酶联免疫捕获法检测耳鼻喉科患儿血清过敏原特异性IgE的价值

目的探讨酶联免疫捕获法检测对耳鼻喉科患儿血清过敏原特异性IgE(specific immunoglobulin E,sIgE)水平分析的价值。方法选取广州市中西医结合医院2019年3月—2022年2月收治的耳鼻喉科患儿血清样本300份,使用酶联免疫捕获法检测其粉尘螨、户尘螨、狗毛屑、猫毛屑、艾蒿花粉、链格孢共计6种常见的吸入物过敏原sIgE,记录精密度、灵敏度、线性范围等数据,并与Immuno CAP系统的评价效能进行对比分析。结果酶联免疫捕获法检测6种过敏原sIgE的批内变异系数(coefficient of variation,CV)值均<7%,而总CV%<8%。6种过敏原的定量限(limit of quantitation,LOQ)值均低于0.35 kU/L,均为阴性。相关系数均大于产品说明书的阈值0.975,线性范围良好。不同过敏原的回归方程斜率差异均有统计学意义(P<0.05)。两系统定量检测结果相关性较强。两种检测方法的阳性符合率为77.33%,阴性符合率为98.67%,Kappa值为0.833,P<0.05。结论酶联免疫捕获法检测对耳鼻喉科患儿血清过敏原特异性IgE水平的评价效能,具有较好的精密度与灵敏度,且与Immuno CAP系统的相关性较好,作为一种自动化全定量检测手段,能够满足临床耳鼻喉科常见过敏原检验的要求,具有使用价值。此文的研究结果为儿童耳鼻喉科常见过敏性疾病的诊断和鉴别诊断后期标准制定提供了借鉴内容。

采用酶联免疫捕获法和荧光酶联免疫吸附法检测过敏原IgE抗体的比较分析

目的:对酶联免疫捕获法的ALLERG-O-LIQ系统和荧光酶联免疫吸附法的ImmunoCAP系统检测过敏原特异性IgE抗体的一致性进行对比观察。方法:研究对象为我院2008～2010年就诊于变态反应科、儿科的病例,采用2种不同的酶联免疫吸附法检测屋尘螨(D1)、粉尘螨(D2)、狗毛屑(E5)、德国小蠊(I6)、鸡蛋(F1)、牛奶(F2)、花生(F13)、蟹(F23)、虾(F24),共9种过敏原特异性IgE抗体检测,将2种检测结果进行一致性检验和线性回归分析。结果:共进行了520项次过敏原特异性IgE检测,两种系统对吸入性过敏原特异性IgE抗体定量检测结果一致性良好(P<0.05),特异性IgE结果:屋尘螨>粉尘螨>德国小蠊>狗毛屑;而对食物过敏SIgE抗体检测结果的相关度较吸入过敏原低,特异性IgE结果:蟹>虾>花生>鸡蛋>牛奶。结论:ALLERG-O-LIQ系统和ImmunoCAP系统都属于新一代易操作的过敏原检测系统。2种检测方法一致性良好,结果偏离度较小,呈线性回归分布。因此,对于评估血清中的特异性IgE来说,ALLERG-O-LIQ系统是一个可靠的、经济的临床诊断系统。其检测的结果与ImmunoCAP系统的检测结果比较相符合。

磁粒子捕获免疫发光法在检测弓形虫IgM的应用

目的:探讨磁粒子捕获免疫发光法(ICA)在检测血清弓形虫IgM(Toxo-IgM)的应用。方法:分别进行线性、精密度、对比试验比较。结果:二种方法曲线相似但线性范围不同,ICA法最宽。精密度试验中ICA法检测批内为1.3%,批间为3.5%;ELISA法批内为15.7%,批间为23.3%。结论:ICA法测定Toxo-IgM优于ELISA法。

酶联免疫捕获法检测常见过敏原的应用评价

研究常见过敏原检测中酶联免疫捕获法的应用价值。 方法 选取2019年1月-2021年1月我院收治的128例过敏性反应患者为研究对象,采用酶联免疫荧光测定法与酶联免疫捕获法测定常见SIgE抗体,分析检测结果。 结果 对4种过敏原进行阴阳定性分析结果显示,D1(屋尘螨)、F13(花生)及I6(德国小蠊)一致性良好,F2(牛奶)不存在一致性;对常见过敏原进行分级别对比一致性分析结果显示,D1、I6过敏原一致性较差,F2标本不存在一致性,F13过敏原存在中等一致性。 结论 以UniCAP系统为金标准,酶联免疫捕获法测定常见过敏原,灵敏度均较好,可为临床诊治提供可靠依据。

捕获－酶免疫法诊断麻疹32例

捕获－酶免疫法诊断麻疹３２例河北医学院第二医院（０５００００）李蓉，枟国军，杨秋格，李永军我们于１９９２年２月～１９９２年１０月对门诊和病房发热出疹临床表现既像麻疹又似风疹５０例患儿，进行了免疫学抗体检测与分析。对象与方法一、对象１．对照组１０人，男...

