肿瘤微环境在促进肿瘤细胞生长、增殖的同时,也为肿瘤细胞的侵袭转移及逃避机体免疫系统的攻击提供了必要的条件。

肿瘤微环境中单核细胞样髓源抑制细胞M-MDSCs的免疫抑制作用及其相关治疗的研究进展

肿瘤微环境(TME)在肿瘤发生发展中发挥重要促进作用。广泛存在于TME中的髓源抑制细胞(MDSCs)是介导肿瘤免疫逃逸的主要效应细胞群。单核细胞样髓源抑制细胞(M-MDSCs)作为MDSCs中除中性粒细胞样髓源抑制细胞(PMN-MDSCs)以外的另一主要亚型,因其具备PMN-MDSCs不具备的广谱免疫抑制活性和高度可塑性,即M-MDSCs在癌症初期被招募至肿瘤部位,对T细胞、NK细胞等发挥直接免疫抑制作用,另可分化为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、炎症性树突状细胞(Inf-DCs)和PMN-MDSCs,从而增加肿瘤治疗难度,故研究者逐渐把目光由数量上占主导的PMN-MDSCs转向占比较少的MMDSCs。根据M-MDSCs在TME中募集迅速、分化多样和功能复杂的特点,以其为靶点的免疫疗法可从耗竭数量、干预分化和抑制功能3方面入手,以期增强临床抗肿瘤疗效。虽然国内外PMN-MDSCs研究颇丰,但聚焦于M-MDSCs的中文综述鲜有报道,本文拟从TME中M-MDSCs特点出发,首次对M-MDSCs免疫抑制作用及其靶向治疗进行综述。

膀胱癌肿瘤微环境中抑制性免疫浸润细胞的研究进展

免疫治疗在早期及晚期膀胱癌患者中均可发挥作用,但是仍有部分患者不能从免疫治疗中获益。肿瘤微环境介导的免疫逃逸可能是这部分患者对免疫治疗无应答的主要原因之一。在肿瘤微环境中发现一群抑制性免疫浸润细胞,能够通过内在及外在途径介导肿瘤免疫抑制的形成。该类细胞包括髓样抑制细胞、肿瘤相关巨噬细胞、调节性T细胞、肿瘤相关中性粒细胞。该文就这些抑制性免疫浸润细胞在膀胱癌中的免疫抑制及促癌机制、潜在的治疗靶点、与预后的相关性进行综述。

基于肿瘤微环境探讨癌性疼痛络病病机的生物学基础

基于络病理论,癌性疼痛的核心病机是络虚邪瘀,具体病机变化分为络气郁滞、络脉瘀阻、痰湿阻络、热毒滞络、络虚不荣。在癌性疼痛的发病机制中,肿瘤微环境发挥了重要作用。络脉及其中气血津液的具体变化引起癌性疼痛的过程与肿瘤微环境及其中发生物质转换、信息传递并产生疼痛的过程相类似。络气郁滞与神经内分泌免疫调节、络脉瘀阻与低氧微环境、痰湿阻络与酸性微环境、热毒滞络与炎症微环境、络虚不荣与免疫微环境分别具有相关性,肿瘤微环境可能是癌性疼痛络病病机的生物学基础。

肿瘤引流淋巴结的免疫抑制微环境研究进展

肿瘤引流淋巴结(tumor draining lymph nodes,TDLNs)是肿瘤抗原首先进入的二级淋巴器官,其作为机体免疫监视的枢纽,是决定肿瘤免疫的关键初始部位。研究表明,在肿瘤进展过程中,肿瘤细胞会通过多种途径驯化淋巴结中的基质细胞和免疫细胞,塑造转移前生态位,形成免疫抑制微环境,为肿瘤细胞的定植和远处转移提供条件。本文回顾了TDLNs免疫抑制微环境形成的机制,并进一步探讨了靶向TDLNs的免疫疗法,旨在为精准的肿瘤免疫治疗提供新思路。

基于miRNA针灸调控肿瘤免疫抑制微环境的应用潜力探讨

肿瘤免疫技术昂贵的治疗费用是其在基层单位推广的首要障碍。如何发挥针灸“简便效廉”的优势,将其作为肿瘤免疫抑制微环境正向调控的补充替代方案,合理介入中晚期恶性肿瘤患者“带瘤生存”的过程中,维持机体相对“阴平阳秘”状态,有重要的临床实践意义。miRNA深度参与了肝癌等恶性肿瘤的发生发展过程,又因其具有多层次、多靶点性的特征,较为适合阐释针灸效应机制,可尝试作为研究针灸改善肿瘤免疫功能的利器。目前已有一定数量的文献表明,针灸具有改善肿瘤免疫功能及微环境的能力;探索针灸与miRNA间相互作用原理的文献亦层出不穷。故本文尝试对以上内容进行概述,以肝癌作为研究载体,在课题组前期研究的基础上,分析针灸维持患者“带瘤生存”状态的应用潜力。

癌相关成纤维细胞介导肿瘤微环境免疫抑制作用研究进展

免疫逃逸作为肿瘤的特征之一,在肿瘤进展中发挥着重要作用。癌相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境(TME)中最丰富、最关键的成分之一,通过重塑细胞外基质,促进肿瘤的发生、发展。CAFs是TME中免疫调节的主要参与者,通过多种机制使TME处于免疫抑制状态,促进肿瘤的免疫逃逸,包括多种细胞因子和趋化因子的分泌、介导先天和获得性免疫细胞的募集和功能分化以及对肿瘤细胞本身的免疫调控等。通过开发靶向CAFs的药物,可能中断成纤维细胞与肿瘤之间的相互作用,消除免疫抑制状态,从而抑制肿瘤的发生、发展。

MDSCs参与肿瘤微环境免疫抑制的研究进展

肿瘤的发生、发展以及转移与其所处的肿瘤微环境密切相关,肿瘤细胞可以通过自分泌和旁分泌等方式对所处环境进行改造以维持自身的生存和发展。肿瘤免疫抑制是肿瘤微环境的重要特征,越来越多的研究表明骨髓来源的抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在肿瘤微环境免疫抑制中扮演了重要的角色,本文就骨髓来源的抑制性细胞参与肿瘤微环境免疫抑制的研究进展进行综述,以期为进一步理解与干预肿瘤免疫抑制奠定基础。