免疫磁捕获-实时荧光PCR快速检测鸡肉中沙门氏菌

对免疫磁捕获-实时荧光PCR检测鸡肉中沙门氏菌进行了初步研究。主要包括免疫磁珠制备条件的选择及优化,通过实验最终确定了以6 mg/mL EDC和5 mg/mL NHS活化直径为700 nm的羧基聚苯乙烯磁性微球,与浓度为100μg/mL的沙门氏菌抗体在37℃振荡孵育1.5 h,制备得到抗沙门氏菌免疫磁珠,与市售沙门氏菌免疫磁珠试剂盒(Dynal产品)捕获效率相当。免疫磁捕获-实时荧光PCR检测方法检测限为104 CFU/mL左右,能在16 h内检测出鸡肉中104 CFU/mL的沙门氏菌,可用于食品中沙门氏菌的快速检测。

检测HIV-1新近感染的BED捕获酶免疫实验的重复性和稳定性评价

目的对BED捕获酶免疫实验(BED capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)的重复性和稳定性进行评价。方法对在国家艾滋病参比实验室(参比室)和A、B两个艾滋病确证中心实验室,使用BED-CEIA方法对新近感染检测的实验数据进行统计。分别对在参比室和A、B两实验室进行检测的59、35和18块酶标板的质控品(NC、CAL、LPC和HPC)OD和OD-n的Mean、SD和C V进行统计。对3个实验室初筛和确认实验结果的一致性进行比较,得出R2值。使用同一考核血清盘,将11位不同实验人员的实验结果与参比室实验员的实验结果进行比较,得出R2值。结果在参比室进行的实验中,对OD-n的统计显示,质控品NC的C V为14.4%,LPC和HPC的C V值约为5%;在A实验室中,LPC和HPC的C V值均控制在10%以内;在B实验室中,LPC和HPC的C V值均控制在12%以内。3个实验室初筛和确认实验结果的R2值均达到了0.90以上。其他实验人员与参比室实验人员的结果实验比较显示,R2为0.9777,不同实验员之间可重复性强。结论BED-CEIA方法的稳定性和重复性均十分突出,可以在我国接受过专项培训的艾滋病确证中心实验室开展该项工作。

BED发病捕获酶联法检测宁夏男男性行为人群HIV新发感染

目的了解宁夏2011年哨点男男性行为人群(MSM)艾滋病病毒(HIV)新发感染情况,计算新发感染率。方法收集哨点监测人群男男性行为400例,应用BED HIV-1发病捕获酶免疫测定法(BED-CEIA)对HIV-1阳性的样本进行新发感染检测,计算新发感染率。结果 HIV-1感染率为3.75%,感染者中新发感染的比例为33.33%,新发感染率为2.48%(95%CI:0.31%～4.66%)。结论 BED-CEIA方法可应用于哨点男男性行为人群及其他人群,对其新近感染率的计算和估计具有实用性,对艾滋病防治政策的制定和调整具有参考作用。

核酸检测法对甲型病毒性肝炎的免疫检验价值分析

目的探讨核酸检测法对甲型病毒性肝炎的免疫检验价值。方法78例抗-甲型肝炎病毒(HAV)免疫球蛋白M(IgM)检验标本中呈现阳性的患者作为研究对象,随机分为实验组与对照组,每组39例。实验组采用核酸检测法进行检验,对照组采用酶联免疫捕获法进行检验。对比两组检验结果的准确率。结果实验组检验结果准确36例,检验准确率为92.3%;对照组检验结果准确25例,检验准确率为64.1%;实验组检验准确率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在对感染性疾病甲型病毒性肝炎进行检验时采用核酸检测法,其对甲型病毒性肝炎的检验准确率更高,为后续的疾病干预与治疗提供保障,可以在临床检验中推广使用。

重组人巨细胞病毒(HCMV)优势表位嵌合抗原的构建表达以及捕获法检测IgM抗体

通过计算机软件分析选择巨细胞病毒优势抗原表位,用聚合酶链式反应(PCR)扩增优势表位基因,构建了巨细胞病毒多优势表位嵌合抗原表达载体p4T-UL32-UL44-UL80a-UL83,转化宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,GST亲和层析法获得高纯度嵌合抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记嵌合抗原,并构建捕获法检测血清中的抗HCMVIgM抗体。结果表达的优势表位嵌合抗原具有很好的抗原性,用其建立的捕获法检测确诊的30份阳性和63份儿童阴性血,阳性检出率和阴性检出率都是100%说明用嵌合抗原构建的捕获法检测血清中抗HCMVIgM抗体具有更高的灵敏度和检出正确率,其检测水平已经达到国外的同类产品水平。

2种方法检测常见过敏原特异性IgE的比对分析

目的分析酶联免疫荧光测定法和酶联免疫捕获法检测4种常见过敏原特异性IgE(sIgE)的结果的一致性。方法采用2种方法检测屋尘螨(D1)、德国小蠊(I6)、牛奶(F2)、花生(F13)4种常见过敏原sIgE。结果 2种方法对D1、I6、F13sIgE的定性检测结果具有良好的一致性。将2种方法检测的4种常见过敏原sIgE定量结果进行分级,再对2种方法的定量分级结果进行一致性分析,显示2种方法的F13sIgE定量分级结果存在中等一致性(Kappa=0.489),D1和I6sIgE定量分级结果一致性较差(Kappa分别为0.400、0.305)。以酶联免疫荧光测定法为"金标准",显示酶联免疫捕获法对4种过敏原sIgE的检测灵敏度都比较好,但特异性并不十分理想。结论酶联免疫捕获法与酶联免疫荧光测定法的检测结果具有一定的一致性,其灵敏度和特异性尚可,可作为过敏原检测的初筛方法。

滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中的应用

目的探讨在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值。方法研究纳入22个艾滋病自愿咨询检测(VCT)中心10226名咨询者血浆及干血斑样本作为目标实施HIV抗体检测,对通过免疫印迹法(WB)明确诊断为350例HIV感染患者的血浆样本及干血斑样本需同时实施BED-CEIA检测,观察滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中稳定性、重复性,对两种样本检测结果存在的差异性进行对比。结果在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑稳定性、重复性较高,重复性R^(2)值可高达0.9551。350例HIV感染患者样本检测结果中,其中295例患者样本被同时评估为长期感染,53例患者样本被同时评估为新近感染,两种样本对HIV BED-CEIA新发感染评估判定结果呈一致性(R^(2)值=0.95),一致性为99.42%。血浆样本及干血斑样本得到不同结果,样本An值均处于临界值附近(P<0.05)。结论在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值较高,检测结果稳定性、重复性较好,虽然部分样本检测结果存在一定的差异,但与血浆样本检测结果两者之间存在较佳的等效性,可广泛应用于临床HIV-1 BED-CEIA新近感染检测中。

人类免疫缺陷病毒新近感染及其检测技术的研究进展

人类免疫缺陷病毒(HIV)感染使全球面临严重问题,而对HIV新近感染的检测是估算HIV新发感染趋势研究的新方向。HIV核心蛋白p24抗原可早期检出因而用于HIV新近感染的检测,但因其敏感性低,对群体发病率的估计存在局限性;HIV核酸检测用于新近感染的判断敏感性和特异性都较高,尤其是集合核酸技术的应用降低了核酸检测技术本身的高成本;BED(指HIV-1特异的B、E和D亚型)捕获酶联免疫法的数据结果则更能反映出新近感染高危因素以及其他方面的变化规律,对评估HIV新发感染动态趋势起到积极作用。

用免疫胶体金快速诊断卡初筛粪便中的O157∶H7大肠杆菌

我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 (31/34 ) ;诊断卡弱阳性的粪便标本 ,5 47% (7/12 8)可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 ;诊断卡阴性的粪便标本 ,没有分离到病原菌。O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡是一种快速、灵敏、简便的技术 ,可用于对疑似病例的早期诊断和对粪便标本进行初筛 ,减少了工作量 ,值得推广。

凉山彝族自治州2011—2013年基于BED捕获酶联免疫法估算HIV-1新发感染率

目的 了解凉山彝族自治州HIV感染情况及新发感染率。方法 收集凉山州2011-2013年每年医疗机构HIV监测人数分别为412 608例、393 699例及443 025例，用酶联免疫和蛋白印迹方法检测出HIV抗体阳性样本数量分别为4 480、3 999及4 719份，再应用BED捕获酶联免疫法（BED-CEIA）进一步检测，排除HIV-1既往阳性样本，得出新发感染所占比例，进而估算每年的HIV-1新发感染率。结果 凉山州2011-2013年HIV阳性感染率分别为1.09%、1.02%和1.07%，新发感染率（95% CI）分别为0.34（0.32～0.37）%、0.62（0.58～0.66）%和0.61（0.57～0.65）%。2011-2013年HIV新发感染人群主要集中在男性，分别为64.24%（433/674）、59.22%（504/851）和58.37%（495/848）；彝族分别为84.72%（571/674）、94.59%（805/851）和84.20%（714/848）；已婚人群分别为61.57%（415/674）、61.45%（523/851）和60.50%（513/848），文盲和小学文化程度人群分别为60.24%（406/674）、61.57%（524/851）和60.03%（509/848）。结论 HIV新发感染率比感染率更能反映艾滋病的流行状况，研究结果提示凉山州艾滋病疫情形势仍然严峻，需加大防控力度。

应用捕获酶联免疫测定法估算2010-2012年浙江省重点人群人类免疫缺陷病毒1型新发感染率

目的估计浙江省2010-2012年重点人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)新发感染情况及其发展趋势。方法收集浙江省2010-2012年665例HIV哨点监测阳性样本和4030例新报告确证阳性病例样本,应用BED HIV-1捕获酶联免疫测定法(BED HIV-1 capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)检测新发感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W)×R/2]×100%估算人群的HIV-1新发感染率,并对同期新报告确证阳性病例计算新发感染比例。结果浙江省2010-2012年HIV监测哨点重点人群的男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)HIV-1新发感染率最高,分别为3.52%(2.22%～4.83%)、6.63%(4.65%～7.94%)和6.33%(4.83%～7.84%),其他人群均较低。浙江省2010-2012年报告阳性病例新发感染比例分别为27.08%、26.09%和30.35%,2011年和2012年MSM报告阳性病例新发感染比例分别为40.17%和42.05%。结论浙江省MSM人群HIV-1新发感染率2010-2011年增长较快,2011-2012年稍有下降但仍维持较高水平,其他人群相对较低。报告阳性病例中MSM人群新发感染比例也较高。浙江省MSM人群HIV流行形势仍然非常严峻,应加大对该人群的干预力度。

BED捕获酶联免疫方法在宿州市HIV-1新近感染监测分析中的应用

了解宿州市新报告HIV感染病例中新近感染病例特征,为开展有针对性的预防干预工作提供依据。应用BED捕获酶联免疫方法 （BED-CEIA）对2011-2013年宿州市新发现的65例HIV-1报告病例进行新近感染检测。结果显示：23例属于HIV-1新近感染病例,新近感染检出率35.39%;2011-2013年HIV-1新近感染率0.007%（95%CI0.005～0.009）;男性占86.96%（20例）;18～50岁占91.30%（21例）;农民/民工占56.52%（13例）;经性传播感染占95.65%（22例）。新近感染病例以基层劳动的男性、青壮年为主,人群性途径感染形式严峻;应采取有效的针对性干预措施,防止HIV由职业人群向一般人群蔓延。

人巨细胞病毒IgM抗体生物素-亲和素单克隆抗体捕获时间分辨荧光免疫法检测试剂盒的研制与评价

目的建立人巨细胞病毒IgM(human cytomegalovirus IgM,HCMV IgM)抗体生物素-亲和素单克隆抗体捕获时间分辨荧光免疫法(biotin-avidin monoclonal antibody capture time-resolved fluoroimmunoassay,BA Mac TrFIA)检测试剂盒,并对其性能进行评价。方法采用鼠抗IgMμ链单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)作为固相反应板的包被抗体,生物素(biotin)标记的HCMV基因重组抗原作为桥接抗原,链酶亲和素(SA)标记铕(Eu3+)作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,应用BA Mac TrFIA法进行HCMV IgM抗体的检测,对连续制备的3批试剂盒的最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、热稳定性进行评价,并与巨细胞病毒IgM抗体诊断试剂盒同时对1 020份血清或血浆样本进行临床研究比对试验,采用Kappa检验进行一致性分析。结果选择4μg/ml作为鼠抗IgMμ链McAb最佳包被浓度,1∶10 000稀释作为HCMV-Bio最佳工作浓度,1∶1 500稀释作为SA-Eu3+最佳工作浓度,试剂盒参考值建议为阴性对照品检测荧光值(negative control counter,NCx)×2.1;连续制备的3批试剂盒最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率均达到国家检定标准;于37℃恒温箱放置6 d后,检测性能无明显改变;临床研究比对试验Kappa指数为1,一致程度达100%。结论成功制备了HCMV IgM BA Mac TrFIA法检测试剂盒,该试剂盒灵敏度高,精密性较好,与同类产品检测结果相关性好,为临床HCMV lgM抗体的检测提供科学、可靠的诊断依据。

EB病毒抗体测定对儿童神经系统疾病诊断及治疗的价值分析

目的探讨EB病毒抗体检测在儿童EB病毒感染相关神经系统疾病中的诊断及治疗价值。方法选择我院小儿神经内科住院治疗患儿32例,采用免疫捕获法对其检测抗VCA-IgM/IgG抗体、抗EA-IgG抗体及抗NA-IgG抗体。结果 32例患儿中,抗EBV-VCA-IgM阳性20例(占62.5%),抗EBV-VCA-IgM阴性12例(占37.5%)。均给予更昔洛韦治疗,效果显著。结论 EBV 4种抗体检测能为临床准确地判断EBV感染的时期提供信息,提高EBV感染相关疾病诊断的敏感性,为治疗提供依据。